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为研究适用于乌克兰鳞鲤精子的超低温冷冻保存方法,分析比较3种稀释液[Hank′s、Cortland、Freezefish冻精稀释液,精子与每种稀释液均设置3种比例(1∶1、1∶3、1∶5)]及3种体积分数为10%的抗冻剂(二甲基亚砜、1,2-丙二醇和丙三醇)对乌克兰鳞鲤精子低温(4 ℃)保存活力的影响;运用筛选出的冷冻保护液及稀释比例,分析比较3种“3步冷冻法”以及3种解冻温度(20、30、40 ℃)对乌克兰鳞鲤精子活力的影响。试验结果表明,采用Hank′s作为稀释液,10%二甲基亚砜为抗冻剂,精子与稀释液比例为1∶3,平均降温速率为12 ℃/min,解冻温度为30 ℃时,精子活力最高(>68%)。通过对稀释液、抗冻剂、稀释比例、降温速率和解冻温度的层层筛选,建立了适宜乌克兰鳞鲤精子超低温冷冻保存的方法,在其种质保护方面具有重要意义,为开展其他鱼类精子超低温冷冻保存提供参考。 相似文献
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观察了褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)精子在室温和低温下的活力与寿命,并应用计算机辅助精子分析系统(CASA)对超低温冷冻前后褐牙鲆精子的运动特征进行了分析,结果表明:褐牙鲆精子在室温(25℃)下,可存活4 d,在低温(4℃)下可存活7 d;鲜精的活力为(87. 74±5. 47)%,解冻后,精子的最高活性为(84. 00±3. 67)%;激活0. 5 min时,冻精与鲜精的运动精子占总精子数的百分率(MOT)无显著性差异(P>0. 05),但精子平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(VSL)、平均路径运动速度(VAP)和精子运动路线的曲折程度(LIN)都有显著性差异(P <0. 05);激活4min和10min时,冻精与鲜精的MOT、VCL、VSL、VAP和LIN间都有显著性差异(P <0. 05)。鲜精激活0. 5 min后,直线运动、曲线运动、左右摆动和不运动的精子数目占总精子数的百分比分别为(24. 49±3. 87)%、(48. 53±4. 55)%、(24. 72±2. 86)%和(2. 27±1. 22)%;冻精激活0. 5min后,直线运动、曲线运动、左右摆动和不运动的精子数目占总精子数的百分比分别为(18. 58±1. 33)%、(35. 67±3. 00)%、(35. 24±2. 67)%和(10. 51±1. 33)%。随着激活时间的延长,褐牙鲆鲜精和冻精的运动状态均发生了改变,直线运动和曲线运动的精子数目逐渐减少,而不运动和左右摆动的精子数目逐渐增加。 相似文献
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为研究适合珍珠龙精子的短期超低温保存方法,比较了不同保存液、保护剂、降温方式、解冻方式对珍珠龙(Scleropages jardini)精液超低温保存后精子活力的影响,初步解释了经超低温短期保存后珍珠龙精子活力明显较鲜精低的原因.结果显示:采用Ringer's液作为保存液,以浓度为16％的二甲亚砜作为保护剂,选取五步法超低温冷冻保存精子[精子缓慢降温至-150℃→液氮面上3 cm(约-170℃),停留4min→液氮面(约-190℃),停留1 min→液氮],40℃水浴解冻,可取得最好的冻后活力,解冻后精子的活力为(36.7±4.1)％. 相似文献
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选取6 ind健康的雄性俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti),经人工催产后获得成熟的精子,研究超低温冷冻(-196℃)对俄罗斯鲟精子顶体酶活性及DNA损伤影响。结果显示:俄罗斯鲟鲜精中顶体酶的平均活性为(36.18±2.54)μIU·10-6,经过超低温冷冻后,精子顶体酶活性显著降低,添加抗冻保护液精子中顶体酶活性降至(21.55±0.79)μIU·10-6,未添加抗冻保护液精子中顶体酶活性降至(9.58±1.08)μIU·10-6,且三者间有显著性差异(P0.05)。单细胞凝胶电泳结果表明,俄罗斯鲟鲜精彗星率为(37.33±7.77)%,添加抗冻剂后冻精的彗星率为(63.67±5.13)%,未添加抗冻剂直接冷冻彗星率高达(86.00±3.61)%,三者间有显著差异(P0.05)。用CASP分析软件分析测量彗星拖尾长度(L tail)、彗星尾部DNA的相对含量(Tail DNA)、尾动量(TM)、Olive尾动量(OTM)等各项表征DNA损伤的指标,发现冻精组的各项指标均显著高于鲜精组,未添加抗冻剂直接冷冻组又高于添加抗冻剂组,3组间有显著性差异(P0.05)。本研究结果表明:超低温冷冻能导致精子顶体酶活性下降和DNA损伤,抗冻剂对精子具有保护作用。 相似文献
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双斑东方鲀(Takifugu bimaculatus)在福建已形成较大规模的养殖产业,但其精卵成熟同步率低、自然交配受精率低等繁殖特点已成为养殖规模化发展的最大制约因素。而精子超低温冷冻保存技术作为直接保存细胞遗传物质的一种有效方法,为双斑东方鲀规模化人工繁育问题的解决提供了方案。研究以复苏后的精子活力为选择指标,开展双斑东方鲀精子冷冻保存方法的研究,对抗冻剂、基础液、精子稀释浓度和降温程序等几个关键影响因素进行了筛选,获得了双斑东方鲀精子的最适冷冻方法:以含5%二甲亚砜(DMSO)的MPRS溶液与精子按1∶1比例稀释,样品在4℃冰箱中平衡30 min,液氮上方10 cm处熏蒸5 min,再下降到5 cm处熏蒸5 min,之后投入液氮。按此方法保存的双斑东方鲀精子在解冻激活后,其活力可达(83±3)%,与相应卵子受精,可得到平均70%的孵化率,可以满足双斑东方鲀规模化人工繁育的需求。研究结果也可为其他东方鲀鱼类的相关研究提供参考。 相似文献
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马氏珠母贝精子的超低温保存 总被引：6，自引：1，他引：6
通过比较不同pH值（5．5-9．5）、不同盐度的海水等作为基础液对马氏珠母贝精子保存的影响，选择其中无激活精子作用又对其生理特性（活力，寿命，受精能力等）无影响者，加入二甲亚砜抗冻剂配制成超低温保存的抗冻保护液，精液与保护液按1：10和1：20的比例混合，样品按4组不同的降温程序平衡后转入液氮冷冻，比较其超低温冻存的效果。结果表明：以海水（pH7．5—8．0）为基础液，配制10％DMSO作为抗冻保护液，精液与保护液比例为1：20，在低温（0-4℃）中平衡约30min，在距液氮面15cm、5cm处分别停留5min、10min后转入液氮（-196℃），冻存精子效果良好。冷冻24h、48h及5个月后，在38—40℃下水浴解冻复苏后，用终浓度0．25‰的氨海水刺激，精子存活率可超过60％，受精率可达80％。 相似文献
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不同冷冻保护剂在猪精液冷冻中的作用分析 总被引：6，自引：0，他引：6
本实验采用一定浓度的甘油、EG、DMA、DMSO及其两两组合物作为冷冻保护剂。用含冷冻保护制的稀释液将精液稀释后,常温保存,观察精子活率,比较精子生存指数。结果表明：在常温下对精子毒害作用最大的是DMSO,其次是甘油,EG和DMA对精子毒害作用最小。以一定浓度的10种冷冻保护剂将对精液冷冻后观察解冻活率,发现EG和DMA混合保护剂解冻后精子活率最高。 相似文献
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比较了史氏鲟精子在3种不同配比浓度稀释液的保存效果。试验结果表明,配方Ⅲ作为稀释液,8%甲醇作为抗冻剂,二步法超低温(-196℃)冷冻保存,5h后取出,38℃水浴解冻取得最好的冻后激活率,解冻后激活率为(52.3±3.5)%。解冻精子分别采用井水和激活液D(10mmol/L Tris+10mmol/L NaCl+25mmol/L Glu,pH 8.0)激活,进行人工授精。结果显示配方Ⅲ冻精采用激活液D激活授精获得最高受精率为68.56%,最高孵化率为52.91%。本次试验表明,1～2mmol/L范围内,低浓度K+比高浓度K+对史氏鲟精子保存有利;52～82mosmol/kg范围内,高渗稀释液有利于史氏鲟精子的保存;且激活授精方法是影响冻精受精率和孵化率的关键因素之一。 相似文献
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我国鼓风冻结技术及连续式鼓风冻结装置的发展现状 总被引：1，自引：0，他引：1
送风温度、风速、送风方式、气流组织方式等是影响鼓风冻结性能的主要因素,也是引领鼓风冻结技术发展进步的突破点。文章从以上几个方面对我国鼓风冻结技术的特点和发展现状作了分析与介绍,并综述了我国目前广泛使用的隧道式、传送带式、流态化、气流上下冲击式、空气鼓风与液氮喷淋结合式等多种连续式鼓风单体快速冻结装置的特点及应用情况。 相似文献
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本文对冷冻鱼糜的加工方法、目的及生产线现状进行了叙述。近来鱼糜原料的多样性和渔业资源常发生变化,导致冷冻鱼糜生产线闲置,固定资产投资效率低下和浪费。本文提出了组装移动式冷冻鱼糜生产线,只要鱼糜生产线接上电、通上水、送上“三去”原料鱼,就可进行鱼糜加工。 相似文献
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本文主要围绕保鲜原理在制冷技术上的应用，介绍了几种渔船上常见的保鲜方式，并详细阐述了渔业制冷技术及其未来的发展前景。 相似文献
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<正> 一、前言随着我国水产事业的发展,冷冻技术在水产品贮藏中日益受到广泛重视。据1983年统计,我国冷冻水产品的产量为505,587吨。为了满足城乡人民的生活以及出口需要,冷冻水产品的产量将会出现增长的趋势。但是,在生产或流通方面却存在一些问题:其中,贮藏温度对水产品质量的影响。我国的冷库一般都采用-18℃,但许多沿海和一些大中城市的水产冷库,常常高于-12℃。在长期保存中,少量细菌可于几天或几周内在此温度下繁殖剧增,尤其是保存在临界的冷藏温 相似文献
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以南极磷虾虾(Euphausia superba)肉糜为原料,通过测定南极磷虾虾肉糜在反复冷冻和解冻过程中ATP及其关联产物、游离氨基酸等的变化,分析冻融循环对虾肉糜滋味成分的影响。结果显示,随着冻融循环次数的增加,南极磷虾虾肉糜的ATP及其关联产物降解加剧,呈鲜味的核苷酸含量逐渐减少,呈苦味的核苷酸含量逐渐增加。1次冻融对应的鲜味苦味比为3.32;2次及以上的冻融循环会造成鲜苦比的显著降低(P<0.05),同时K值迅速增大,表明鲜度发生大幅下降;3次冻融循环后,K值显著增大(P<0.05);4次冻融对应的K值为(86.88±3.58)%,南极磷虾虾肉糜已不新鲜。冻融循环次数的增加导致游离氨基酸总含量增加,鲜味氨基酸和甜味氨基酸比例逐渐减小,苦味氨基酸的比例逐渐增大,导致虾肉糜的滋味进一步劣化。研究表明,冻融循环次数控制在2次以内,可较好地保持南极磷虾虾肉糜的滋味。 相似文献
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研究了冷冻、双氧水和干燥处理对处于不同孵化进程中的卤虫卵的存活率(孵化率)的影响。冷冻对未经孵化处理的卵的孵化率影响很小,冷冻1~8周,基本保持不变。孵化进行了3h的卤虫卵,冷冻8周后,其孵化率降低了10个百分点。孵化进行了6h的卤虫卵,冷冻8周后,其孵化率降低了31个百分点。孵化进行了9h的卤虫卵,冷冻8周后,其孵化率降低了40个百分点。处于不同孵化阶段的卤虫卵经冷冻处理8周后,再经3%双氧水处理10min和40℃干燥处理6h,其孵化率表现为不同的特点。未经孵化处理卵的孵化率基本保持不变。孵化进行了3h的卤虫卵,其孵化率再次降低5个百分点。孵化进行了6h的卤虫卵,其孵化率再次降低了20个百分点。孵化进行了9h的卤虫卵,其孵化率再次降低了37个百分点。 相似文献