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为建立可应用于快速检测奶牛结核病、评估鲜乳污染状况、追溯传播途径的试验方法,本研究根据牛结核分枝杆菌基因组设计合成特异性引物,建立实时荧光定量PCR方法,并对反应条件进行优化,构建标准曲线,评价该方法的性能。结果显示,本研究所建立的实时荧光定量PCR方法能有效检测牛结核分枝杆菌目的基因,其最佳引物浓度为400 nmol/L,最佳退火温度为52 ℃。所构建的标准曲线相关性好,可用于样本的定量检测。该方法的性能评价显示,其最小检出模板浓度为80.24 ng/L,且该方法具有较好的特异性、可重复性,可对鲜乳样本进行检测。试验结果表明,本研究所建方法可用于牛结核分枝杆菌的定性和定量检测,这为奶牛结核病的诊断与净化及鲜乳食品安全评估提供重要技术。 相似文献
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结核病是由结核杆菌引起的人畜共患的传染病。结核杆菌分为人型、牛型和禽型。各型结核菌均可在不同动物间不同程度的互相感染。如牛型结核对人类,特别对儿童威胁很大。我们所观察的病例证实均系牛型结核杆菌对鹿的感染。鹿感染牛型结核杆菌以后在病理形态学上有何特点,与牛的牛型 相似文献
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本研究以分离的鹿结核分枝杆菌DNA为模板扩增免疫原性蛋白MPB70基因,获得约590 bp片段,并将其克隆,构建原核表达载体pET-30a-MPB70,将重组质粒转入大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导后纯化和SDS-PAGE分析,在20 ku处可见特异性蛋白条带。利用鹿结核阳性血清进行Western blotting鉴定,原核表达的融合蛋白可与鹿结核阳性血清抗体结合,并出现特异的免疫反应。该蛋白可作为特异性抗原进行鹿结核病的检测,从而为鹿结核病诊断方法的研究奠定基础。 相似文献
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鹿结核病的诊断、病原分离及鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
鹿结核病是由结核分枝杆菌引起的鹿的一种慢性、消耗性传染病 ,广泛流行于世界各地 ,不仅影响养鹿业的发展 ,也威胁人类健康。结核分枝杆菌有牛型结核分枝杆菌、人型结核分枝杆菌和禽型结核分枝杆菌三个型。据报道[1] 引起鹿结核病的主要病原体是牛型分枝杆菌 (40 %～ 5 9% )和鸟—胞内分枝杆菌 (30 %～ 4 0 % ) ,在鹿中存在结核菌素假变态反应和副变态反应 ,因此 ,不能单纯依靠变态反应方法进行初次定性 ,必须进行综合检查。为确诊本病我们采用病原体检查、变态反应学诊断及动物试验等方法 ,进行综合检查 ,将结果报告如下。1 流行情况20 0… 相似文献
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《畜牧兽医科技信息》2017,(10)
<正>奶牛结核病是一种由牛分枝杆菌所引起的牛的慢性传染病,具有感染性强的特点,通过奶制品,可传染至人或其他动物,易造成严重危害,属于二类动物疾病。近些年,奶牛结核病发病率有所上升,特别是规模化奶牛场,因此,奶牛结核病检疫引起了相关人士的关注与重视。如今,在科技发展的推动下,检测技术不断成熟、更新,在实践中得到广泛应用。其中,牛型结核分枝杆菌病PPD皮内变态反应试验与牛结核γ-干扰素ELISA试验是检测奶牛结核病的常用检测技术。 相似文献