共查询到19条相似文献，搜索用时 953 毫秒
1.
细胞凋亡抑制基因免疫对小鼠生长及生长激素的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本实验用细胞凋亡抑制基因 (bcl- 2 )JLV重组质粒 (JLV -bcl)免疫小鼠 ,测定免疫后小鼠的生长及血浆GH浓度。结果表明 ,经bcl- 2免疫后实验组小鼠体重均低于对照组 ,在 7～ 8周龄时实验A组小鼠体重与对照组存在显著差异 (P <0 .0 5)。用RIA双抗法检测血浆中生长激素 (GH)浓度 ,发现在首免后 3周实验A组小鼠的GH浓度显著低于对照组 (P <0 .0 5)。这些结果均提示bcl- 2基因与小鼠生长有关 ,如果用基因治疗的方法增加bcl- 2基因表达量可以增加小鼠的生长速度 相似文献
2.
抑制素基因免疫对小鼠生殖的影响 总被引：27，自引：5，他引：27
用编码抑制素α（1－32）的基因与pcDNA3.1真核表达质粒进行重组，构建抑制素基因疫苗NH。将30只2周龄ICR小鼠随机分为3组（每组10只），试验Ⅰ，Ⅱ组分别经脂质体介导肌肉注射iINH15μg()0μL,25μg(100μL)，对照组注射免疫空载体pcDNA3.115μg(100μL)。首次免疫后间隔3周加强免疫1次。小经pINH基因免疫后，用ELISA可从血浆中检测到抑制素抗体，表明pINH可在活体肌细胞内表达，表达产物具有制素抗原性，能激活免疫系统产生抑制素抗体。抑制素抗体P／N＞2视为阳性，阳性率为30％（6／20）。抑制素抗体阳性小鼠与阴性小鼠的产仔数，初生重和窝重等没有显著差异（P＞0．05）。抗体阳性组首次免疫后，雌鼠血浆FSH浓度略有升高，经过加强免疫后显著升高（P＜0．05）。由此可以看出，抑制素基因免疫可以诱导产生抗抑制素抗体，并促进促卵泡素的分泌。 相似文献
3.
将150只小鼠随机分成4个处理组和1个对照组，每组30只。给4个处理组小鼠分别一次性注射氯化镉1、2、4、6mg／kg（按体重给药），对照组小鼠注射等体积的生理盐水。于注射后第3、6和9d用原位末端标记法（TUNEL）测定睾丸内生精细胞的凋亡率，并用免疫组织化学方法检测bax和bcl-2基因的表达水平。结果显示，各染毒组小鼠的生精细胞凋亡率明显升高，与对照组相比差异显著（P〈0．05），并具有剂量-反应关系和时间-反应关系。bax基因的表达水平明显上升，而bel-2基因的表达水平明显下降。表明，镉可以诱导小鼠生精细胞凋亡，其机制可能与bax基因上调和bcl-2基因下调有关。 相似文献
4.
鸡Bcl—2基因的克隆及其对卵泡闰细胞凋亡的影响 总被引：5，自引：1，他引：4
将鸡的Bcl-2基因克隆到真核表达载体JLV，构建了重组质粒JLVB。0．2μg／孔JLVB重组质粒经脂质体介导转染卵泡颗粒细胞，应用流式细胞术等方法分析了转染Bcl-2基因后原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。与对照组相比，转染后的传代细胞分裂速度较快（P＜0．01），凋亡比率较低，G2／M＋S期细胞比例极显著高于对照组（P＜0．01）。这些结果表明，Bcl-2基因具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用，这种作用是直接的。在转染时间为12h、DNA量为0．3μg/孔的条件下，较好的脂质体介导用量的1．2μL／孔。 相似文献
5.
基因枪与肌肉注射猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗诱导小鼠体液及细胞免疫的比较研究 总被引：8，自引：2，他引：8
猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗（pcDNA—PRRSV—ORF5）以不同免疫途径（基因枪和肌肉注射）免疫BALB／c小鼠，以PBS和空载质粒pcDNA3．1（＋）为对照，采用流式细胞仪（FACS）、淋巴细胞增殖试验（MTT法）及间接ELISA试验分别对小鼠外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数、T淋巴细胞的转化功能及小鼠血清中特异性PRRSV血清抗体IgG动态变化进行了检测。结果表明，pcDNA—PRRSV-ORF5基因疫苗接种小鼠后外周血对ConA有明显的反应性，试验组与对照组比较差异极显著（P〈0．01）或显著（P〈0．05），CD4^＋T淋巴细胞数在免疫后7d高于对照组（P〈0．01），CD8^＋T淋巴细胞在免疫后28d高于对照组，不同途径基因疫苗接种小鼠后均诱导小鼠产生PRRSV特异性IgG。在诱导细胞免疫方面，基因枪和肌肉注射各组间无明显差异；在诱导体液免疫方面，基因枪法优于肌肉注射。研究表明制备的pcDNA—PRRSV—ORF5基因疫苗免疫小鼠能够诱导其机体产生良好的体液和细胞免疫应答，基因枪法较肌肉注射更能诱导体液免疫应答的产生。 相似文献
6.
为了研究猪IL-2基因的真核质粒和融合基因形式对pcDNA—E39．VP2真核共表达质粒的免疫增强作用,分别将IL-2基因插入pcDNA3．1（＋）和pcDNA—E39．VP2（已构建）中构建重组质粒pcDNA-IL2和pcDNA-IL2-E39．VP2。将真核质粒pcDNA-IL2-E39．VP2免疫小鼠,另外,将pcDNA—IL2分别先于和后于pcDNA-E39．VP23d免疫小鼠,同时设pcDNA-E39．VP2对照组。对免疫小鼠进行PPV（JEV）抗体水平、脾脏淋巴细胞增殖功能和外周血T淋巴细胞亚群变化的检测。结果显示,1周后,pcDNA-IL2-E39．VP2免疫组和pcDNA—IL2后于pcDNA—E39．VP注射的免疫组JEV／PPV抗体水平和脾脏淋巴细胞增殖活性显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）高于对照组,pcDNA-IL2先于pcDNA—E39．VP注射的免疫组仅在第5周显著（P〈0．05）高于对照组;各组（除对照组外）CD8^＋值差异不显著（P〉0．05）,CD4^＋、CD4／cD8值都高于对照组,其中pcDNA-IL2-E39．VP2免疫组与对照组差异极显著（P〈0．01）。结果表明,IL-2能增强pcDNA-E39．VP诱导小鼠的免疫能力,且以融合基因形式构建的真核质粒免疫增强效果最明显。 相似文献
7.
用PCR技术和重叠延伸剪接技术获得牛分枝杆菌esat-6基因和mpb70-mpb83融合基因，连接真核表达载体pcDNA3．1（＋），构建了重组质粒pCE6和pC70-83-E6。分4组免疫小鼠：pCE6组、pC70—83-E6组、pcDNA3．1（＋）和PBS对照组，采用间接EI。ISA法检测免疫小鼠血清特异性抗体水平，MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况和IFN—y分泌情况。结果表明，2重组质粒免疫组小鼠的血清抗体水平持续上升，而2对照组始终维持在较低水平，且pC70-83-E6组小鼠的抗体水平高于pCE6组。经PPD刺激后，pCE6组和pC70—83-E6组小鼠的SI值与2对照组均差异显著（P〈0．05），2重组质粒免疫组间差异不显著（P〉0．05）；2重组质粒免疫小鼠脾细胞产生的IFN—y均显著高于2对照组（P〈0．05），且pC70-83-E6组明显高于其他3组（P〈0．05）。证实本试验构建的2种牛分枝杆菌DNA疫苗可有效诱导实验动物产生体液免疫和细胞免疫应答。 相似文献
8.
为了探讨复方板蓝根制剂对小鼠生长性能和免疫力的影响，以便为开发中药免疫增强剂提供实验依据。将100只21日龄、质量相近、健康状况良好的小鼠随机分为10组：I组为空白对照组，饲喂常规饲料；Ⅱ和Ⅲ组为黄霉素对照组和黄芪多糖对照组，分别饲喂添加1．0g／kg黄霉素和1．0g／kg黄芪多糖的饲料；IV—VII组为板蓝根对照组、鱼腥草对照组、陈皮对照组和黄芪对照组，分别饲喂添加1．0g／kg相应药物的饲料；Ⅷ一X组为试验组，分别饲喂添加0．5g／kg、1．0g／kg和1．5g／kg复方板蓝根的饲料。结果表明，X组小鼠的料肉比显著降低，日增重显著提高，力竭游泳时间显著延长（P〈0．05）；Ⅸ组小鼠的免疫细胞水平明显提高，肝指数明显增加；VIII组小鼠的脾指数增加最为明显，提示复方板蓝根制剂能提高小鼠的生长性能，并增强小鼠的免疫力。 相似文献
9.
将鸡的 Bcl- 2基因克隆到真核表达载体 JL V中 ,构建了重组质粒 JL VB。 0 .2μg/孔 JL VB重组质粒经脂质体介导转染卵泡颗粒细胞 ,应用流式细胞术等方法分析了转染 Bcl- 2基因后原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。与对照组相比 ,转染后的传代细胞分裂速度较快 (P<0 .0 1) ,凋亡比率较低 ,G2 / M S期细胞比例极显著高于对照组 (P<0 .0 1)。这些结果表明 ,Bcl- 2基因具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用 ,这种作用是直接的。在转染时间为 12 h、DNA量为 0 .3μg/孔的条件下 ,较好的脂质体介导用量为 1.2 μL/孔。 相似文献
10.
为了探讨快慢羽基因对崇仁麻鸡早期生长速度是否有影响,我们进行了崇仁麻鸡快羽和慢羽鸡0～11周龄的体重测定,现将结果报道如下: 相似文献
11.
小鼠对猪囊虫抗原基因TS76的免疫应答 总被引：3，自引：0，他引：3
将猪囊虫抗原基因 TS76的真核表达型质粒 VTS76单独或与 p UC18联合肌肉免疫注射于 BAL B/ c小鼠 ,以MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞 Con A刺激的增殖反应及 IL - 2的诱生活性 ,EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果发现 ,VTS76免疫小鼠各项细胞和体液免疫应答反应指数均比空白对照组小鼠显著提高 ;联合免疫组小鼠的细胞免疫应答和体液免疫应答反应指数均比 VTS76小鼠提高。由此可见 ,以 VTS76免疫小鼠可诱导其特异性细胞和体液免疫反应 ,而 p UC18又明显提高了 VTS76免疫小鼠的免疫应答水平 ,具有显著的免疫增强作用 相似文献
12.
本实验以猪带绦虫 TS11抗原基因的真核表达型质粒 VTS11肌肉免疫注射 BAL B/ c小鼠 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测小鼠脾淋巴细胞刀豆蛋白 A(Con A)刺激的增殖反应及 IL- 2的诱生活性 ;用 EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果显示 VTS11免疫小鼠血清的特异性抗体滴度和 Ig G含量显著高于空白对照组小鼠 ;免疫小鼠脾脏淋巴细胞 Con A刺激增殖反应和 IL - 2诱生活性均比对照组小鼠显著增强 ;VTS11免疫小鼠的淋巴细胞和巨噬细胞等免疫细胞的数量也显著超过对照组。这表明 VTS11免疫小鼠 ,可诱导其产生特异性的细胞和体液免疫反应 ,VTS11具有很强的免疫激活作用 ,可望成为预防猪囊虫病的一种新型疫苗。 相似文献
13.
为了探讨通过与生长激素受体（growth hormone receptor,GHR）胞外域（extracellular domain,ECD）特异结合的抗体能否激活或抑制GHR的信号传导,从而调节动物的生长,本试验首先通过基因工程途径制备了鸡GHR N端120个氨基酸残基的GHR ECD重组蛋白,并以此蛋白作为抗原免疫生长鸡,观察对鸡采食、生长和胴体组成的影响。高、低剂量组血液中抗GHR抗体水平在免疫后极显著上升（P<0.01）,并在试验期间处于极显著高于对照组的非特异水平（P<0.01）。免疫GHR ECD显著抑制了鸡的生长（P<0.05）,使高、低剂量组鸡在首免后第30天体重就已经显著低于对照组鸡并持续至试验结束（P<0.05）。在增重受抑制后,免疫GHR鸡在后期的采食量也显著降低（P<0.05）。屠宰时对照组的体重、屠宰率、半净膛率、全净膛率和腹脂率都高于2免疫组。以上数据说明,对生长鸡免疫GHR ECD所产生的抗GHR抗体将显著抑制鸡的生长,这一方法并不能促进鸡或其他动物的生长性能,但有可能被应用于其他需要限制动物生长如后备种鸡的培育方面。 相似文献
14.
本试验旨在研究植物甾醇对雌性小鼠生长及生殖激素的影响。选用50只35日龄雌性小鼠,适应1周后随机分为5组,分别为：对照组、植物油组（给予0.1 mL植物油）及植物甾醇低、中、高三个剂量组（每日灌胃20、80和320 mg/kg植物甾醇）。连续灌胃3周,第1天和第22天称取小鼠体重,然后眼球采血,制备血清,对小鼠血清中的雌二醇、孕酮、催乳素水平进行检测,研究不同添加量的植物甾醇对小鼠生长及生殖激素的影响。结果显示：与对照组相比,植物油组小鼠体增重差异显著（P＜0.05）。与植物油组相比,植物甾醇处理组小鼠体增重先升高后降低,但差异不显著（P＞0.05）。植物甾醇对小鼠血清E2水平有不同程度的提高,其中中剂量组小鼠的雌二醇水平最高（270.52＆#177;18.10 pmol/L）;随着植物甾醇灌胃剂量的增加,小鼠孕酮水平都有不同程度的下降,其中植物甾醇中剂量组小鼠血清孕酮水平显著低于对照组（P＜0.05）。植物甾醇灌胃组小鼠催乳素水平与对照组相比,差异不显著（P＞0.05）。表明低剂量植物甾醇可提高KM雌性小鼠的体增重;植物甾醇能提高KM雌性小鼠血清雌二醇水平,但对孕酮和催乳素的作用不显著。 相似文献
15.
Eighteen chickens were immunized subcutaneously with purified type 1 fimbriae from Salmonella enterica serotype Enteritidis at 18 and 21 weeks of age. Evidence of IgG and IgA responses was found in the eggs and in the sera of the immunized hens. Three weeks later, immunized and non-immunized chickens (n=18) were challenged intravenously with 2x10(7) live Salmonella enterica serotype Enteritidis. There was no significant difference in the numbers of eggs laid by immunized and non-immunized birds. The percentage of Salmonella contaminated eggs was significantly higher in the non-immunized group than in the immunized group due to a higher percentage of contamination of the externally disinfected egg shells. There were no statistical differences in the percentages of contaminated yolks and egg whites between control and immunized birds. No differences in the number of colonizing bacteria could be found in the spleen nor in the liver between the immunized and the control groups throughout the experiment. Salmonella was cleared from the ovary of the immunized birds in the second week p.i., in contrast to the control birds where Salmonella was isolated till the third week after infection. Oviducts were significantly more infected in the control group than in the immunized group. Salmonella was cleared from the oviducts at 3 weeks p.i. in the immunized hens but not in the control hens. In conclusion, we demonstrated that the immunization of laying hens with type 1 fimbriae reduced the number of contaminated eggs and reduced the colonization of the reproductive organs. 相似文献
16.
犬细小病毒编码的VP2蛋白是该病毒主要抗原蛋白。研究证实由VP2基因制备的DNA疫苗能够刺激机体产生免疫应答反应。为提高VP2DNA疫苗的免疫原性,本研究在小鼠体内尝试了利用犬白细胞介素2（cIL-2）基因增强VP2DNA疫苗免疫应答的研究。通过RT-PCR方法从犬脾淋巴细胞中分别扩增含终止密码子和不合终止密码子的cIL-2cDNA基因,然后将基因插入到真核表达载体pcDNA3．1中,分别构建成非融合的和与Myc／His融合的clL-2基因真核分泌型表达载体,pcDNA-cIL-2和pcDNA-cIL-2／MH。将pcDNA-oIL-2／MH表达栽体通过磷酸钙方法转染HEK293T细胞进行瞬时表达,以确定构建的表达栽体能否介导cIL-2在真核细胞中进行分泌表达。然后用VP2表达载体（pcDNA-CD5sp-VP2,本室构建）单注射和VP2／IL-2表达载体共注射对小鼠进行免疫（用pcD-NA3．1栽体作为阴性对照）。免疫后通过ELISA方法检测免疫后不同时期小鼠血清VP2的抗体水平,并通过细胞增殖试验检测免疫后小鼠脾脏淋巴细胞的增殖反应,用ELISA方法测定小鼠淋巴细胞γ干扰素的表达水平。试验结果表明,扩增的小鼠cIL-2基因与GenBank的参考序列一致,构建的cIL-2表达载体能够介导重组cIL-2在HEK293T细胞中进行分泌表达。免疫结果显示,利用cIL-2／VP2表达载体共免疫小鼠,免疫后35d血清中VP2的抗体水平达到1：5120,明显高于VP2表达载体单免疫组（P〈0．01）。淋巴细胞增殖试验表明,2组免疫小鼠的淋巴细胞刺激指数均明显高于阴性对照组（P〈0．01）,共免疫组的刺激指数又明显高于单免疫组（P〈0．05）。共免疫小鼠淋巴细胞7干扰素的表达水平明显高于单免疫组和阴性对照组（P〈0．01）。由此可见,cIL-2表达载体可明显提高CPVVP2基因疫苗的免疫应答水平。 相似文献
17.
白细胞介素-12对犬细小病毒VP2 DNA疫苗的免疫增强作用 总被引：1，自引：0，他引：1
犬细小病毒编码的VP2蛋白是该病毒重要的结构蛋白和抗原蛋白。利用VP2基因制备的DNA疫苗能够刺激机体产生免疫应答反应。为进一步提高VP2DNA疫苗的免疫应答水平,本研究在小鼠体内尝试了利用白细胞介素12（IL-12）基因表达载体提高VP2DNA疫苗的免疫应答水平。首先采用RT-PCR方法从小鼠脾淋巴细胞中分别扩增IL-12大亚基（P40）和小亚基（P35）cDNA基因;然后在真核表达载体pcDNA3.1A上通过引入内部核糖体进入位点（IRES）序列,分别将P40基因和P35基因插入到IRES序列的上下游,构建成IL-12（P40和P35双亚基）基因表达载体,pcDNA-P40-IRES-P35。将上述表达载体与本室构建的VP2表达载体通过磷酸钙方法转染HEK 293T细胞进行瞬时表达,以确定构建的表达载体能否介导相应基因在真核细胞中进行分泌表达。然后用VP2载体单免疫和VP2载体和IL-12载体共免疫方法对小鼠进行免疫（用pcDNA3.1A作为对照）。免疫后在特定时间通过ELISA方法检测小鼠血清抗VP2蛋白的抗体水平,并通过淋巴细胞增殖实验检测免疫后35d小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应。结果表明,扩增的小鼠IL-12P40和P35亚基基因与GenBank的参考序列基本一致。Western-blot检测结果表明,重组IL-12和VP2均能够在HEK293T细胞中进行分泌性表达。ELISA检测结果表明利用IL-2载体与VP2载体共免疫小鼠,其血清中抗VP2的抗体水平明显高于VP2载体单免疫组（P〈0.01）,抗体水平在第35天高达1：5120。淋巴细胞增殖试验结果表明,免疫小鼠的淋巴细胞刺激指数均明显高于对照组（P〈0.01）,VP2载体与IL2载体共免疫组的刺激指数明显高于VP2载体单免疫组（P〈0.05）。由此可见,在小鼠体内,IL-12基因表达载体可明显提高CPV VP2基因疫苗的免疫应答水平。 相似文献
18.
The effects of Ampelopsis grossedentata extract on growth performance, diarrhea rate and anti-oxidation function in mice were studied in this experiment. 90 mice were randomly divided into five groups: Blank group, experimental groups Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ and control group. The mice in blank group were fed with basal diet, the experimental groups were added with 0.02, 0.04, 0.06 mg/(g·BW) of Ampelopsis grossedentata extract and the control group was added with colistin sulfate in basal diets, respectively. On the 26th day of the trial, the mice were administered folium senna and then record their diarrhea condition. The results showed that, the finial weights of mice in experimental and control groups were higher than that in blank group, and the difference between the blank and control groups were significant (P<0.05). Adding Ampelopsis grossedentata extract had a tendency to increase growth performance and liver weight, but the difference was not significant (P>0.05). The diarrhea rates in the control and experimental groups Ⅱ,Ⅲ were significantly lower than the blank and experimental group Ⅰ(P<0.05). Compared with the blank group, the activity of the serum glutathione peroxidase (GSH-Px) was significantly increased in control group (P<0.05), while the increasing trends were not significant in experimental groups (P>0.05). The activity of catalase (CAT) in control group was significantly higher than that in experimental group Ⅱ (P<0.05), and the serum superoxide dismutase (SOD) activities among the experimental groups were not significant (P>0.05). In conclusions, the growth performance and anti-oxidation function in mice could be increased, while the diarrhea rate could be decreased by adding the Ampelopsis grossedentata extract. It suggested that Ampelopsis grossedentata extract was expected to become a substitute for antibiotics in animal feeds. 相似文献
19.
为了进一步探讨黑素皮质素4受体(melanocortin-4 receptor,MC4R)基因对动物采食量和生长性能的影响,本研究利用基因重组和显微注射的方法建立了转猪MC4R基因的小鼠模型。采用PCR扩增、克隆测序的方法对每代转基因小鼠进行阳性鉴定,然后采用常规测定方法对F3代转基因阳性鼠与同期阴性对照鼠的体重和采食量进行了测定。结果显示:成功构建了转猪MC4R基因小鼠模型,阳性鼠与阴性鼠相比,体重和采食量均略有增加,但未达到显著水平(P>0.05)。据此推测体内超表达MC4R基因并不能像敲除掉该基因一样显著地改变机体性能。 相似文献