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1.
用PRRSV ATCC VR-2332株人工单独感染了3头3周龄仔猪,并用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染了2头3周龄仔猪,同时设立了3头健康对照猪.攻毒后每日记录试验猪体温、采食、临床表现等,并用HerdChek IDEXX Kit测其血清抗体.PRRSV+PCV2联合感染猪分别在感染后1周、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1周、2周和3周剖杀.对肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM),用PAM进行抹片,同时用肺组织直接进行触片作IIF检测.IIF试验结果表明,用所获得的3株单抗均检测到了人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原.另外,用IIF检测临床疑似PRRS的7头猪的PAM抹片,其中沭阳2头猪呈现阳性反应.对这2头猪的肺组织进行病毒分离,结果在盲传到第四代时在Marc-145细胞上产生明显的细胞病变,进一步证实了所获得的3株单抗检测临床样品的准确性和可靠性.综合以上试验结果,证实了所获得的3株单抗均可通过IIF试验用于临床检测肺组织中的PRRSV抗原. 相似文献
2.
间接免疫荧光试验（ⅡF）检测PRRSV方法的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
用PRRSV ATCC VR-2332株人工单独感染了3头3周龄仔猪，并用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染了2头3周龄仔猪，同时设立了3头健康对照猪。攻毒后每日记录试验猪体温、采食、临床表现等，并用HerdChek IDEXX Kit测其血清抗体。PRRSV PCV2联合感染猪分别在感染后1周、3周剖杀，PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1周、2周和3周剖杀。对肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM)，用PAM进行抹片，同时用肺组织直接进行触片作ⅡF检测。ⅡF试验结果表明，用所获得的3株单抗均检测到了人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原。另外，用ⅡF检测临床疑似PRRS的7头猪的PAM抹片，其中沭阳2头猪呈现阳性反应。对这2头猪的肺组织进行病毒分离，结果在盲传到第四代时在Marc-145细胞上产生明显的细胞病变，进一步证实了所获得的3株单抗检测临床样品的准确性和可靠性。综合以上试验结果，证实了所获得的3株单抗均可通过ⅡF试验用于临床检测肺组织中的PRRSV抗原。 相似文献
3.
对66份2004年10月至2005年8月患呼 吸道疾病发病猪的肺组织进行PBS灌洗处理,获得肺泡巨噬细胞(PAM),用PAM抹片,应用间 接免疫荧光试验(IIF)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV);同时提取PAM DNA作为模板, 应用PCR方法检测猪圆环病毒2型.结果在66份PAM中,26份PRRSV阳性,23份PCV2阳性,其中 8份同时检测出PRRSV和PCV2.以上结果表明,猪群中PRRSV和PCV2混合感染情况比较严重; 应用IIF和PCR方法可以在PAM中检测PRRSV和PCV2. 相似文献
4.
从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究 总被引：39，自引：0，他引：39
采用猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞培养对国内暴发流行PRRS的某地猪场进行了病毒分离,从流产胎儿分离出特征性致细胞病变因子。用PRRSV SDOW-17单克隆抗体进行间接免疫荧光染色,证明从4头流产胎儿分离出4株PRRSV(CH-la,CH-lb,CH-lc,CH-ld)。这4株毒均可在猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞上生长,并产生特征性CPE变化。用PRRSV美国分离毒株VR-2332和NVSL抗血清分别对4株CH-1、VR-2332和NVSL毒株感染细胞进行间接免疫荧光试验,结果表明4个CH-l毒株近似于美洲型PRRSV。间接免疫荧光试验证明,4个CH-l分离株与HCV、PrV、PPV、TGEV、PEDV和HEV无交叉抗原。本文首次报道在国内暴发生殖和呼吸道综合征猪群分离到PRRS病毒。 相似文献
5.
猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型共感染对猪体内病毒动态及免疫反应的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)单感染和共感染6周龄健康仔猪,采用实时定量PCR(Real-time PCR)对血清、组织(心、肝、肺、肾、胰、脾、胸腺、扁桃体、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结)中的PRRSV和PCV2载量进行检测,分别采用间接ELISA和间接IFA对血清中的PRRSV和PCV2特异性抗体进行检测,采用MTT法对猪外周血淋巴细胞(PBLC)的增殖能力进行检测.结果,PRRSV/PCV2共感染组血清、组织中PRRSV的载量均显著高于PRRSV单感染组,PCV2的载量均显著高于PCV2单感染组;共感染组PRRSV和PCV2特异性抗体阳转的时间均晚于并且效价均显著低于PRRSV或PCV2单感染组;共感染组和单感染组PBLC的增殖能力均受到抑制,其严重程度依次为:PRRSV/PCV2组>PRRSV组>PCV2组.由此表明,PRRSV和PCV2在猪体内对彼此的增殖具有促进作用;PRRSV和PCV2共感染对猪的免疫抑制具有加重作用. 相似文献
6.
用PRRSV ATCC VR-2332株感染8头28日龄仔猪,同时设立2头健康对照猪.PRRSV单独感染猪分别于感染后7,17,25 d各剖杀2,3,3头,对照组于17,25 d各剖杀1头.剖杀后采集脾脏、肺脏和全身主要淋巴结(颌下淋巴结、肺门淋巴结、腹股沟淋巴结和肠系膜淋巴结)等免疫器官,用甲醛溶液固定,组织石蜡切片以观察显微病理变化.试验组猪的抗体和抗原检测结果均表明,感染后7 d血清PRRSV抗体和免疫器官组织PRRSV抗原部分呈阳性;剖检和石蜡切片结果均显示,试验猪于攻毒后,随着病程的发展,发生了不同程度的间质性肺炎及相应的显微病变,PRRSV单独感染能引起免疫器官以淋巴细胞及巨噬细胞变性坏死为特征的急性炎症变化,造成免疫损伤,进而引起免疫抑制. 相似文献
7.
Ⅱ型PCV和PRRSV单独与共同感染未吃初乳猪病例人工复制 总被引：2，自引：0，他引：2
3周龄剖腹产不吃初乳(CD／CD)猪分别感染Ⅱ型猪圆环病毒(PCV—2)，猪繁殖—呼吸综合征病毒(PRRSV)，PCV—2和PRRSV共同感染，比较这些病毒的单独或联合作用。并于接种后不同日龄及猪濒死时剖检。接种后第10天(10DPI)，PCV—2和PRRSV共同感染猪出现严重的呼吸困难、昏迷，偶尔出现黄疽，10DPI后，91％死亡，20DPI时，全部死亡。PCV—2单独感染猪出现昏迷，散发性黄疽，42％出现渗出性皮炎，死亡率26％。PRRSV感染猪出现呼吸困难和昏迷，至28DPI时恢复。PCV—2感染猪和PCV—2／PRRSV共同感染猪皆出现与断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)相同的组织病变。PCV—2／PRRSV共同感染猪亦出现严重的增生性间质肺炎和更相似的肝病变，出现极大量的含有PCV—2抗原的细胞。PRRSV感染猪出现中等程度的增生性间质肺炎，但未出现支气管或肝病变以及淋巴组织萎缩。研究结果表明：①PCV—2共感染能加重PRRSV对CD／CD猪引起的间质性肺炎的严重程度；②是PCV—2而不是PRRSV引起PMWS的淋巴组织萎缩，肉芽肿性炎症，坏死性肝炎等特征病变。 相似文献
8.
高致病性PRRS活疫苗(HuN4-F112株)抗体对Ⅱ型不同亚群PRRSV的中和效果 总被引：2，自引：0，他引：2
为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)活疫苗(HuN4-F112株)诱导的抗体对II型不同亚群PRRSV的中和作用,本研究将10头PRRSV抗原、抗体阴性的6周龄仔猪,每头仔猪肌肉注射1头份疫苗(106.0TCID50/mL),每周采血并分离血清,检测该血清对II型PRRSV第1、2、4亚群的代表病毒株勃林格PRRSV活疫苗(VR-2332株)、PRRSV活疫苗(CH-1R株)和HP-PRRSV活疫苗(HuN4-F112株)的中和效价。实验结果显示,仔猪免疫3周后开始产生针对HuN4-F112的中和抗体,11周至22周抗体水平达到高峰,抗体持续至少25周,但只有少数免疫猪在几个时间点的血清对VR-2332和CH-1R疫苗株具有血清交叉中和作用,而且中和效价较低。 相似文献
9.
为了解江苏高邮市农户散养健康仔猪群猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染和带毒情况,本研究自2003年1月至2008年9月,随机选择并采集68个农户105窝母猪的372头2～5周龄仔猪血清,分别用ELISA和PCR方法检测PCV2和PRRSV抗体和病毒核酸,结果为,PCV2和1PRRSV感染率分别为17.5%(65/372)和32.3%(120/372),其中PCV2和PRRSV混合感染阳性率为12.9%(48/372),占PCV2感染猪的73.9%(48/65),而PRRSV感染率逐年提高,2008年达43.3%,从而为该病防制提供了理论依据。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的研制 总被引：1，自引：1，他引：0
以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JYC株全病毒作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,融合后经间接ELISA进行杂交瘤筛选,共获得4株能分泌针对PRRSV单克隆抗体(简称单抗)的杂交瘤细胞株,分别命名为2G7、6G7、7F2和7E8,其亚类均为IgG1;单抗腹水的间接ELISA效价分别为10×215、10×211、10×215、10×214;间接ELISA试验结果表明,4株单抗与实验室保存的江苏地区临床分离的12株PRRSV以及VR-2332均发生特异性反应,而与猪常见其他病毒如猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(HCV)、猪圆环病毒2(PCV2)均无反应性;间接荧光试验表明,4株单抗与Marc-145细胞感染的PRRSV均呈特异性的荧光反应。因此这些单抗均可用于ELISA方法以及间接荧光试验,从而为建立快速、敏感的PRRSV的抗原检测方法奠定了基础。 相似文献
11.
本文对60份来自猪增生性与坏死性肺炎(PNP)病例的肺组织进行了回顾性研究,以检测肺组织中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流感病毒(SIV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的感染率。在被诊断PNP病例中有30例来自于1988～1992年,另30例来自于1997～2001年。在每组的30例中,有10例来自哺乳仔猪,其它20例则为保育猪或育肥猪。利用A型流感病毒的单克隆抗体进行免疫组化检测SIV,用原位杂交(ISH)检测PRRSV和PCV2的核酸。在被检的60例中,检出PRRSV55例(92%),PCV225例(42%),SIV仅1例(2%)。而在有PNP病灶的病例中,PRRSV单独感染占30例(50%),PRRSV和PCV2混合感染占25例(42%)。在哺乳仔猪PNP病例中未检出PCV2,所有的PCV2阳性猪均出现在断奶后猪只中,且常和PRRSV混合感染。在断奶后病例中,PCV2检出率为63%(25/40)。本研究结果表明,在PNP病例中SIV很少被检出,且PCV2感染也不是造成PNP病灶的关键,PRRSV常常且主要与PNP有关,被认为是PNP的主要病原。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征诊断技术研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
1991年,荷兰中央兽医研究所Wensvoort博士用原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)首次分离到猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),并命名为Lelystad病毒(PRRSV欧洲型代表株).次年,美国科学家Collins和Benfield等用CL2621细胞也分离到一株PRRSV并命名为VR-2332(PRRSV美洲型代表株).PRRSV属于尼多病毒目(Nidovimles)、动脉炎病毒科(Arteriviridae)、动脉炎病毒属(Arterivirus)成员. 相似文献
14.
广西猪圆环病毒2型感染的流行病学调查 总被引：7，自引：0，他引：7
结合流行病学、临床症状、病理变化，采用PCR技术，对2004年1月至2005年5月采自广西14个市97个疑似猪圆环病毒2型（PCV2）感染发病猪场的197份组织病料（脾、肺、淋巴结）进行了PCV2检测；同时，对鉴定为PCV2阳性的组织病料和猪场进行了猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪流感病毒（SIV）和猪伪狂犬病病毒（PRV）的检测，另外，对6个地（市）11个生猪屠宰场采集的外观健康屠宰猪的295份组织样品（脾、肺、淋巴结）进行了PCV2检测。结果显示，在197份组织样品中检出PCV2阳性病料108份，平均阳性率为54．82％（108／197），阳性猪场62个，平均阳性率为63．92％（62／97）。PCV2与PRRSV、CSFV、SIV、PRV混合感染的组织病料总阳性率为42．13％（83／197），混合感染的猪场总阳性率为57．73%（56／97）。从21头外观健康屠宰猪的组织样品中检测到PCV2，阳性率为7．10％。由此可见，PCV2感染在广西猪群中已普遍存在，混合感染和健康带毒现象使病情更加复杂。 相似文献
15.
将猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV2）单感染和共感染的6周龄仔猪，于感染前和感染后第3、7和10d，采用血常规法、SWC3a单色流式细胞术以及CD3／CD4／CD8三色流式细胞术分析了感染猪外周血中白细胞、粒细胞、单核细胞、NK细胞、弦T细胞的含量。结果，感染后第3d和第7d，PRRSV感染组、PCV2感染组以及PRRSV＋PCV2共感染组猪的白细胞、单核细胞、粒细胞、NK细胞、弦T细胞总数显著下降，并且共感染组比单感染组下降更加严重。结果表明，PRRSV＋PCV2共感染对仔猪外周血天然免疫细胞的影响具有协同效应，意味著在感染旱期可导致更加严重的先天免疫抑制。 相似文献
16.
采用猪蓝耳病抗体快速金标检测卡对贵州省不同发病猪场进行血清学检测,其弱阳性检出率为54%。在此基础上参考GenBank登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和PRRSV VR-2332毒株核苷酸序列,设计一对特异性引物,用提取上述检测的某猪场猪繁殖与呼吸综合征疑似病料(包括血液、肝、肺、肾、淋巴结、心、脾组织)总RNA为模版,应用RT-PCR方法扩增出目的条带,大小为739 bp,与预期的结果相同。分析表明:该核苷酸序列与已报道的Hunan-3株的同源性为100%,与国内最早PRRSV分离株CH-1 a同源性为95%,与北美代表株VR-2332和欧洲代表株LV的同源性分别为89.2%和29.2%。说明采用猪蓝耳病抗体快速金标检测卡结合RT-PCR方法作为猪繁殖与呼吸综合征的诊断方法是准确、可行的。 相似文献
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲型标准株（ATCC VR-2332）的部分ORF7保守序列、猪流感（SIV）A/Swine/HeNan/703/2001(H3N2)株的NP基因保守序列,设计合成了2对特异引物,分别扩增出大小为300和457 bp的特异性基因片段,通过优化RT PCR条件,最终建立了可同时检测PRRSV和SIV的复合RT-PCR诊断方法,该方法能检出约10 pg总RNA病毒。应用该方法分别对河南省不同地区送检的26头份病死猪的鼻腔分泌物、气管、血液、肺组织等进行检测,结果9头份PRRSV阳性,4头份SIV阳性,其中4头份SIV和PRRSV同时为阳性,其余猪为阴性,健康猪对照样品全部阴性。结果表明,PRRSV和SIV复合RT-PCR诊断方法具有高度特异性和敏感性,为在分子水平上对PRRSV、SIV的混合感染进行早期快速诊断提供了科学依据。 相似文献
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猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染对仔猪致病性的评估 总被引：11，自引：0，他引：11
本研究通过猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)强毒共感染3周龄健康仔猪来评价其致病性。试验动物随机分为3组,空白对照组(n=3头),PRRSV单独感染组(n=3头),PCV2和PRRSV共感染组(n=6头),从而比较相互之间的差异。通过临床症状、病理学变化、病原学和血清学检查,对二者混合感染仔猪的致病性进行了研究。结果表明PCV2和PRRSV共同感染能引起仔猪断奶后多系统消耗性综合征,表现为淋巴组织肿大、出血,肉芽肿性炎症,坏死性肝炎,仔猪消瘦、生长缓慢等特征性病变;混合感染能加重PRRSV对仔猪引起的间质性肺炎的严重程度。混合感染可以出现支气管肺炎和明显的肝病变,淋巴结多呈界限明显的块状出血等典型病变。 相似文献
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应用PCR检测方法,对来自山东、河北、河南等10省44份表现高热病症状的临床发病猪病料,进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒(PCV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪巨细胞病病毒(PCMV)和猪流感病毒(SIV)6种病原的检测。结果发现,6种病原中PRRSV的检出率最高为72.7%;单纯PRRSV感染的比例仅为2.27%。根据PCR检测结果分析PRRSV与其他5种病毒的混合感染情况,结果发现两重感染中PRRSV/PRV并发率最高(62.50%),三重感染中PRRSV/PRV/PCV并发率最高(43.75%),四重感染中PRRSV/PRV/PCV/PCMV并发率最高(28.125%),五重感染中PRRSV/PCV/PCMV/CSFV/PRV并发率最高(15.625%),PRRSV/PCV/PCMV/CSFV/PRV/SIV六重感染的比例为9.375%。将PRRSV阳性病料接种猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞,共分离到9株PRRSV,分离率为28.1%。结果表明,发病猪多为感染PRRSV的同时混合感染其他多种病毒,为制定合理的免疫程序预防猪场各种疾病提供科学依据。 相似文献