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直接竞争ELISA检测氯霉素残留的方法建立及初步应用 总被引：6，自引：0，他引：6
用混合酸酐法合成氯霉素的CAP抗原,用过碘酸钠氧化法合成CAP酶标记抗原,用ELISA方法对合成的CAP抗原、CAP酶标记抗原进行鉴定表明其与抗CAP单克隆抗体具有特异性反应。在此基础上建立了包被二抗的直接竞争ELISA方法。特异性试验结果表明,CAP琥珀酸酯、CAP琥珀酸钠盐的交叉反应率分别为107%、106.4%;甲砜霉素、氟甲砜霉素与CAP的交叉反应率小于0.016%;与其他结构类似物间未见交叉反应。该方法对CAP的检测限可达到0.1μg/L,IC50为11.6μg/L,线性范围0.1～100μg/L,批内变异系数小于11.5%,批间变异系数小于19.6%。对猪肉、鸡肉、蜂蜜分别添加1.0、3.0、10.0、30.0μg/L CAP标准品,回收率61.0%～102.0%,变异系数为6.6%～15.8%;对猪肉、鸡肉、蜂蜜中CAP的最低检测限分别为0.48、0.42、1.20μg/kg。 相似文献
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沙丁胺醇残留的酶联免疫检测方法的建立 总被引：6，自引：0，他引：6
用自主制备的沙丁胺醇特异性抗体建立了针对沙丁胺醇残留的间接竞争酶联免疫检测方法,对该检测体系的灵敏度、准确度、精密度、特异性等性能进行了测定,并与高效液相色谱方法进行了对比性分析。结果显示:沙丁胺醇药物残留的间接竞争酶联免疫检测体系的检测范围为1～80ng/mL,灵敏度为0.58ng/mL,检测限为1ng/mL,回收率为70～99%,与盐酸克仑特罗、硫酸特布他林交叉反应率分别为107%、10%,与盐酸莱克多巴胺及肾上腺素的交叉反应率小于0.01%;采用HPLC方法进行沙丁胺醇药物残留的检测时,其检测范围为10μg/mL～200μg/mL,检测限为1μg/mL,回收率为80～95%。该方法与高效液相色谱法相比灵敏度较高,特异性强,检测结果准确度相近,但是在检测结果稳定性方面逊与HPLC方法。 相似文献
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《动物医学进展》2021,42(4)
为建立用于猪肉、鸡肉中睾酮、甲睾酮、黄体酮等11种同化激素残留量检测的超高效液相色谱-串联质谱法,将鸡肉、猪肉组织样品通过甲醇-乙腈(1∶1,v/v)提取和C_(18)固相萃取柱净化处理后,进行梯度洗脱,电喷雾电离,在正离子、多反应监测模式下进行检测分析。结果表明,11种目标分析物在试验浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.99;在10、20、50μg/kg浓度水平下,猪肉中11种同化激素的平均回收率为74.3%～101.1%,鸡肉中11种同化激素的平均回收率为70.1%～97.4%。11种同化激素在猪肉、鸡肉中检测限和定量限分别为0.1μg/kg～0.5μg/kg和0.3μg/kg～1μg/kg,变异系数均小于15%。所建立的方法灵敏度高,特异性强,可适用于猪肉、鸡肉中睾酮等11种同化激素的残留检测分析。 相似文献
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本研究建立了鸡肉组织中氯丙嗪残留检测的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)定量确证方法。建立的方法所用样品用酸化乙腈和乙腈饱和正己烷提取后,采用C18柱色谱分离,正离子扫描模式,分别以乙腈和5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)、乙腈和水为流动相,梯度洗脱,电喷雾电离,多反应监测模式检测,内标法定量。该方法检测限为0.008μg/kg,定量限为0.025μg/kg,在0.025~2.5μg/kg的添加范围内,回收率为71.5%~86.7%,日内、日间变异系数均小于7.6%。 相似文献
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《山东畜牧兽医》2015,(11)
林可霉素药物中的醇羟基经PDC氧化后得到酮基林可霉素,然后与氨基丁酸进行缩合反应,得到四碳链羧基半抗原产物,即林可霉素半抗原;将辣根过氧化物酶标记林可霉素半抗原,制备得到酶标抗原;将林可霉素半抗原分别与BSA和OVA偶联,制备得到免疫原和包被原,进而制备得到林可霉素单克隆抗体,测得抗体效价为1:180000;将林可霉素单克隆抗体与磁珠偶联得到磁标抗体;配合全自动磁免疫化学发光仪建立了化学发光免疫检测方法,建立了林可霉素磁免疫化学发光检测试剂盒标准曲线,测得该方法对牛奶中林可霉素的检测限为5.88μg/L,该方法对林可霉素具有较高的特异性,对与林可霉素结构或者功能相似竞争的9种药物均无交叉反应。进行牛奶空白样品添加试验时回收率为85.8%~113.3%,批内变异系数为5.4%~8.6%,批间变异系数为8.4%~9.1%。该方法试剂盒配合全自动磁免疫化学发光仪检测,具有灵敏度高、特异性好、操作简单、检测时间短等优点,适合对乳制品安全监管和企业内控工作中推广应用,为我国乳制品监管工作提供了技术支持。 相似文献
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《畜牧与兽医》2016,(11):27-31
通过对金刚烷胺分子结构进行改造,制备得到了金刚烷胺半抗原及人工抗原,免疫动物,制备特异性单克隆抗体。在筛选金刚烷胺单克隆抗体的基础上,建立酶联免疫检测方法,并研制出检测动物组织中金刚烷胺残留的试剂盒。该试剂盒工作范围为0.5~40.5μg/L,线性回归方程为y=-2.069x+0.493,IC_(50)为2.1μg/L,相关系数R2为0.998;试剂盒检测限为0.25μg/kg,金刚烷胺回收率在82.5%~91.0%,批内、批间变异系数均小于10%;与阿莫西林、苯唑西林、头孢噻呋三种类似结构药物均无交叉反应。该试剂盒灵敏度高、检测限低、特异性强、操作简便,可广泛用于动物组织中金刚烷胺残留量的测定。 相似文献
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UPLC-MS／MS法同时测定鸡肉中的莫能菌素和盐霉素残留 总被引：1，自引：0，他引：1
建立了同时测定鸡肉中莫能菌素和盐霉素残留检测方法。在国内外已有研究的基础上,对样品前处理和仪器条件进行了改进,采用乙腈提取鸡肉中莫能菌素和盐霉素残留,石墨化碳黑SPE小柱对提取液进行净化,然后用Waters ACQUITY UPLCTMTQD超高效液相色谱-串联质谱仪测定。结果表明,莫能菌素和盐霉素的检测限为0.2μg/kg,最低定量限为0.5μg/kg。选取0.5、1.0、2.0μg/kg三个浓度进行空白添加回收率实验,回收率为71.9%~95.1%,批内变异系数和批间变异系数均小于15%,适合大量鸡肉样品中莫能菌素和盐霉素的残留检测。 相似文献
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《国外畜牧学(猪与禽)》2020,(5)
本研究建立了高效液相色谱串联质谱法测定乌鸡鸡肉中羟基甲硝唑和甲硝唑含量的方法。鸡肉样品经过乙腈水溶液提取,离心取用上清液再经过PRIMEHLB固相萃取柱净化、氮吹、甲醇水溶液定容以及0.22μm水相滤膜过滤,随后用液相色谱法串联质谱法检测硝基咪唑。结果显示:在线性范围0.1μg/L～500μg/L内,硝基咪唑类药物线性关系良好,甲硝唑相关系数为r=0.997,羟基甲硝唑相关系数为r=0.9993。在1.0μg/kg、2.0μg/kg和10μg/kg三个水平添加回收试验条件下,甲硝唑的回收率为80%～109%,相对标准偏差为2.45%～11.0%;羟基甲硝唑的回收率为74.0%～96.6%,相对标准偏差为3.96%～8.33%。可确定的方法检出限甲硝唑为0.35μg/kg,羟基甲硝唑为0.38μg/kg。该方法具有灵敏度高和重现性好的特点,可满足鸡肉中痕量元素的检测。 相似文献
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为了考查已建立的鸡肉组织中磺胺氯吡嗪药物残留的超高效液相色谱串联质谱分析方法,选用乙酸乙酯为提取液,经MCX固相萃取柱净化,用0.2%甲酸甲醇复溶,在超高效液相色谱串联质谱联用仪上进行测定,外标法定量。结果表明:鸡肉组织中磺胺氯吡嗪的检测限为0.50μg/kg,定量限为2.00μg/kg,在10～100 ng/mL浓度范围内线性关系良好,R~2=0.991 6;在2.00～20.00μg/kg添加水平下,回收率范围为67.00%～94.80%,相对标准偏差(RSD)小于6.00%。说明该方法特异性强、定性准确、灵敏度高,能满足鸡肉中磺胺氯吡嗪残留的定量检测要求。 相似文献
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本试验采用间接竞争酶联免疫分析法（ELISA法）测定了动物源性食品中红霉素的残留,结果显示：猪肉、猪肝、牛肉、鱼肉、虾肉、蜂蜜和牛奶中的红霉素检测限分别为4.13、8.23、0.78、3.75、7.94、3.09μg/kg和1.87μg/L,样品添加回收率范围为69.0%~107.5%,批内变异系数为5.7%~11.4%,批间变异系数为8.7%~14.0%;与硫氰酸红霉素的交叉反应率为114%,与琥乙红霉素的交叉反应率为67.4%,与其他药物的交叉反应率均小于0.1%。试验表明,采用ELISA法测定红霉素准确灵敏、重复性好、特异性高,适用于检测动物源性食品中的红霉素残留。 相似文献
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《中国家禽》2015,(17)
研究建立了检测鸡肉组织中氨苯砜的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)定量确证方法。样品采用1%乙酸-乙腈(v/v)提取,乙腈饱和正己烷脱脂,采用C18反相色谱柱分离,以乙腈和5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,电喷雾电离,正离子-多反应监测扫描模式,氨苯砜的定量、定性离子分别为249.1156.0,249.1108.0。建立的方法在0.05~10μg/kg范围内线性良好,检测限为0.015μg/kg,定量限为0.05μg/kg,在0.05~5μg/kg的添加范围内,回收率在76.2%~94.5%之间,日内、日间变异系数均小于19.4%。 相似文献
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采用超高效液相色谱仪-紫外检测器,建立鸡肉组织中磺胺二甲嘧啶的检测方法。鸡肉组织中磺胺二甲基嘧啶用乙酸乙酯提取、0.1 mol/L盐酸溶剂转换、正己烷溶脂、MCX柱净化,在270 nm检测波长处用超高液相色谱仪-紫外检测器检测。结果表明:鸡肉组织中磺胺二甲嘧啶的保留时间为0.88min,检出限为2.0μg/kg,定量限为5.0μg/kg,在10~200μg/kg范围内添加回收率为60%~85%,相关系数R2=0.999 5该方法具有快速、简单、回收率高、重现性好、检测限低等优点。 相似文献