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《水产学报》2014,(10)
为建立条纹锯鮨精液超低温冷冻保存方法,实验采用计算机辅助精子分析系统(CASA)分析了采用6种抗冻保护剂(GLY[甘油]、DMSO[二甲基亚砜]、PG[丙二醇]、EG[乙二醇]、METH[甲醇]、DMA[二甲基乙酰胺])在4种浓度(5%、10%、15%、20%,v/v)下对条纹锯鮨精液的冷冻保存效果。结果发现,以HBSS为稀释液,采用程序降温仪分步降温冷冻保存条纹锯鮨精液,37℃水浴解冻后的精子中,15%PG作为抗冻保护剂的精子运动率最高,达到(93.1±0.9)%,与鲜精差异不显著(P0.05),15%PG作为抗冻保护剂的精子水浴解冻后精子的运动速度最高,平均直线速度、平均曲线速度、平均路径速度分别达到了(88.3±0.3)μm/s、(76.2±0.5)μm/s、(86.7±0.7)μm/s,与鲜精差异不显著(P0.05)。在不同种类及不同浓度抗冻保护剂保护下,15%PG作为抗冻保护剂的精子解冻后1 min内运动率变化与鲜精差异不显著(P0.05)。研究表明,15%PG为条纹锯鮨最佳抗冻保护剂,可用于条纹锯鮨精液的超低温冷冻保存。 相似文献
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为建立条纹锯精液超低温冷冻保存方法,实验采用计算机辅助精子分析系统（CASA）分析了采用6种抗冻保护剂（GLY[甘油]、DMSO[二甲基亚砜]、PG[丙二醇]、EG[乙二醇]、METH[甲醇]、DMA[二甲基乙酰胺]）在4种浓度（5%、10%、15%、20%,v/v）下对条纹锯精液的冷冻保存效果。结果发现,以HBSS为稀释液,采用程序降温仪分步降温冷冻保存条纹锯精液,37℃水浴解冻后的精子中,15% PG 作为抗冻保护剂的精子运动率最高,达到（93.1±0.9）%,与鲜精差异不显著（P>0.05）,15% PG 作为抗冻保护剂的精子水浴解冻后精子的运动速度最高,平均直线速度、平均曲线速度、平均路径速度分别达到了（88.3±0.3）μm/s、（76.2±0.5） μm/s、（86.7±0.7） μm/s,与鲜精差异不显著（P>0.05）。在不同种类及不同浓度抗冻保护剂保护下,15% PG 作为抗冻保护剂的精子解冻后 1 min内运动率变化与鲜精差异不显著（P>0.05）。研究表明,15% PG为条纹锯最佳抗冻保护剂,可用于条纹锯精液的超低温冷冻保存。 相似文献
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介绍草鱼、鲢、鳙、鲮、鲤精液冷冻方法和授精试验.冷冻稀释液配方以0.9%氯化钠或5%葡萄糖为基础液,用DMSO(二甲基亚砜)和甘油混合剂或DMSO作抗冷剂.用冲解法或湿解法解冻,分别计算受精率和胚动发育率.用于授精试验的冷冻精液在液氮中保存1～700天.在液氮中保存7年的冷冻精液,解冻活力没有受到影响。 相似文献
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４种渗透性抗冻剂对暗色唇鱼精子冷冻保存的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
4℃冷冻保存条件下,以冷冻精子活力、寿命和细胞膜完整率为指标,检测二甲亚砜(DMSO)、甘油(Glycerol)、乙二醇(EG)和甲醇(MeOH)4种渗透性抗冻剂对暗色唇鱼(Semilabeo obscurus)鲜精以及对精子冷冻保存效果的影响.结果显示,4种渗透性抗冻剂对鲜精活力呈负作用,MeOH＜ EG＜ DMSO＜ Glycerol;抗冻剂对鲜精寿命呈负作用,MeOH＜ EG＜ DMSO和Glycerol;抗冻剂对鲜精细胞膜完整率呈负作用,MeOH＜ EG＜ DMSO＜ Glycerol.在鲜精活力为(36.17±4.06)％,寿命为(47.5±3.1)s,细胞膜完整率为(86.22 ±5.29)％时,经过短期冷冻保存,5％ MeOH和5％ EG解冻后暗色唇鱼精子活力最高,分别为(18.33±1.70)％和(17.83±2.67)％,与鲜精活力差异显著(P＜0.05);5％ MeOH和5％ EG解冻后精子寿命最长,分别为(44.3±3.6)s和(42.8±5.5)s,5％MeOH解冻后精子寿命与鲜精寿命差异不显著(P＞0.05);5％ MeOH解冻后精子细胞膜完整率最高,为(85.67±1.11)％,与鲜精细胞膜完整率无显著差异(P＞0.05).研究表明,DMSO和Glycerol并不适合作为暗色唇鱼精子冷冻的抗冻剂,MeOH和EG具有相似的保护作用,是暗色唇鱼精子冷冻保存潜在的渗透性抗冻剂. 相似文献
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本文叙述了莫桑比克罗非鱼的精液在以5％的甲醇和15％的奶粉作低温防护剂时的冷冻贮存方法。用此法冷冻精子解冻后精子的运动能力大约是以5％或10％的二甲亚砜(DMSO)代替甲醇作低温防护剂时的二倍。本文还详细描述了低温防护剂的最适浓度,冷却和解冻加温的最适速度以及稀释度和平衡时间对精子的影响。还报导了受精能力的试验:以冷冻贮存的精子受精后的胚胎有64.3％±34.2％可以正常发育到胚孔封闭期而未经冷冻的对照组为57.5±10.5％。 相似文献
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为筛选用于海带超低温保存的冷冻保护剂，采用10%二甲基亚砜(DMSO)、10%甘油、10%蔗糖、10%乙二醇、10%DMSO+10%甘油、10%DMSO+8%葡萄糖、10%DMSO+10%蔗糖、10%DMSO+10%甘油+8%葡萄糖、10%DMSO+10%山梨醇等9种单一或复合冷冻保护剂，在0～4℃条件下分别对海带配子体和孢子进行处理，对配子体处理30 min、60 min、24 h,对孢子处理15、30、60 min,通过统计配子体细胞的存活率以及孢子萌发成配子体的比例，对不同种类的冷冻保护剂进行毒性评价。结果表明：9种冷冻保护剂均对海带配子体和孢子有一定的毒性作用，并且毒性随着处理时间的延长而增强。10%DMSO对海带配子体细胞的毒性最小，处理60 min后配子体细胞的存活率为100%;其次是10%乙二醇，处理30 min后配子体的存活率为100%;含10%甘油的单一或复合冷冻保护剂对配子体细胞毒性较大，处理后配子体的成活率显著低于DMSO和乙二醇组(P<0.05)。单一冷冻保护剂对海带孢子的毒性显著低于复合冷冻保护剂，除10%甘油组处理30、60 min外，其他单一冷冻保护... 相似文献
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延边大学农学院魏世宝等，以手握法采集的猪精液为试验材料，以解冻后精子的活率、顶体完整率、低渗膨胀率、运动学参数（VAP、LIN、ALH、BCF）和膜脂质过氧化反应为评定标准，旨在探讨N-乙酰半胱氨酸对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明，在冷冻稀释液中添加1mmol／L的N-乙酰半胱氨酸可以显著地提高解冻后精子的活率和顶体完整率， 相似文献
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目的分析水牛冷冻精液稀释液中添加SOD、GSH对精子品质的影响,方法于广西畜禽品种改良站中选取摩拉水牛的新鲜精液进行分析研究,并且随机将其分为A组、B组、C组、D组,A组为正常水牛精液,B组添加300IU/mL SOD,C组添加1.0mM GSH,D组添加300IU/mL SOD与1.0mM GSH,对比各组影响结果。结果在不同氧化剂对精子影响方面上,4组的顶体完整率无显著差异,在精子解冻后不同时间段内,B组C组D组精子活率显著优于A组,D组精子活率显著优于B组C组,组间对比差异显著(P0.05)。在抗氧化剂组合对体外受精结果上,D组的精子分裂率、囊胚孵化率与囊胚率显著优于A组,组间对比差异显著(P0.05)。结论在水牛精子中添加SOD与GSH可以良好的延缓精子死亡时间,效果显著。 相似文献
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以云纹石斑鱼精液为实验材料,对精子稀释液、抗冻剂种类和适宜浓度、冷冻保存液进行了筛选。结果表明,利用9g/L NaCl、10g/L KHCO3和10%小牛血清配制而成的稀释液EM1-2适宜于云纹石斑鱼精子冷冻保存,以2ml冷冻管为精子容器,在60L液氮生物保存罐中冷冻保存精子,冷冻解冻精子活力可达56.67%±5.77%,要优于TS-2、ES1-3和其他EM系列稀释液冷冻保存精子活力。利用EM1-2为基础液对抗冻保护剂进行筛选,结果显示,10%~20%的二甲基亚砜(DMSO)和1-2-丙二醇(PG)冷冻保存后精子活力无显著差异(P0.05),其中15%的DMSO和10%PG冷冻保存精子效果最优,解冻后精子活力分别可达54.52%±7.81%和57.24%±3.69%。利用冷冻保存1年的精液与云纹石斑鱼卵进行受精,受精率和孵化率均达到80%以上,与新鲜精子无显著性差异(P0.05)。本研究表明,利用EM1-2配制15%的DMSO或10%的PG可用于冷冻保存云纹石斑鱼精液。在此基础上,建立了精子冷冻库,保存精子130ml,为人工繁育和杂交育种提供了丰富的精子源。 相似文献
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《渔业科学进展》2014,(1)
以云纹石斑鱼精液为实验材料,对精子稀释液、抗冻剂种类和适宜浓度、冷冻保存液进行了筛选。结果表明,利用9g/L NaCl、10g/L KHCO3和10%小牛血清配制而成的稀释液EM1-2适宜于云纹石斑鱼精子冷冻保存,以2ml冷冻管为精子容器,在60L液氮生物保存罐中冷冻保存精子,冷冻解冻精子活力可达56.67%±5.77%,要优于TS-2、ES1-3和其他EM系列稀释液冷冻保存精子活力。利用EM1-2为基础液对抗冻保护剂进行筛选,结果显示,10%~20%的二甲基亚砜(DMSO)和1-2-丙二醇(PG)冷冻保存后精子活力无显著差异(P0.05),其中15%的DMSO和10%PG冷冻保存精子效果最优,解冻后精子活力分别可达54.52%±7.81%和57.24%±3.69%。利用冷冻保存1年的精液与云纹石斑鱼卵进行受精,受精率和孵化率均达到80%以上,与新鲜精子无显著性差异(P0.05)。本研究表明,利用EM1-2配制15%的DMSO或10%的PG可用于冷冻保存云纹石斑鱼精液。在此基础上,建立了精子冷冻库,保存精子130ml,为人工繁育和杂交育种提供了丰富的精子源。 相似文献
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中间球海胆精子的超低温保存技术 总被引：1，自引：2，他引：1
20 0 0年 10～ 11月 ,对大连龙王塘海区成熟的中间球海胆 (Strongylocentrotusintermedius)精子进行超低温保存研究。结果表明 :不同的抗冻保护剂 ,不同的体积分数 ,不同的冷冻方式 ,精子冻存的效果不同。以自然海水为基础溶液 ,以 12 %的二甲亚砜或 9%的甘油作为抗冻保护剂 ,稀释精液至 8× 10 7～ 11× 10 7个 /ml,距液氮表面 10cm处预冷 8min ,再浸入液氮中保存 ,解冻时直接移出液氮于 17～ 18℃自来水流水解冻 ,精子存活率分别是 95 % ,90 % ;受精率分别为 94 0 % ,86 5 %。 相似文献
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为研究适合珍珠龙精子的短期超低温保存方法,比较了不同保存液、保护剂、降温方式、解冻方式对珍珠龙(Scleropages jardini)精液超低温保存后精子活力的影响,初步解释了经超低温短期保存后珍珠龙精子活力明显较鲜精低的原因.结果显示:采用Ringer's液作为保存液,以浓度为16％的二甲亚砜作为保护剂,选取五步法超低温冷冻保存精子[精子缓慢降温至-150℃→液氮面上3 cm(约-170℃),停留4min→液氮面(约-190℃),停留1 min→液氮],40℃水浴解冻,可取得最好的冻后活力,解冻后精子的活力为(36.7±4.1)％. 相似文献
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<正> 引言家畜低温冷冻精液的技术与理论已达高度水平,并且走向实用化,参考的资料也比较丰富,而有关鱼类的精液、卵子的低温冷冻,在国内外正处于研究发展中,其目的都是为育种工作提供保存优良品种鱼精。有关精子低温冷冻保存,1954年以鳟鱼、鲤鱼等为材料进行了研究,至今在冷冻方法、稀释保护液、温热解冻以及复苏率,受精孵化等仍存在着许多问题。最近有些日本淡水鱼类养 相似文献