细粒棘球蚴RTN4基因的克隆及序列分析     

刘田莉  孟庆玲  乔军 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2016,44(3):17-22

【目的】克隆细粒棘球蚴(Eg)内质网膜蛋白4(Reticulon-4,RTN4)抗原基因,对其序列进行生物信息学分析。【方法】采集感染Eg的绵羊肝脏和肺脏,提取Eg头节总RNA为模板,对RTN4基因进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体后测序,对其核苷酸序列及氨基酸序列进行生物信息学分析。【结果】Eg RTN4cDNA全长654bp,编码217个氨基酸,蛋白质分子质量为25.3ku,等电点为8.83。编码氨基酸序列中含有1个N端酰基化位点、2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和4个蛋白激酶C磷酸化位点。经生物信息学软件预测,RTN4蛋白的抗原表位区主要集中在第1-47位、第71-147位和第171-217位区域;含有2个高度疏水区,2个跨膜区,膜外区分别位于第1-47位和第171-217位。【结论】成功克隆了Eg RTN4基因,预测了其编码蛋白抗原的结构和表位。  相似文献   

不同保存方法对少孢节丛孢菌存活及捕食活性的影响     

孟庆玲  贡莎莎  乔军  赵海龙  张星星  罗建勋  朱兴全 《西北农业学报》2016,25(3):347-352

为了探讨少孢节丛孢菌分生孢子及菌丝长期保存方法,以分生孢子萌发、菌丝生长、产生捕食器和捕食能力为指标,比较少孢节丛孢菌分生孢子及菌丝在不同保存条件下的保存效果。结果表明,在3种保存溶液中、-20℃条件下冻存3a的分生孢子没有萌发长出菌丝,而在4℃条件下保存3a的分生孢子仍可以萌发长出菌丝,且能产生捕食器捕食线虫。在固体培养基CMA和YPSSA生长的菌丝于-20℃或4℃条件下保存2a,菌丝仍可生长并产生捕食器捕食线虫;但在-20℃保存2a的菌丝复苏后接种对绵羊粪便中线虫的捕食活性较冻存前有所下降。研究结果提示,少孢节丛孢菌分生孢子可在3种保存溶液中4℃条件下及在固体培养基CMA、YPSSA中于-20℃或4℃条件下均可长期保存,但在3种保存溶液中4℃条件下菌株的捕食活性最高。  相似文献   

茄子主要早熟相关性状研究     

乔军  石瑶  王金辉  王立宾  郑华森  王利英  李素文 《中国农学通报》2016,32(4):58-62

生产实践中评价茄子早熟性的主要指标是前期产量。为探究茄子早熟相关性状,进而辅助早熟育种,2012—2014年对总计138个紫圆茄杂交组合的主要农艺性状进行相关分析,并于2013、2014年对主要前期产量相关性状进行通径分析。3年相关分析结果显示,单株结果数和单果重与单株前期产量极显著相关,而始花节位与单株前期产量的相关性表现没有规律性,存在极限效应。2014年单株结果数和单果重对单株前期产量的直接通径系数分别为1.2073和0.7935,说明对单株前期产量有显著正向效应。因此选育早熟茄子品种首要的是提高单株结果数,在保证品质的同时选择大果且肉质紧密类型,不要过分依赖始花节位。  相似文献   

12种砧木对‘巨峰’葡萄产量及果实品质的影响   总被引：3，自引：1，他引：2  

乔军  郭修武马丽揣子义  段国政 《中国农学通报》2011,27(22):239-242

以12种新引进的抗寒砧木为试材（‘贝达’作对照）,分析砧木对巨峰葡萄产量和品质方面的影响。在接穗果实产量上,‘山河1号’和‘河岸5号’砧上‘巨峰’果实产量极显著高于‘贝达’砧;在接穗果实品质上,通过比较单果重、可溶性固形物含量、可溶性糖含量、可滴定酸含量和花青苷含量来对各砧木进行评价。结果表明：供试各砧木上‘巨峰’葡萄产量和品质均好于‘贝达’砧或与‘贝达’砧相当,在生产上有替代‘贝达’的可能。  相似文献   

中国荷斯坦奶牛IL-18基因的克隆与真核表达研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

乔军  孟庆玲  陈创夫  才学鹏  刘佳旭  任艳  张辉 《江苏农业科学》2009,(4)

为了克隆并表达中国荷斯坦奶牛白介素18(interleukin,IL-18)基因,用牛白介素18基因特异性引物对刀豆蛋白(ConA)刺激后荷斯坦奶牛外周血单核细胞(PBMCb)总RNA进行RT-PCR扩增,并将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定,将目的基因亚克隆到真核表达载体pGFP-C1中,构建了重组质粒pGFP-IL-18,转染BHK-21细胞,检测目的基因是否表达.结果:该基因全长582 bp,编码193个氨基酸,与羊、犬和猪IL-18基因相比,核苷酸序列有较高的同源性,但与小鼠和鸡IL-18基因相比有明显的种属差异,转染48 h后,可在转染细胞胞浆中检测到黄绿色的荧光,表明已成功克隆了中国荷斯坦奶牛IL-18基因,并实现了该基因在真核细胞中的表达.  相似文献   

利用SSR进行品种纯度鉴定的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

乔军  王利英  石瑶 《天津农业科学》2011,17(4):45-51

对品种纯度鉴定现状和困难、分子标记SSR原理和优点以及SSR在品种纯度鉴定中的应用等进行综述,并对高通量、高效率的DNA指纹图谱构建技术和全自动基因分析技术的实现作了展望。  相似文献   

单核细胞增生李斯特菌 sRNA 伴侣分子 hfq的基因克隆、表达及纯化     

彭叶龙  乔军  孟庆玲  谢堃  陈诚  刘田莉  马玉  才学鹏  陈创夫 《华北农学报》2014,(5)

为克隆、表达单核细胞增生李斯特菌sRNA分子伴侣蛋白hfq基因,并纯化重组蛋白,通过PCR的方法从单核细胞增生李斯特菌基因组DNA中扩增出hfq基因,将扩增产物克隆于pMD18-T载体中,测序验证后,再将hfq基因亚克隆至表达载体pET-32a（＋）中,成功构建pET-32a（＋）-hfq原核表达载体。然后,转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中,通过IPTG进行诱导表达,对表达蛋白进行可溶性分析,并采用Ni-NTA纯化目的蛋白。结果显示：克隆的hfq基因全长234 bp,编码77个氨基酸,通过SDS-PAGE可以检测到27 kDa的蛋白特异性条带;并从上清中纯化得到了Hfq融合蛋白。为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。  相似文献   

猪囊尾蚴dUTPase基因的克隆、表达及其产物的酶学活性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘振勇  吕志慧  郑亚东  窦永喜  乔军  骆学农  张艳  景志忠  才学鹏 《中国农业科学》2010,43(1):192-199

【目的】克隆、表达猪囊尾蚴dUTPase基因并分析其酶学活性。【方法】通过RT-PCR的方法克隆猪囊尾蚴dUTPase基因,将其与pET载体连接并在原核系统中高效表达;表达产物经Ni柱纯化后进行酶学活性测定。【结果】序列分析表明猪囊尾蚴dUTPase基因与六钩蚴的dUTPase基因核苷酸同源性为100%,而且其氨基酸序列中同样存在5个保守基序。SDS-PAGE显示在21kD附近出现与目的蛋白大小相符的特异条带,表达产物经纯化后dUTPase的含量为2.863mg·mL-1。酶学活性试验证实重组dUTPase能特异性降解dUTP,同时EDTA可以抑制dUTPase的活性;而Mg2+可以增强猪囊尾蚴dUTPase的活性。【结论】成功克隆表达了猪囊尾蚴dUTPase基因并鉴定了它的酶学活性,为进一步研究dUTPase在猪囊尾蚴中的生物学功能奠定了基础,同时也为抗猪囊尾蚴病的药物设计和开发提供了研究基础。  相似文献   

石河子垦区绵羊内寄生虫虫种调查     

孟庆玲  乔军  陈创夫  刘继荣  剡根强 《中国兽医杂志》2010,46(11)

绵羊内寄生虫是指寄生在绵羊体内的寄生虫,包括线虫、吸虫、绦虫、原虫等[1].绵羊内寄生虫病大多是慢性消耗性疾病,不像传染病那样发病迅猛,发病率和死亡率较低,在动物疫病防控中得不到重视.然而,由寄生虫病所造成的家畜生长发育迟缓、饲料利用率降低等间接经济损失常比那些引起急性死亡的疫病所引起的经济损失还要大[2].新疆石河子垦区绵羊存栏达20多万只,养羊业已经成为当地畜牧业中的支柱产业.然而,近年来一些动物寄生虫病已经成为制约当地养羊业快速健康发展的瓶颈之一.  相似文献   

牛病毒性腹泻病毒石河子株的分离与基因型鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

任艳  陈创夫  乔军  杨霞  张辉  王鹏雁  盛金良  倪伟 《中国兽医学报》2010,30(4)

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhoea virus,BVDV)不同的基因型在抗原性方面存在差异,使疫苗免疫难以收到预期效果。本试验对分离到的BVDV石河子株和其他石河子分离株进行基因型鉴定,通过对病毒的遗传分类研究,为该病的防治和开发新的基因工程疫苗提供一定依据。采用免疫学试验、电镜观察、理化特性测定以及PCR技术、同源性比较等方法分离、鉴定1株BVDV石河子分离株,命名为BVDV shz132株,并应用系统发生分析方法鉴定该株与其他石河子分离株Manasis、hihezi148和Letuyi株的基因型。将免疫学鉴定为阳性的样品进行病毒分离,电镜观察分离的BVDV shz132株病毒直径为40~60 nm,为有囊膜的球形颗粒。理化鉴定结果与参考株BVDV Oregon C24V一致。根据BVDV基因组5-′UTR基因设计引物在发病牛淋巴结、肠道分泌物制备的悬液及其分离的病毒细胞培养物中均扩增得到了大小为267 bp的片段。核苷酸同源性分析结果表明BVDV shz132株与BVDV Osloss株的同源性最高(97.5%),BVDV Manasi株等与BVDV NADL株的同源性最高(97.8%);系统发生分析表明上述所有石河子分离株均属于BVDV-Ⅰ型。  相似文献