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1.
将ＮＤＶＤ１０毒株于鸭胚尿囊腔和绒毛膜两个途径接种传代至５０代,分别测定不同代次胚液病毒ＨＡ、ＥＩＤ５０及免疫原性,结果表明该病毒用尿囊腔途径接种也可获得较高滴度病毒,不同代次病毒液ＨＡ和ＥＩＤ５０都分别在１∶２５６和１０８．０／０１ｍｌ以上,免疫原性良好,但鸭胚致死性随传代次数增加而减轻,１２０小时内死亡率仅说明该病毒稳定性良好。该病毒于－２０℃和－５０℃保存期分别达６和１２个月,最小免疫剂量≤５０００ＥＩＤ５０ 相似文献
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将ＥＤＳ７６ＧＣ２毒株接种于１０～１１日龄鸭胚尿囊腔内,连续传至第３０代,分别测定不同代次胚液病毒ＨＡ、ＥＩＤ５０及其免疫原性。结果,该病毒不同代次胚液ＨＡ和ＥＩＤ５０分别在１∶２１５和１０５．０／０．１ｍＬ以上,免疫原性良好,对鸭胚致死性随传代次数增加而减弱,说明该病毒稳定性良好。于－２０℃和－５０℃可分别保存６和１２个月以上。 相似文献
3.
根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二各病毒混合毒种的最适稀释比例，将混合毒种接种９－１０龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养），使接种鸡胚９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，０．０１ｍｌ尿囊液含：ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０、ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。收获同胚培养的胚毒，制备同胚培养的胚毒，制备油乳剂灭活疫苗。用三批疫苗分别免疫１８日龄雏鸡，免疫后４周二联疫苗的有效抗体分别为：ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）≥１：１６、ＩＢ中和抗体 相似文献
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１ 材料和方法 １１ 抗原制备 分别将ＮＤＬａｓｏｔａ株和ＥＤＳ７６种毒接种９～１１日龄鸡胚、鸭胚增殖病毒,收获感染胚液,经检测血凝价（ＨＡ）ＮＤ为≥１∶６４０,ＥＤＳ７６≥１∶２０４８０,病毒含量以尿囊腔内注射的感染量≥１０６０ＥＩＤ５０／０１ｍｌ时,可用于制苗用毒,经甲醛溶液３７°Ｃ灭活备用。１２ 油相制备 取１０号白油,司本８０按一定比例混合后加硬脂酸铝少量,随加随搅拌,煮沸至透明为止,高压灭菌后备用。１３ 水相制备 将灭活的Ｌａｓｏｔａ．ＥＤＳ７６尿囊液按一定比例混匀后,加入吐… 相似文献
5.
鸡减蛋综合症病原分离鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
通过鸭胚传代，病毒中和试验，Ｈ１交叉试验，理化特性测定，血凝谱试验，琼脂免疫扩散试验，电镜观察证实，我们所分离的病原为减蛋综合症病毒（暂定为ＥＤＳＶ－Ｒ９３１），该病毒的鸭胚毒价为１０＾１４．４４ＥＩＤ５０／０．１ｍ１。 相似文献
6.
本研究根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二种病毒能在鸡胚中繁殖的特点，通过筛选上述二种病毒的最适稀释比例，将混合毒种接种９～１０日龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养）使接种鸡胚尿囊液９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，每０．１ｍｌ尿素液含ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０，ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。本试验用兔抗ＮＤＶ，ＩＢＶ血清抗体封闭相应病毒测定混合毒获得成功，本研究目的在于为制备鸡二联油乳灭活功时改进繁毒方法，降低疫苗成本。 相似文献
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鸭冠状病毒的分离目前国内外尚无报道．我们将回归发病鸭的肠粪及肠内容物处理后，经羊膜腔、尿囊腔接种１２～１４日龄鸭胚，３７℃培养４８小时后取羊水和尿囊液继代，将第５代的鸭胚羊水、尿囊液混合（称ＤＣＶ５）并对其进行系统鉴定，结果表明；该病毒在鸭胚；其ＴＣＩＤ５０为５．０，电镜负染观察多呈不规整的圆形，直径８０～１２０ｎｍ。有囊腹，病毒粒子外周有花瓣样突起。核酸型为ＲＮＡ型，对乙醚敏感、５６℃１５分钟即可使其失去感染性，在ｐＨ３条件下室温３小时仍保持一定活力，该毒接种幼鸭可引起幼鸭腹泻症状，接种幼鸡和火鸡不引起任何症状。 相似文献
8.
鸭病毒性肝炎Ａ６６鸡胚弱毒冻干疫苗的毒价为１０７．２４ＣＥＬＤ５０／０．１ｍｌ，冻干前同批鸡胚毒毒价为１０７．４０ＣＥＬＤ５０／０．１ｍｌ。冻干过程中损失的毒价在０．５个滴度之内。本冻干苗的免疫期与鸡胚混合毒相同，对雏鸡至少为４５天。冻干苗的有效保存期为：－２０℃，２年；０～４℃，８个月，２０～３０℃，１０天 相似文献
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鸭冠状病毒的分离鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
鸭冠状病毒的分离目前国内外尚无报道。我们将回归发病鸭的肠粪及肠内容物处理后，经羊膜腔、尿囊腔接种１２￣１４日龄鸭胚，３７℃培养４８小时后取羊水和尿囊液继代，将第５代的鸭胚羊水、尿囊液混合并对其进行系统鉴定。结果表明：该病毒在鸭胚，其ＴＣＩＤ５０为５．０，电镜负染观察多呈不规整的圆形，直径８０￣１２０ｎｍ，有囊膜，病毒粒子外周有花瓣样突起，核酸型为ＲＮＡ型，对乙醚敏感、５６℃１５分钟即可使其失去感染 相似文献
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鸽新城疫病毒毒价的血凝价,ELD50和TCID50值相关性比较 总被引：2，自引：0，他引：2
本文比较了用血凝反应（ＨＡ）,在鸡胚成纤维细胞上的ＴＣＩＤ５０及用发育鸡胚做ＥＬＤ５０来测定鸽新城疫病毒（ＮＤＶ）毒价的相关性。结果表明,鸽ＮＤＶ毒价的ＴＣＩＤ５０和ＥＬＤ５０的值基本相同。ＨＡ滴度虽然与ＴＣＩＤ５０值有一定的相关性,但远不如ＴＣＩＤ５０准确。接种病毒后死亡鸡胚的新鲜尿囊液经冻融后,其中鸽ＮＤＶ的ＨＡ滴度和ＴＣＩＤ５０均逐渐下降。每经一次冻融,毒价几乎减少５０％。 相似文献
11.
在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＥＣＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１：２０４８０－１：３２７６８０倍。 相似文献
12.
减蛋综合征病毒末端片段的克隆及细胞内DNA重组 总被引：6，自引：0，他引：6
采用９～１０日龄非免疫鸭胚增殖的减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）ＡＡ－２毒株,经差速离心法浓缩纯化后,提取病毒基因组ＤＮＡ。采用碱变性法除去病毒基因组共价结合的末端蛋白（ＴＰ）。用限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ水解纯化的ＥＤＳＶ基因组ＤＮＡ。经低熔点琼脂糖凝胶电泳后,回收Ｃ、Ｄ、Ｅ片段。克隆到ｐＵＣ１９载体的ＨｉｎｄⅢ和ＳｍａⅠ双酶切位点及ＨｉｎｄⅢ位点上,经蓝白斑筛选和单、双酶切鉴定,获得了ｐＵＨＣ、ｐＵＨＤ、ｐＵＨＥ重组质粒,其中ｐＵＨＣ含有末端片段。将ＥＤＳＶＳａｌⅠ水解产生并回收的大片段与ｐＵＨＣ在９５℃水浴中变性,６５℃复性后,用钙离子介导法,共转染５０％～７０％的单层鸭胚成纤维细胞,转染后３６ｈ开始产生细胞病变（ＣＰＥ）。４８ｈ后将病变细胞反复冻融,经尿囊腔接种９～１０日龄鸭胚,回收的尿囊液能凝集鸡红细胞,这种血凝性能被ＥＤＳＶ高免血清抑制,电镜下观察到腺病毒样颗粒。 相似文献
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应用ＮＤＬａＳｏｔａＮ７９株和ＥＤＳ－７６Ｈ９３１株，分别接种鸡胚和鸭胚增殖病毒．血凝价分别达到≥１：１２８０和≥１：１００００时，收取病毒．经福尔马林灭活．按一定比例加入吐温８０、司本８０、硬脂酸铝和白油，高速搅拌均匀，制成ＮＤ和ＥＤＳ－７６二联疫苗。该苗具有良好的免疫力，其中两种病毒无相互干扰性，接种鸡群无不良反应。疫苗置４～８℃和１５～３０℃分别保存８和６个月不破乳．不分层，颜色无变化。用联苗接种６０００余只父母代种鸡，接种后２５天．ＮＤ和ＥＤＳ－７６抗体可先后达到高峰，接种后９个月，鸡群ＮＤ和ＥＤＳ－７６抗体平均效价仍分别保持在７．０和５．６ｌｏｇ２水平上。对１６～１８周龄产蛋母鸡（皮下注射１ｍｌ／只）应用２０万羽份的联苗证明，疫苗安全．效力确实，使用方便．效益显著。 相似文献
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鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定 总被引：12，自引：0，他引：12
天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病,经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎（ＧＩＢ）,并分离出ＩＢＶ ＪＢ９７０２株,ＨＡ效价为２＾１２,ＥＩＤ５０为１０＾－６．８１／０．２ｍＬ。病毒干扰试验中,ＩＢＶ ＪＢ９７０２＋ＮＤＶ ＬｓＡｏｔａ接种鸡胚ＨＡ效价为２＾４～６,ＬａＳｏｔａ接种鸡胚ＨＡ效价为２＾１０～１１;用ＩＢＶ ＪＢ９７０２病毒液１：１０稀释后感染经ＩＢＶ Ｈ 相似文献
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用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种１０－１２日龄鸭胚盲传，分离到一株ＥＤＳ－７６·ＥＸＫ２病毒。自第３代起至第１０代，均从鸭胚尿囊液中检出血凝素，凝集鸡红细胞的特性可被ＥＤＳ－７６阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集免红细胞。应用第３和第４代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡，成功地复制了ＥＤＳ－７６。攻毒后３５天内１１只试验鸡的总产蛋数无明显变化，产蛋率为８５～９４％， 相似文献
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１９９１年从云南某地疑似鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）的病雏鸭肝脏分离到一株病毒，经鸡胚染试验，电镜形态观察，中和试验鉴定，证明为鸭病毒性肝炎病毒１型（ＤＨＶ－Ｉ）毒株。该病毒对鸡胚高度适应，传递至８０代对雏鸭无致病力，经易感雏鸭连传代毒力无反强现象，故命名为ＤＨＶ－ＫＭ６０株。鸡胚测试其滴度为ＬＤ５０１０６－７．３２／０．２ｍｌ。采用ＤＨＶ－ＫＭ６０制备疫苗，经口服免疫，对１日龄雏鸭的安全性高，免疫原性 相似文献
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将ＥＤＳ７６－Ｎ株病毒种毒接种子鸭胚尿囊腔，培养增殖４８－１２０小时，收集尿量液，经福尔马林灭活加吐温－８０为水相，以１５号白油，司本－８０和硬脂酸铝为油相，制出灭活苗三批共十二多万羽，对疫苗的安全性和免疫原性等进行了试验，疫苗以双倍和三倍使用剂量注射４－８周龄易感鸡，安全性良好，对２日龄雏鸡接种１个使用剂量进行急性试验观察，对雏鸡没有急性毒性作用，雏鸡生长发育。用１个和１／２个使用剂量分别免疫４ 相似文献
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用鸡 减蛋综合征（ＥＤＳ）ＢＨ９１毒株接种鸭胚，收获鸭胚尿囊液，用一定浓度福尔马林灭活后加入吐温８０制成水相，司班８０和硬脂酸铝加入白油中制成油相，二者按一定比例乳化后制成ＥＤＳ油乳剂灭活苗，该苗接种开产前母鸡，可使接种鸡获得对ＥＤＳ强毒攻击坚强的抵抗力，该苗安全，稳定，４℃保存可达１２个月以上。 相似文献