H9N2亚型禽流感病毒M2e蛋白在原核系统中的表达     

张民秀  谢芝勋  黄莉  谢志勤  刘加波  谢丽基  邓显文  罗思思  黄娇玲 《动物医学进展》2017,38(4)

以含有全长H9N2亚型AIV M2基因的质粒为模板,经PCR扩增得到M2e基因;利用BglⅡ和BamHⅠ之间互为同尾酶关系,构建顺次连接的多拷贝体M2e,并连接入原核表达载体pGEX-6p-1,构成2M2e-pGEX、4M2e-pGEX、6M2e-pGEX、8M2e-pGEX和10M2e-pGEX重组质粒,并转化至表达宿主菌中;将测序正确的菌液经不同浓度IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳鉴定重组蛋白大小,对蛋白进行可溶性分析;利用Western blot分析5种重组蛋白的反应原性。结果显示,在37℃下,2M2e-pGEX、4M2e-pGEX、6M2e-pGEX、8M2e-pGEX和10M2e-pGEX重组蛋白分别经终浓度为0.25、0.25、0.5、0.25、0.75mmol/L的IPTG诱导4h时,表达量最高;2M2e-pGEX、4M2e-pGEX、6M2e-pGEX、8M2e-pGEX和10M2e-pGEX重组蛋白大小分别为31.7、37.2、42.7、48.2、53.9ku;对重组蛋白进行可溶性分析显示,5种重组蛋白均以包涵体形式存在;Western blot分析显示,2M2e-pGEX、4M2e-pGEX、6M2e-pGEX、8M2e-pGEX和10M2epGEX重组蛋白与鼠抗GST标签的单克隆抗体具有良好的特异性反应,为后期进一步获得高免疫原性蛋白和筛选具有通用免疫原性的重组蛋白奠定基础。  相似文献   

米非司酮对小鼠精子穿透卵丘细胞层的影响     

周崇  黄莉  石德顺  蒋建荣 《中国畜牧兽医》2017,44(5):1275-1280

本研究旨在探讨米非司酮（mifepristone,RU486）对小鼠精子穿透卵丘细胞层的影响。分别添加20 μg/mL RU486到精子获能液或穿卵培养液,检测小鼠精子顶体反应发生比率和穿透卵丘细胞层能力。结果显示,添加RU486能够极显著抑制孕酮（P₄,5 μg/mL）诱导的精子顶体反应（P ＜0.01）;并极显著减少穿透卵丘细胞层到达卵子透明带的精子数量及在卵子-卵丘细胞复合体（OCC）中精子发生顶体反应的比率（P＜0.01）;同时添加P₄和RU486情况下,相比单独添加RU486,虽然P₄能够极显著地促进精子穿透卵丘细胞层到达透明带,但对OCC中的精子顶体反应没有明显作用。综上表明,RU486能够抑制P₄诱导的顶体反应并影响小鼠精子穿透卵丘细胞层过程,揭示P₄/孕酮受体（PGR）通路在小鼠精子穿卵过程中具有重要作用。  相似文献   

晚造水稻新品种简比试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘翠娟  吴丽  黄莉 《农业科技通讯》2010,(12):140-142

通过对6个水稻参试新品种的田间观察记录、室内考种及产量结果等对比综合分析,初步认为中浙优1号和博Ⅲ优9678为合浦县党江镇大面积扩大推广的当家品种,博优302可有待推广,优Ⅰ5759不主张在该镇推广,冠优528和恒优6号建议明年继续试验后再确定是否推广。  相似文献   

长江中游荆江监利河段水沙特性分     

黄莉  蔺秋生 《中国农村水利水电》2009,(2):26-29

对荆江监利河段的水沙特性进行了初步概括,以期抛砖引玉。根据监利河段代表水文站—监利水文站多年统计资料（1950～2006年）,监利河段年径流量变化过程与年输沙量变化过程均呈不规则周期性变化,水、沙过程变幅略大,2006年为长江枯水少沙年份,径流量、输沙量均为历年来最低值。河段径流量年内分配与输沙量基本一致,均集中于汛期5～10月。通过分析可知,监利河段来水来沙总体呈正相关性,即径流量越大,输沙量也就越大,而2000年以来年径流量序列与年输沙量序列无相关性,河段输沙量呈现明显减少趋势。监利河段的水沙变化除了受长江上游来水来沙变化的影响外,下荆江裁弯工程、荆江三口分流分沙变化、三峡工程等水利枢纽建设及洞庭湖出流顶托等,均是主要影响因素。  相似文献   

正交实验法研究芦荟中黄酮类化合物的提取及含量的测定   总被引：1，自引：0，他引：1  

周建青  徐爱列  王永宁  黄莉 《安徽农业科学》2008,36(20)

[目的]研究芦荟中黄酮类化合物的最佳提取条件及含量的测定。[方法]采用正交实验方法提取芦荟中的黄酮类化合物,并用721型可见分光光度计在510 nm处测定其吸光度值并计算其含量。[结果]在95℃时,用70%的乙醇提取,历时2 h,黄酮类化合物的提取效果较好,含量为0.184%。[结论]该实验方法快速、准确、灵敏,实验结果对芦荟资源的开发利用具有一定意义。  相似文献   

大豆肽抗氧化性测定方法研究   总被引：2，自引：1，他引：2  

徐萍  黄莉  董良杰  江连洲 《大豆科技》2005,(5):24-26

简要地比较了亚油酸自氧化法和过氧化值方法对大豆肽的抗氧化性的测定结果,在水解度为18.09%时,大豆肽的抗氧化力最强,两种方法得出一致的结论,前者不但结果准确,而且简便、快捷;后者虽结果较可靠,但耗时长。所以亚油酸测定方法是过氧化值测定方法的较理想的替代方法。  相似文献   

闵行区蔬菜农药残留快速检测的现状和存在的问题及解决方法     

王艳菊  李世忠  罗贞  王世官  沈佩莉  黄莉花  包伟荣  汤爱军  周纪国 《上海蔬菜》2017,(1):9-10

<正>上海市闵行区农业生产大多采用"合作社+农户"的模式,农户的种植地分布较分散,且人员文化素质参差不齐,施肥、用药等难以监管,而且很多蔬菜尤其是叶菜类,为了保持新鲜度,即采即卖,在流通领域停留时间极短,加上批量小、来源广,对其进行农药残留检测有一定难度。因此迫切需要一种快速检测技术,使蔬菜产品在生产基地或流通源头就得到检测,从而能阻止不合格蔬菜流入市场。目前食用蔬菜中毒主要是  相似文献   

当前大学生思想动态剖析     

黄莉 《贵州农学院丛刊》1997,(1):29-31

  相似文献   

微量元素锌缺乏与鸡异嗜癖发生的关系     

黄莉  郑增忍  方梅  王建华  朱秀琴  张德寿 《中国动物检疫》2002,19(6):23-25

本研究在对鸡啄癖发生原因调查和临床症状观察的基础上,对病鸡的血液进行了生理、生化指标的分析.结果发现,病鸡白细胞总数增加到(19.93±6.08)×103/mL,血清磷和锌的含量降低,分别为6.48±0.64mg%、5.82±0.16μg/mL.这对鸡啄癖发生的病因和进行早期临床诊断有重要意义,同时也对预防鸡啄癖的发生有重要价值.  相似文献   

牛支原体、牛病毒性腹泻病毒和牛传染性鼻气管炎病毒三重二温式PCR检测方法的建立及应用     

范晴  谢芝勋  谢志勤  谢丽基  黄莉  黄娇玲  张艳芳  曾婷婷  王盛  罗思思  邓显文  刘加波  庞耀珊 《动物医学进展》2018,(2)

为建立一种可同时检测牛支原体(MB)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性支气管炎病毒(IBRV)的三重二温式PCR检测方法。根据GenBank中MB、BVDV和IBRV的保守基因Uvrc基因、5′端非编码区(5′-UTR)和GB基因,分别设计了3对特异引物,将三温式PCR扩增程序简化为两个温度梯度,优化反应条件建立了用于同时检测MB、BVDV以及IBRV 3种常见牛呼吸道传染病病原的三重二温式PCR。结果显示,该方法特异性好,只对MB、BVDV和IBRV模板进行扩增,扩增的目的片段长度分别为412、170、727bp,对其他牛病原体无特异性扩增;灵敏度高,最低能同时检测到10 000拷贝的目的核酸;干扰性小,能同时检测3个不同浓度的模板。研究所建立的MB、BVDV和IBRV三重二温式PCR检测方法,具有特异性好、灵敏度高、方便快速等优点,可用于临床鉴别诊断和流行病学调查,具有很高的临床应用价值。  相似文献