鹅细小病毒的分子生物学研究进展     

蒋运博  董浩  马磊  徐楠楠  段小波  胡桂学 《黑龙江畜牧兽医》2012,(5):31-33

鹅细小病毒(GPV)病是危害养鹅业的主要传染病之一。文章根据国内外对鹅细小病毒的分类地位、分子生物学特性、基因组的结构特点、非结构蛋白与结构蛋白的功能以及分子生物学诊断与防治等方面的研究作一综述,以期为鹅细小病毒及小鹅瘟的防控提供参考。  相似文献   

牛血凝块基因组DNA提取方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

曹岩峰  李建斌  王洪梅  李秋玲  胡桂学  仲跻峰 《中国草食动物》2007,27(6):39-40

建立了一种牛血凝块基因组DNA提取方法，其过程为机械性粉碎，高盐EDTA处理后用含蛋白酶K和SDS的细胞裂解液消化，苯酚-氯仿抽提，再以本方法抽提的DNA为模板进行PCR扩增，对PCR产物测序，测序结果与抗凝血DNA的PCR产物测序结果比较。结果表明：本方法提取的DNA成功地应用于PCR扩增。  相似文献   

小鹅瘟病毒胶体金层析检测卡的研究     

李长瑜  周铁忠  张喜悦  王翌  胡桂学 《中国预防兽医学报》2007,29(8):625-628

参照李茂祥等人的方法提纯小鹅瘟病毒（Goose plague virus,GPV）,免疫小鼠,按常规方法获得3株GPV单克隆抗体。用胶体金标记提纯的GPV单克隆抗体288并制备金标棉,马抗GPV多克隆抗体和羊抗鼠抗体喷涂NC膜,组装成胶体金检测卡。特异性试验结果表明,该检测卡只能检测出GPV,其他对照病毒检测结果均为阴性。将GPV做100倍稀释,仍可获得阳性结果。  相似文献   

中国荷斯坦牛BoLA-DRB3.2基因座的PCR-RFLP多态性分析     

赵福斌  李建斌  王洪梅  胡桂学  李秋玲  仲跻峰  侯明海 《家畜生态学报》2007,28(5):25-27,30

主要组织复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)基因在动物机体免疫系统中具有重要作用,并与多种疾病的抗性或易感性存在相关性.利用限制性内切酶HaeⅢ和RsaⅠ通过PCR-RFLP技术分析了112头中国荷斯坦牛BoLA-DRB3.2基因的多态性.结果表明:所检测牛群中BoLA-DRB3.2基因在两个酶切位点均存在多态性,HaeⅢ酶切位点存在4种等位基因,有4种基因型;RsaⅠ酶切位点存在3种等位基因,有4种基因型.经x2适合性检验,所检测牛群中BoLA-DRB3.2基因在两个酶切位点均未达到Hardy-weinberg平衡状态.  相似文献   

新城疫病毒NP蛋白MHCI类分子限制性T细胞表位研究     

乔长涛  谭磊  于圣青  仇旭升  宋翠萍  孙英杰  胡桂学  丁铲 《中国动物传染病学报》2014,(1):9-15

为了对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cell,CTL)表位进行研究,本研究通过在线分析软件预测了NDV弱毒株La Sota和强毒株Herts/33 NP蛋白的MHC I类分子限制性表位,共获得9条可能的表位多肽序列,并人工合成了这些短肽。分别构建了含有La Sota和Herts/33 NP基因的DNA重组质粒并免疫4周龄SPF级C57BL/6小鼠,首免后21 d加强免疫1次,二免后10 d无菌采集脾脏制备脾淋巴细胞悬液,采用ELISpot法测定预测多肽诱导脾淋巴细胞分泌IFN-γ的能力,根据分泌IFN-γ形成的特异性斑点数进行生物统计学分析,发现2条多肽产生的斑点数显著高于无关肽刺激组(P<0.01)。确定了针对小鼠H-2 kb的限制性T细胞抗原表位的2条多肽。这些可用于合成特异性的MHC-肽四聚体,为后续研究NDV与树突状细胞(dendritic cells,DC)及T淋巴细胞之间的免疫抑制机制提供重要保障。  相似文献   

豹源猫杯状病毒ORF2基因的扩增、克隆及原核表达     

刘秋艳  应瑛  王一鸣  陈小庆  赵艳丽  胡桂学 《现代畜牧兽医》2015,(1)

为制备猫杯状病毒血清学检测抗原，本研究根据实验室保存的1株豹源猫杯状病毒基因序列设计引物，扩增了开放阅读框2（ORF2）中1734 bp的核苷酸序列，将其克隆至表达载体pET-28a上，构建了pET-28a-FCV1734重组质粒。将该质粒转化大肠杆菌，诱导表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测，证明所表达的蛋白具有良好的反应原性。  相似文献   

禽流感流行病学现状及预防措施     

张宁宁  谷松至  朱晓文  刘太峰  赵健乔  王军政  胡桂学 《现代畜牧兽医》2014,(2):51-54

近年来,禽流感对人类及易感动物的威胁日趋严重,给许多国家和地区造成了严重的经济损失。为了更好地预防禽流感的爆发和流行,本文介绍了禽流感的流行病学特征和流行现状,提出了预防禽流感的措施,为禽流感的防治提供参考。  相似文献   

鹅细小病毒 PCR DHPLC检测方法的建立          下载免费PDF全文

饶桂波  邵洪泽  胡桂学  吴健敏 《家畜生态学报》2014,35(5):64-67

  相似文献   

犬冠状病毒V1株膜蛋白基因的克隆与序列分析     

乔军  夏咸柱  胡桂学 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2004,32(12):75-78

根据GenBank中报道的CCVInsavc 1株核蛋白基因(M)序列,用特异性引物对分离的CCVV1野毒株进行了RT PCR扩增,将扩增得到的PCR片段纯化后与pGEM T连接得到重组质粒pTM,并进行了核苷酸序列测定。结果表明,该基因全长为789bp,编码263个氨基酸,其中前17个氨基酸为信号肽。与CCV标准毒株Insavc 1M基因相比,两者核苷酸的同源性为92.1%;推导的氨基酸序列同源性为90.9%,差异主要发生在该蛋白的N端前1/3区域内。在推导的M蛋白氨基酸序列中,发现了3个明显的疏水区,提示该蛋白可能是一个反复跨膜的蛋白;在N端15～17,38～40,234～236位氨基酸存在3个潜在的N 联糖基化位点,可能是形成该蛋白表面抗原决定基的位点。另外,推导蛋白氨基酸序列的疏水性和抗原表位与Insavc 1株M蛋白存在一定差异,提示两者免疫原性可能有差别。  相似文献   

犬冠状病毒V1株核蛋白基因的克隆与序列分析     

乔军  夏咸柱  胡桂学  谢之景  闫芳  杨松涛  黄耕 《西南大学学报》2004,26(4)

首次对犬冠状病毒V1野毒株核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定.根据GenBank中报道的CCV Insavc-1株N基因序列,设计了1对特异性引物,对分离的CCV V1野毒株进行了RT-PCR扩增;将扩增得到的阳性PCR片段经纯化后与pGEM-T连接得到重组质粒pTN1,进行核苷酸序列测定,并与GenBank中CCV标准毒株Insavc-1 N基因进行了比较.结果该基因全长为1 146 bp,编码382个氨基酸,两者核苷酸的同源性为91.7%;推导的氨基酸序列的同源性为90.2%,显示出较高的保守性.在V1野毒株推导的N蛋白N端156-179位存在一个SRXX富集区,与小鼠肝炎病毒相应区域相同,推测可能是RNA结合区.另外,推导的该蛋白氨基酸序列其疏水性和抗原表位与标准毒株Insavc-1 N蛋白存在一定的差异;在氨基酸组成上,该蛋白丝氨酸和赖氨酸含量高达9.84%,提示该蛋白具有高度螺旋和缠绕的分子结构.  相似文献