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1.
本研究旨在应用胶体金免疫层析技术,结合胶体金定量读数仪研制出一种快速定量检测谷物和饲料中黄曲霉毒素B_1含量的胶体金快速定量检测试剂盒。该试剂盒以胶体金标记高特异性单抗,与偶联抗原进行正交试验,确定适宜条件,同时通过与对照线和试验线的颜色对比,应用胶体金定量读数仪,对样本中黄曲霉毒素B_1含量进行定量检测。结果表明,黄曲霉毒素B1胶体金快速定量检测试剂盒检测方法简便、快速、稳定性好,且可得出具体数据,避免了人肉眼观察的差异;与常见霉菌毒素无交叉反应,样品检测结果与高效液相色谱法检测结果的相对误差在20%以内。由此可见,本试验研制的黄曲霉毒素B_1胶体金快速定量检测试剂盒可用于谷物和饲料中黄曲霉毒素B_1含量的快速定量检测。 相似文献
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[目的]分析酶联免疫吸附法（ELISA）测定生乳中黄曲霉毒素M1残留量结果的重现性、回收率和精密度,以及胶体金免疫层析法与其结果的呼应度,证实2种方法联合使用的可行性。[方法]用胶体金快速检测试纸条对生乳样品中的黄曲霉素M1进行检测,并用黄曲霉毒素M1 ELISA检测试剂盒（鲜奶检出下限为0.018μg/kg）做对照试验。[结果]胶体金快速检测试纸条对生乳中不同浓度黄曲霉毒素M1残留量的检测结果呈现梯度效应,并能与ELISA检测试剂盒的定量检测结果呼应。ELISA法对生乳中黄曲霉毒素M1不同浓度残留量的定量试验结果重现性较好,具有较高的稳定性。回收率为94.83%～100.53%,RSD值在1.11%～3.01%之间。[结论]2种快速检测方法对生乳中黄曲霉毒素M1的测定便捷快速,结果稳定准确、可信度高,可作为乳品企业日常快速进行原奶验收工作的基础数据参考。 相似文献
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黄曲霉毒素是天然产生的真菌毒素,是饲料的主要污染源之一。本文对黄曲霉毒素M1快速检测试纸条检测性能指标充分评估,确认其是否符合欧盟CRL Guidelines 2010和519/2014/EC标准。基于欧盟参考实验室方案CRL Guidelines 2010对检测试纸条的精密度、特异性、假阳性率和假阴性率、重复性、稳定性、样本差异影响、批间差异及试剂盒稳定性分别检测,并通过胶体金读数仪对检测数据分析。结果发现:该黄曲霉毒素M1检测试纸条可在10 min中检测牛奶中的黄曲霉毒素M1,肉眼判读定性检测灵敏度为50 ng/L;试纸条特异性良好,除黄曲霉毒素M2(交叉反应为0.86%)外,与呕吐毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1等交叉反应均小于0.5%,其余无交叉反应。用胶体金读数仪分析时,试纸条检测灵敏度为21.58 ng/L,定量限为58.11 ng/L;检测60个添加浓度为50 ng/L的牛奶样本时平均值为49.07 ng/L,标准差为6.45 ng/L。因此,该试纸条可作为定性筛选方法检测牛奶中的黄曲霉毒素M1污染,检测能力满足欧盟MRL(50 ng/L)要求。 相似文献
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黄曲霉毒素主要由黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的次生代谢产物,物理和化学性质比较稳定,其种类主要包括黄曲霉毒素B1(aflatoxin,AFB1)、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2,其中AFB1毒性最强,污染最广,被世界卫生组织国际癌症研究机构确定为Ⅰ类致癌物。奶牛摄入被黄曲霉毒素污染的花生、玉米、稻米、大豆、小麦等饲料后,部分黄曲霉毒素会转化为AFM1和AFM2,从而存在于乳及乳制品中。本文比较国内外各国黄曲霉毒素限量标准的差异,汇总目前国内外乳及乳制品中黄曲霉毒素的各项检测技术,阐述近年来主要应用的薄层色谱法、质谱法、光谱法、电化学法、快速检测试纸条法等检测方法,分析各类方法在检测乳及乳制品中黄曲霉毒素方面的优点与存在的问题,并对今后乳及乳制品中黄曲霉毒素检测技术的发展方向做出了预测,旨在为更简便、特异性好、灵敏度高的乳及乳制品中黄曲霉毒素检测技术发展提供思路。 相似文献
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黄曲霉毒素（aflatoxin，AF）是霉菌产生的毒性极强的次级代谢产物，主要存在于乳与乳制品和霉变谷物中。目前研究较多的黄曲霉毒素有黄曲霉毒素B1（AFB1）、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2，黄曲霉毒素物理与化学性质稳定，加热处理很难将其破坏，是目前公认的毒性最强的致癌物之一。黄曲霉毒素不仅会造成动物营养不良及免疫力下降等问题，进入人体后还会对人体的肝脏造成极大的损害，而且原料乳中黄曲霉毒素的存在会对整个乳制品产业链造成严重的危害。因此，建立简便的、特异性好、灵敏度高的检测乳与乳制品中黄曲霉毒素的方法具有十分重要的意义。作者综述了乳与乳制品中黄曲霉毒素的检测方法进展，介绍了国内外近年来质谱法、电化学法、光谱法、色谱法、试纸条法等方法在检测乳与乳制品中黄曲霉毒素的应用，总结以上各种方法在检测乳与乳制品中黄曲霉毒素中的优势与其面临的挑战，并对今后乳与乳制品中黄曲霉毒素检测方法的发展方向进行了展望，以期为设计新的乳与乳制品中黄曲霉毒素检测方法提供思路。 相似文献
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[目的]研究酶联免疫吸附法和薄层色谱法的特点,比较2种方法检测黄曲霉毒素B1含量的优缺点.[方法]酶联免疫吸附法采用黄曲霉毒素B1酶联免疫定量测试盒对饲料中黄曲霉毒素B1的含量进行测定;薄层色谱法应用薄层荧光扫描测定黄曲霉毒素B1的含量,并用薄层色谱进行确证试验.[结果]酶联免疫吸附法测定黄曲霉毒素B1含量的标准曲线r值为0.999 3～0.999 9,变异系数为0.3％～0.6％,回收率在94.0％ ～105.0％之间.薄层色谱为半定量色谱,但该试验利用荧光扫描法测定黄曲霉毒素B1的含量,标准曲线r值为0.998 1,回收率在84.60％～90.08％之间.[结论]2种方法相比较,薄层色谱法是传统经典的方法,具有抗干扰能力强、离线检测可反复测试的优点,但TLC法前处理较为麻烦,精密度、回收率均没有酶联免疫吸附法高;ELISA法是目前国际检测AFB1的先进方法,具有灵敏度高、干扰少、简便快速、操作安全等优点. 相似文献
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应用胶体金免疫层析技术,结合胶体金定量读数仪研制出一种快速定量检测猪血清中猪瘟抗体水平的检测卡。该检测卡以胶体金标记高灵敏的猪瘟重组E2蛋白,同时在NC膜上包被同一蛋白,经正交实验确定最适条件,同时通过与对照线的颜色对比,应用胶体金定量读数仪,可对样本中猪瘟抗体水平进行定量。该检测卡检测方法简便、快速、稳定性好。与猪圆环病毒病、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征等常见猪疫病抗体均无交叉反应。检测71份猪血清样本结果与ELISA结果的符合率达90.1%。结果表明,实验研制的猪瘟抗体胶体金快速定量检测卡可用于基层兽医站和养殖企业的检测。 相似文献
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为掌握黄曲霉毒素B1、T-2毒素、赭曲霉毒素A、伏马毒素（B1+B2）在植物性饲料原料中的污染状况,指导帮助饲料企业和养殖企业开展霉菌毒素防控,降低霉菌毒素对饲料产品质量及畜禽养殖产品危害,减少经济损失,2020年对16种60份植物性饲料原料进行调查采样,采用液相色谱-串联质谱法、免疫亲和柱净化-高效液相色谱法检测,依据《饲料卫生标准》（GB 13078-2017）判定分析。结果表明：黄曲霉毒素B1、T-2毒素、赭曲霉毒素A、伏马毒素（B1+B2）在16种植物性饲料原料中的污染状况不同。黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、伏马毒素（B1+B2）检出率分别为13.30%、1.60%、31.60%,最大检测值分别为318.00 μg/kg、5.70 μg/kg、50.66 mg/kg;T-2毒素检出率为0。黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、伏马毒素（B1+B2）3种霉菌毒素在16种植物性饲料原料中存在污染,整体污染率33.30%;2种植物性饲料原料中黄曲霉毒素B1超标,其他原料无超标,污染率与超标率不成正比,表明霉菌毒素在植物性饲料原料中污染普遍,对饲料产品、养殖产品及消费安全造成严重影响和潜在危害。针对该问题,提出确保植物性饲料原料质量安全建议,为今后控制饲料原料中霉菌毒素污染提供参考。 相似文献
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为了解掌握伏马毒素（B1+B2）、赭曲霉毒素A、T-2毒素、黄曲霉毒素B1在植物性饲料原料中的污染状况,指导饲料生产企业和养殖企业开展霉菌毒素防控,降低霉菌毒素对饲料产品质量及畜禽养殖危害,减少经济损失,2019年对17种62份植物性饲料原料进行采集,采用液相色谱—串联质谱法、免疫亲和柱净化—高效液相色谱法检测,依据《饲料卫生标准》（GB 13078—2017）判定分析。结果表明：伏马毒素（B1+B2）、赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1在17种植物性饲料原料中的污染状况差别明显,伏马毒素（B1+B2）、赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1平均检出率分别为37.09%、8.06%、29.03%,最大检测值分别为15.96 mg/kg、26.60 μg/kg、351.00 μg/kg。从检测结果得出,4种霉菌毒素在17种植物性饲料原料中的污染较重,整体污染率达48.40%,玉米皮、喷浆玉米皮、花生粕3种植物性饲料原料中黄曲霉毒素B1超标,污染率与超标率不一定呈正比,表明霉菌毒素在植物性饲料原料中污染普遍,对饲料产品及养殖安全造成严重影响。针对该问题,提出控制植物性饲料原料质量建议,为今后控制饲料原料中霉菌毒素含量提供参考。 相似文献
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[目的] 建立快速检测黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）的方法。[方法] 将吖啶酯（acridinium ester,AE）与AFB1单克隆抗体进行体外化学合成,分别合成了吖啶酯∶AFB1单克隆抗体摩尔比为5∶1、10∶1、15∶1、20∶1、25∶1的吖啶酯标记AFB1单克隆抗体（AFB1-AE）,分析了不同摩尔比的检测效果,选择吖啶酯∶AFB1单克隆抗体为25∶1的AFB1-AE偶联物建立化学发光免疫分析法（chemiluminescence immunoassay,CLIA）。[结果] 获得对应的标准曲线回归方程为：y=-0.245Ln（x）+ 1.578 1,R2=0.985 7,IC50=81.48 pg/mL;对样品进行加标回收实验,加标回收率88.4%~106.0%,变异系数0.92%~2.10%。[结论] 将吖啶酯与AFB1单克隆抗体体外交联,可建立新的化学发光免疫分析方法。 相似文献
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黄曲霉毒素对肉鸡毒性作用的研究进展 《畜牧与饲料科学》2022,43(3):53-58
黄曲霉毒素主要是由黄曲真菌和寄生曲真菌产生的一类高毒性次级真菌代谢物质,世界范围内大部分的粮食和动物饲料受到黄曲霉毒素的污染,对动物健康与畜禽养殖业可持续发展构成严重威胁。黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）是众多霉菌毒素中常见且毒性较强的一种,过量摄入AFB1具有致癌、致畸、免疫抑制等毒性效应。大量研究证实AFB1可对肉鸡的生长、免疫功能、器官发育等方面造成严重影响,威胁家禽业的健康发展。结合国内外研究报道,对黄曲霉毒素的性质、毒性进行概述,从肠道功能障碍、免疫抑制、器官损伤和遗传毒性四个方面阐述AFB1对肉鸡毒性作用的研究进展,以期为进一步阐明黄曲霉毒素对肉鸡毒性作用的分子机制,同时为减轻黄曲霉毒素对肉鸡养殖造成的危害提供参考。 相似文献
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研究旨在建立一种超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮。试验样品经84%乙腈水溶液提取,净化,稀释定容后上机测定。结果显示,该方法在0.5～50.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数R2≥0.999 0;黄曲霉毒素B1的空白样品平均加标回收率在81.8%～91.6%,精密度(RSD)≤4.5%;玉米赤霉烯酮的空白样品平均加标回收率在84.5%～93.9%,RSD≤4.1%。研究表明,该方法能够满足饲料中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮同步检测的要求。 相似文献
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[目的]为掌握昆明市部分奶牛饲料霉菌毒素污染状况,采集了昆明市部分奶牛场（养殖小区）的饲用玉米面、全株玉米青贮,全混合日粮（TMR）共80 批次进行分析。[方法]采用酶联免疫吸附试剂盒测定80 批饲料中黄曲霉毒素B1（AFB1）、赭曲霉毒素A（OTA）,玉米赤霉烯酮（ZEN）、伏马毒素（FB1+FB2）、T-2毒素、呕吐毒素（DON）6 种霉菌毒素含量,超标情况按照《GB 13078—2017 饲料卫生标准》判定。[结果]玉米面中ZEN检出率88.2%,平均值为（1 047.2±935.5）μg/kg,超标率达到76.4%; DON检出率82.3%,平均值为（1 375.2±635.2）μg/kg,FB1+FB2+FB3检出率35.3%,平均值为（277.4±490.9）μg/kg,AFB1检出率为35.3%,平均值为（8.6±2.9）μg/kg;OTA、T-2毒素均未检出。TMR中DON检出率25%,平均值为（1 047.2±935.5）μg/kg,AFB1检出率为16.7%,平均值为（2.3±1.2）μg/kg,ZEN检出率16.7%,平均值（120.1±112.6）μg/kg,均未超标;OTA、T-2毒素、FB1+FB2+FB3均未检出。全株玉米青贮饲料中DON检出率47.1%,平均值为（1 375.2±635.2）μg/kg,ZEN检出率为29.4%,平均值为（142.5±191.1）μg/kg,均未超标;AFB1、OTA、T-2毒素、FB1+FB2+FB3均未检出。[结论]霉菌毒素检出率：DON>ZEN>AFB1>FB1+FB2+FB3 >T-2毒素和OTA;污染程度：玉米面>全株玉米青贮>TMR。三类饲料中霉菌毒素都有不同程度的污染,其中玉米面霉菌毒素污染风险最大,在运输、存储、使用时要予以高度关注,避免造成经济损失。 相似文献
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[目的]为快速、准确检测出生鲜牛乳中黄曲霉毒素M1,保证牛奶卫生安全。[方法]采用SNAP黄曲霉毒素M1快速检测试剂盒检测生鲜牛乳中黄曲霉毒素M1。在2012年4月、9月和2013年6月分别对新疆巴州辖区内16个奶站的奶缸、奶牛养殖小区、运输车辆分别抽16份生鲜乳样品检测黄曲霉毒素M1。[结果]16份生鲜乳样品中检测黄曲霉毒素M1,结果全部为阴性。[结论]对巴州辖区内16个奶站的奶缸、奶牛养殖小区、运输车辆进行了生鲜牛乳黄曲霉毒素M1抽样检测项目,16份生鲜牛乳样品结果全部为阴性,未检出黄曲霉毒素M1,合格率为100%。 相似文献
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高效液相色谱法测定饲料中的黄曲霉毒素 总被引：1，自引：0，他引：1
目前对饲料中的黄曲霉毒素的检测一般采用酶联免疫法、薄层色谱法等半定量方法,笔者采用高效液相色谱法进行定性定量分析,其中黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素G1线性范围为5～50 μg/mL,黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素G2线性范围为1.5～15 μg/mL,平均回收率为80%～110%,RSD为5.00%～10.00%.结果表明采用HPLC法测定操作简便,定性准确,定量精确. 相似文献
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建植混播人工草地是修复三江源黑土滩退化草地的有效措施，但不同混播比例下植被和土壤养分特征的变化尚不明确。以垂穗披碱草、中华羊茅和青海草地早熟禾分别按1∶1∶1（M4），2∶1∶1（M5），1∶2∶1（M6），1∶1∶2（M7），2∶2∶1（M8），2∶1∶2（M9）和1∶2∶2（M10）建植混播人工草地，并以各组分单播为对照，研究生产力、物种多样性、超产效应、多样性净效应（包括互补效应和选择效应）和土壤养分特征的变化，并采用多准则决策模型-TOPSIS进行综合评价，以筛选最佳混播比例，以期为三江源退化草地生态修复提供科学依据。结果表明：混播处理地上生物量显著高于中华羊茅和青海草地早熟禾单播的生物量，但显著低于垂穗披碱草单播处理，混播处理地上生物量在M5、M8、M9和M10处理较高。而地下生物量在混播处理间无显著差异。混播处理中，仅M5、M8、M9和M10处理存在超产，达40.4~71.1 g·m-2。M4和M6处理的多样性净效应均小于0，说明由于物种竞争导致群落减产。而M7~M10混播处理的多样性净效应均大于0，说明物种生态位的互补使得群落高产。M8和M9处理中互补效应和选择效应共同主导了超产效应，而M5和M10处理中主要由互补作用主导超产效应。表层土壤的有机质、全氮、全磷、速效磷和速效钾含量在M6、M7和M10混播处理中较高。TOPSIS模型综合评价表明，M10混播处理不但可保持较高的生产力，还可显著提高土壤的养分含量，是三江源区人工草地建植的理想混播比例。 相似文献
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《中国饲料》2017,(14)
本文建立了饲料中4种黄曲霉毒素(黄曲霉毒素AFB_1、黄曲霉毒素AFB_2、黄曲霉毒素AFG_1、黄曲霉毒素AFG_2)多残留的液相色谱-三重四级杆/线性离子阱串联质谱(Qtrap-LC-MS/MS)的检测方法。样品前处理简单高效,经过80%的乙腈水萃取后,再经过SPE小柱净化。结果表明:在浓度0.5~50 ng/mL时线性良好,相关系数均大于0.995;添加浓度为1.0~20 ng/mL时,回收率为72.5%~95.7%。在市场上购买了8种品牌饲料,实验结果显示黄曲霉毒素AFB1污染较为严重。该方法采用MRM定量的同时结合了谱库检索进一步定性,实现了同时定性和定量检测分析,对于常规实验室准确定量检测有着重要参考意义。 相似文献