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相似文献
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1.
1株鸽新城疫病毒F和HN蛋白的潜在抗原表位分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
从亲水性、抗原性、可塑性、表面可能性、二级结构等5项参数指标来综合预测1株鸽新城疫病毒(Newcastledisease virus,NDV)JN08株F和HN蛋白的潜在B细胞抗原表位,并比较其与疫苗株La Sota抗原表位的差异,同时对F和HN基因序列进行分析。综合预测显示:JN08株F和HN蛋白预测抗原表位分别有21,26处;La Sota F和HN蛋白预测抗原表位分别有19,25处。就F蛋白而言,与La Sota相比JN08毒株在82~87、99~102、411~412aa多出3处抗原表位,而在450~455aa缺失1处抗原表位。其中82~87、99~102aa这2处抗原表位位于裂解位点之前,是否对病毒的抗原性、蛋白水解酶的敏感性、毒力等造成影响还有待于进一步研究。就HN蛋白而言,JN08毒株与La Sota相比在128~132aa多出1处抗原表位,此表位位于HN蛋白的柄状部,该部分存在促进F蛋白融合活性的区域,JN08毒株在此区域多出1处抗原表位可能会对F蛋白的融合活性有一定的影响。  相似文献   

2.
La Sota与V4疫苗F蛋白的B细胞表位活性检测与比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据La Sota 和V4疫苗株F蛋白B细胞表位预测的结果,进行了表位区的鉴定和比较.将两疫苗株F基因预测存在差异的表位,根据序列位置邻近合并分成6段表位区,分别对每个毒株的6段表位区进行了亚克隆,并对每个毒株的预测区进行了表达.应用建立的Tricine缓冲体系50 g/L~200 g/L线性梯度聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳对表达情况进行了分析,得到5段多肽的大小分别是P1为8.0 ku,P2为10.8 ku,P4为11.6 ku,P5为13.5 ku,P6为10.5 ku.应用La Sota特异性抗血清,利用Western blotting对表达的各肽段进行了抗原性鉴定.结果表明,P1、P4、P5、P6段呈阳性反应,说明其中含有线性B细胞表位.这4段分别位于F蛋白的1 aa~48 aa,201 aa~274 aa,377 aa~458 aa和469 aa~530 aa,以前发现的中和性表位均不在这4段区域内.而P2段在Western blotting中无抗体反应性,表明它不含线性表位.比较研究发现NDV La Sota与V4株的P4区的B细胞表位活性存在着重要的差异,这种差异可能造成两个毒株的免疫原性差异.  相似文献   

3.
为了比较鸭源新城疫病毒(NDV)XZ株的HN蛋白的抗原表位与La Sota疫苗株间的差异,试验采用可塑性、亲水性、表面可能性、抗原性、二级结构等5项参数指标来综合预测鸭源NDV XZ株与疫苗株La Sota株HN蛋白的潜在B细胞抗原表位。结果表明:鸭源NDV XZ株HN蛋白预测抗原表位有26个,La Sota株HN蛋白预测抗原表位有25个。与La Sota株HN蛋白相比,多出2个抗原表位,缺失1个抗原表位。这3个表位的变化可能会对病毒识别细胞膜上的唾液酸受体及机体的免疫应答造成影响。两者HN蛋白都只有1个跨膜区域,位置接近。说明鸭源NDV XZ株HN蛋白与La Sota株HN蛋白相比,可能具有相近的抗原性,还需要进一步验证。  相似文献   

4.
从可塑性、亲水性、表面可能性、抗原性、二级结构等5项参数指标来综合预测1株基因Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV),NDV JSXZ株F蛋白的潜在B细胞抗原表位,并比较其与疫苗株La Sota抗原表位的差异,同时对F基因序列进行分析。综合预测显示:NDV JSXZ株F蛋白预测抗原表位有23处;La Sota F蛋白预测抗原表位分别有19处。与La Sota F蛋白相比,NDV JSXZ毒株在222~228、260~267、308~314、401~413位氨基酸处多出4处抗原表位,而在29~37、104~113、482~488位氨基酸有3处抗原表位不同。其中29~37、104~113aa这2处抗原表位位于裂解位点之前,可能对病毒蛋白水解酶的敏感性、毒力等造成影响。应用Protein-TM-Plot软件预测到NDV JSXZ株F蛋白有3个跨膜区域,分别位于9~27,115~143,497~525位氨基酸处,与La Sota株的三个跨膜区位置接近。结果提示,NDV JSXZ株F蛋白与La Sota株F蛋白相比,可能具有相近或更强的抗原性。  相似文献   

5.
用新城疫弱毒疫苗株La Sota阳性血清测定NDVMM,NDVLD,NDV-NH3株新城疫病毒地方分离株和标准株La Sota,F48E9的HI效价,以La Sota阳性血清对La Sota疫苗株的HI效价为参照,分析NDV地方分离株与疫苗株抗原交叉性。结果表明,NDV-MM,NDV-LD 2个野毒株HI效价与NDV-LD HI效价相近,但比La Sota HI效价低2.3个~2.7个滴度;NDV-NH与F48E9 HI效价相近,比La SotaHI效价低4.2个~4.3个滴度,提示以上3个野毒株与疫苗株之间的抗原相关性差异较大。动物免疫保护试验结果表明,经La Sota免疫(HI效价〉2^5)后攻毒保护率为80%-100%。  相似文献   

6.
为了解猪轮状病毒(PoRV)VP7蛋白的生物信息学信息,运用Expasy-ProParam、YinOYang-1.2、TMHMM-2.0、ABCpred和IEDB等软件,预测分析PoRV临床分离株GZAS2020和疫苗株NX VP7蛋白的基本理化性质、结构功能和B细胞抗原表位差异。结果显示:两种VP7蛋白均属于稳定蛋白、亲水性蛋白、跨膜蛋白和非分泌性蛋白;分离株与疫苗株的O糖基化位点数分别为55和62,N糖基化位点数均为1,磷酸化位点数分别为29和30;亚细胞定位均位于质膜,均以α-螺旋和无规则卷曲为主要结构,延伸和β-转角贯穿其中;GZAS2020株的B细胞抗原表位位于67~72 aa(PYANSTT)、97~100 aa(KWTE)、176~179 aa(QQTD)、276~283 aa(TTAPQTER),NX株位于96~99 aa(TKWK)、176~182 aa(QQTDEAN)、274~279 aa(DPTTTP)、310~317 aa(MSKRSRSL),两者在97~100、176~179、276~279 aa处存在相同的B细胞抗原表位,但GZAS2020株在无规则卷曲位置(67~72 aa)存在独特的B细胞抗原表位。以上结果说明,疫苗株NX与贵州省流行株GZAS2020在主要抗原蛋白上存在差异。  相似文献   

7.
为了研究PCV2ORF2的不同抗原表位重组PPVVP2基因真核表达质粒的体外表达情况与免疫原性,分别以PCV2SC株和PPVSC-1株为模板,扩增PCV2ORF2的抗原表位基因A、B、c(A:117~131aa,B:157~183aa,C:165~200aa)和PPVVP2基因。将A、B、C基因分别与PPVVP2基因串联,并插入到pCI真核表达载体中,构建了能同时表达PPVVP2蛋白和PCV20RF2抗原表位的重组质粒pCI—A—VP2、pCI13-Vp2、pCI—C—VP2。将重组真核表达质粒转染MDBK细胞,用间接免疫荧光试验检测各个质粒在细胞中的表达情况;并将其免疫小鼠,采用MTT比色法、流式细胞术和ELISA法检测免疫效果。结果显示,3种重组表达质粒转染细胞48h后都能检测到较强的免疫荧光;免疫小鼠后14~42d诱导的T淋巴细胞转化效率、CD4+/CD8+细胞比值以及PPV和PCV2抗体均显著高于对照组,且pCI—13-VP2免疫效率高于其他组。该结果表明PCV2ORF2上157~183aa抗原表位在3个抗原表位中抗原性最强,可作为PCV2与其他病毒二联疫苗研究的主要抗原表位。  相似文献   

8.
用生物信息学方法比较了GenBank中9株Ⅰ型IBDV与2株Ⅱ型IBDV基因片段A前体多聚蛋白的推导氨基酸(aa)序列,预测并分析了上述两型IBDV毒株前体多聚蛋白的线性B细胞抗原表位.结果表明,两型IBDV毒株的前体多聚蛋白有75个aa残基的差异,其上大多数预测B细胞抗原表位的位置及其指数值均无明显差异;但两型IBDV在第3~10位中的aa残基差异影响了该序列肽的预测指数和结构,以及与Ⅰ型IBDV多抗的反应性.  相似文献   

9.
以陕西8株鸡传染性支气管炎病毒(AIBV)分离株M蛋白的基因序列为基础,应用DNAStar软件中的MegAlign模块对其进行了同源性分析;用Kyte-Doolittle方法、Jameson—Wolf方法、Karplus—Schulz方法、Plot—Emini方法和Garnier-Robson方法综合预测了其中4株代表毒株的M蛋白B细胞抗原表位和二级结构。结果,8株AIBV的M蛋白主要在10~40aa和90~175aa处存在无规律的点突变,与参考毒株H52、M41、SAIB20、LX和Gray的M蛋白的核苷酸序列和预测的氨基酸序列的同源性分别介于87.4%~99.5%和96.3%~99.5%;分离株间的核苷酸序列和预测的氨基酸序列同源性分别介于91.8%~99.8%和95.4%~100%。4株代表株的M蛋白B细胞优势抗原表位都在159~164aa和181~193aa肽段区(这2个区域都包含了无规则卷曲和β-转角结构)或其附近。结果表明,AIBV分离株的M蛋白基因相对保守,只存在无规律的点突变,该变异对AIBVM蛋白B细胞表位的稳定性无影响。  相似文献   

10.
为了研究PCV2ORF2的不同抗原表位重组PPV VP2基因真核表达质粒的体外表达情况与免疫原性,分别以PCV2SC株和PPV SC-1株为模板,扩增PCV2ORF2的抗原表位基因A、B、C(A:117~131aa,B:157~183aa,C:165~200aa)和PPV VP2基因。将A、B、C基因分别与PPV VP2基因串联,并插入到pCI真核表达载体中,构建了能同时表达PPV VP2蛋白和PCV2ORF2抗原表位的重组质粒pCI-A-VP2、pCI-B-VP2、pCI-C-VP2。将重组真核表达质粒转染MDBK细胞,用间接免疫荧光试验检测各个质粒在细胞中的表达情况;并将其免疫小鼠,采用MTT比色法、流式细胞术和ELISA法检测免疫效果。结果显示,3种重组表达质粒转染细胞48h后都能检测到较强的免疫荧光;免疫小鼠后14~42d诱导的T淋巴细胞转化效率、CD4+/CD8+细胞比值以及PPV和PCV2抗体均显著高于对照组,且pCI-B-VP2免疫效率高于其他组。该结果表明PCV2ORF2上157~183aa抗原表位在3个抗原表位中抗原性最强,可作为PCV2与其他病毒二联疫苗研究的主要抗原表位。  相似文献   

11.
A monoclonal antibody, AVS-I, was produced from a hybridization of murine myeloma cells and splenocytes from mice immunized with the La Sota strain of Newcastle disease virus (NDV). The hybridoma producing AVS-I, selected from 184 NDV-positive supernatants, is one of two supernatants that reacted exclusively with lentogenic strains in an indirect enzyme-linked immunosorbent assay. AVS-I can also be assayed by hemagglutination-inhibition (HI), which was used to test selected reference avian paramyxovirus (PMV) strains of types 1 to 3. NDV vaccines La Sota and B1 and field isolates from chickens, turkeys, pigeons, and cockatoos were also used as antigens. AVS-I had a high binding affinity for all La Sota and B1 strains, including vaccines. The antibody bound with a lower titer to the Australian Queensland V4 and Ulster strains, but it did not bind to the F strain, a lentogenic strain from England. AVS-I was HI-negative against the other PMV reference strains. AVS-I may be valuable for identifying field isolates antigenically similar to La Sota and B1 and rapidly differentiate those vaccine strains from more virulent viruses.  相似文献   

12.
鸡新城疫病毒分离株与La Sota株灭活疫苗效力比较试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
用NDV分离株及La Sota株为抗源液,经福尔马林灭活后,与油佐剂混合,分别制成分离株灭活苗、La Sota株灭活苗及分离株与La Sota株二价灭活苗。将这三种灭活疫苗分别免疫SPF鸡后,均获得100%抵抗NDV分离株及F48株强毒攻击的保护力;而用这3种灭活苗与La Sota活苗单独或联合使用,免疫带有ND母源抗体的普通鸡后,3种灭活苗的免疫效力不同,分离株灭活苗与价灭活苗对NDV分离株攻击的免疫保护效力明显优于La Sota灭活苗;灭活苗与活苗同时使用,其免疫效力明显优于单独使用灭活苗或活苗。  相似文献   

13.
应用间接ELISA对新城疫LaSota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的IgA抗体动态变化进行了测定和比较。试验表明,LaSota和V4免疫鸡泪液中特异性IgA均在免疫后第5天出现,8天开始明显升高,与血清中IgG出现时间相似,免疫后21天达到高峰。LaSota免疫鸡的泪液IgA抗体水平略高于V4免疫鸡;而两免疫组哈德氏腺(HG)中的特异性IgA高峰出现较迟。免疫攻毒鸡泪液中的特异性IgA抗体水平均先呈短暂的升高,之后下降的趋势,而HG中的IgA则首先表现降低,之后很快升高,5天后趋于下降,两攻毒组差异不显著,对IgA回忆应答均不明显。  相似文献   

14.
The immunogenicity of three Newcastle disease virus (NDV) strains--V4, Hitchner B1 and La Sota, was assessed in chickens that had varying levels of maternal antibody to the virus. Chickens were immunised at different ages by the eye drop and aerosol methods. The immune response of chickens to similar doses of the strains was affected by the presence of maternal antibody. Both the level of maternal antibody and the strain of virus used affected the result. Strain La Sota was least affected as it took higher levels of maternal antibody to depress response to it than were required to have a similar effect on Hitchner B1 and V4. Strain V4 was the strain most affected by circulating maternal antibody. The results demonstrated that strain V4 was less immunogenic than Hitchner B1 and La Sota when used in chickens with maternal antibody to NDV.  相似文献   

15.
用新城疫病毒La Sota株作为复合物疫苗抗原,与新城疫特异性中和抗体混匀配制成4种不同比例的复合物疫苗,用1日龄普通雏鸡进行免疫效果对比试验。试验1~4组分别为免疫复合物疫苗1~4,试验5组免疫常规新城疫活苗,试验6组为空白对照组。免疫后3周采血测定HI抗体效价,同时用新城疫强毒北京株F48E9攻击。试验结果显示,试验1~6组HI抗体效价分别为3.2log2、3.1log2、3.3log2、3.2log2、3.1log2、2.9log2;攻毒后,试验1~6组鸡的死亡率分别为15%、20%、0%、35%、30%、50%。因此,新城疫病毒La Sota株与新城疫特异性抗体制备成复合物疫苗,能保持疫苗中抗原的免疫原性,并可减轻疫苗的毒副作用,提高疫苗的安全性,其免疫效果比常规活苗好。  相似文献   

16.
本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒(NDV)特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明,V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前3天左右出现,但除高峰期(1周左右)外,其HI抗体水平均低于LaSota免疫鸡。LaSota免疫鸡。LaSota疫羁免疫鸡血清中NDV特异性IgM和IgGr抗体高峰较V4免疫鸡提前约2周出现,攻毒后,LaSota免疫鸡血清中特异性IgG和IgG回忆应答显著,而V4免疫鸡IgM和IgG回忆应答不明显。  相似文献   

17.
用标准疫苗株La Sota活疫苗在隔离器中接种SPF鸡,进行免疫保护试验.免疫后,每7 d采血监测NDV抗体,免疫后2周,利用经过鉴定的新城疫病毒(NDV)潍坊毒SGM01、昌乐毒SCL03、东营毒HY、日照毒SRZ03、莘县毒SSX03和标准强度F48E9分别进行攻毒试验,同时设SPF鸡对照.每天观察,及时剖检发病鸡,检查鸡群病变,确定疫苗的保护性.结果表明,La Sota疫苗能对除SGM01和HY以外的病毒攻击的SPF鸡提供较好的保护.  相似文献   

18.
D J King 《Avian diseases》2001,45(2):512-516
In a study of low-virulence Newcastle disease virus (NDV) isolates from poultry, 38% of the isolates had a more thermostable hemagglutinin than the lentogenic reference strains B1 and La Sota or live vaccines derived from those strains. Whether those strains with a more thermostable hemagglutinin are truly indigenous or whether they could have originated from vaccines used in the flocks was unknown. Seven monovalent NDV vaccines of B1 or La Sota type and reference B1 and La Sota strains were heat treated at 56 C to select variants more thermostable than the parent virus. Four thermal treatment cycles were completed, and virus propagated from the second and fourth heat treatments was assayed for changes in thermostability and antigenicity. The hemagglutinin thermostability of all vaccine and reference strain variants increased from the initial < or =10 min to > or =120 min after four treatments. Antigenic changes evaluated by hemagglutination inhibition against NDV monoclonal antibodies identified changes in only the heat-treated La Sota strains. The results demonstrate that the field isolates with a more thermostable hemagglutinin could have been derived by selection from the heterogenous NDV populations in vaccine strains and that minor antigenic changes may be a result of that selection.  相似文献   

19.
The immunogenicity of the Australian Newcastle disease virus (NDV) strain V4 was compared with that of the International reference preparation of Hitchner B1 and a commercial La Sota strain. Immunity was assessed serologically using the log mean HI titres 21 days after immunisation, the percentage of birds in each group which developed titres greater than 2(3) and their resistance to graded challenge doses of the virulent Herts 33/56 strain of NDV. These tests showed that the V4 strain was significantly less immunogenic (P less than 0.01) than the B1 or La Sota strains when administered intraocularly (eye drop) or by aerosol methods. When given in the drinking water V4 induced a better immunity (P less than 0.01) than the B1 strain in one of 2 experiments.  相似文献   

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