全文获取类型
收费全文 | 109篇 |
免费 | 3篇 |
国内免费 | 4篇 |
专业分类
林业 | 3篇 |
农学 | 2篇 |
基础科学 | 6篇 |
4篇 | |
综合类 | 40篇 |
水产渔业 | 9篇 |
畜牧兽医 | 50篇 |
园艺 | 1篇 |
植物保护 | 1篇 |
出版年
2023年 | 2篇 |
2022年 | 1篇 |
2021年 | 1篇 |
2020年 | 3篇 |
2019年 | 1篇 |
2018年 | 4篇 |
2017年 | 1篇 |
2016年 | 1篇 |
2015年 | 1篇 |
2014年 | 3篇 |
2013年 | 5篇 |
2012年 | 8篇 |
2011年 | 16篇 |
2010年 | 5篇 |
2009年 | 4篇 |
2008年 | 10篇 |
2007年 | 2篇 |
2006年 | 7篇 |
2005年 | 7篇 |
2004年 | 9篇 |
2003年 | 4篇 |
2002年 | 6篇 |
2001年 | 5篇 |
2000年 | 3篇 |
1998年 | 2篇 |
1997年 | 2篇 |
1996年 | 1篇 |
1994年 | 2篇 |
排序方式: 共有116条查询结果,搜索用时 187 毫秒
21.
致病性嗜水气单胞菌耐喹诺酮类药物菌株的分离鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
对吉林省内12个水域采集和送检的66尾病鱼进行了细菌分离鉴定,共检出46株嗜水气单胞菌疑似菌,通过生化试验结合PCR扩增气溶素基因Aer,确定其中22株为致病性嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法和双倍稀释法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的耐药性,其中有4株对喹诺酮类药物耐药,并且为交叉耐药,耐药菌检出率为18.2%,纸片扩散法检测其对喹诺酮类药物的抑菌圈均小于19mm。将病料中分离的8株嗜水气单胞菌负染后电镜观察,耐药菌表面有许多大小不同的球形结构,而敏感菌表面则为细丝状菌毛结构。 相似文献
22.
旋毛虫新生幼虫期特异性T314全长cDNA的克隆及表达 总被引:4,自引:1,他引:3
利用PCR将旋毛虫新生幼虫期特异性全长T314cDNA的信号肽祛作后重组到原核表达载体pET-28a。将重组质粒pET28-T314转入克隆菌DH5a和表达菌DE3,分别提取质粒进行酶切,测序鉴定。用KIPTG诱导培养重组表达菌DE3,做菌体裂解物外源表达产物的SDS-PAGE分析。将重组质粒表达的融合蛋白免疫家兔制备抗血清,采用Western blot检测T314cDNA在旋毛虫不同发育时期的表达情况及其天然表达产物的相对分子质量。测序结果显示:外源T314cDNA的PCR产物在重组质粒pET28-T314中阅读框架正确;SDS-PAGE分析结果显示:经IPTG诱导后转化菌DE3的裂解产物与对照菌相比出现了1条相对分子质量约为39000的新条带,大小与外源cDNA融合蛋白的理论推导值38800相符;Western blot检测结果显示:T314cDNA的天然表达产物仅存在旋毛虫新生幼虫,不存在于成虫与肌幼虫,且相对分子质量大小与其在原核重组质粒中表达产物相同。 相似文献
23.
本试验旨在研究盐胁迫对苜蓿营养品质及附着微生物群落的影响。试验处理包括无盐胁迫(盐含量<1‰,作为对照)、轻度盐胁迫(盐含量1‰~2‰)、中度盐胁迫(盐含量2‰~3‰)和重度盐胁迫(盐含量3‰~4‰)。每个盐胁迫试验处理设置3个小区,每个小区面积为30 m2(5 m×6 m)。结果表明:中度盐胁迫下苜蓿酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维含量显著低于其他处理(P<0.05)。中度盐胁迫下苜蓿谷氨酸、脯氨酸、可溶性蛋白质、粗蛋白质和可溶性碳水化合物含量与其他处理相比显著增加(P<0.05)。所有处理的Shannon指数和Chao1指数均无显著差异(P>0.05)。主坐标分析(PCoA)显示盐胁迫未完全改变苜蓿表面附着微生物群落的结构。所有处理下苜蓿门水平附着核心菌群为变形菌门(84.48%~92.91%)、放线菌门(4.30%~6.47%)、拟杆菌门(0.39%~10.59%)和厚壁菌门(0.61%~3.02%),属水平附着核心菌群为泛菌属(47.17%~56.11%)、假单胞菌属(10.58%~19.88%)、鞘脂单胞菌属(5.69%~9.32%)、... 相似文献
24.
25.
我院从1993~1996年共收治甲状腺腺瘤患者412例,其中恶变25例。甲状腺腺瘤是否恶变临床上较难判断,因此术前或手术中易误诊,现总结分析如下:1 临床资料本组共25例,其中男8例,女17例,年龄13~59岁。平均年龄(37.2±2.3)岁。病史20d~10a。均以颈部肿物就诊,单发22例,双侧甲状腺肿物3例。肿物最小0.5cm×0.5cm,最大6cm×3cm,质地中等,边界较清,可随吞咽上下移动,未触及同侧颈淋巴结肿大。ECT提示甲状腺冷结节9例,凉结节16例。本组术中见瘤体囊性变16例,瘤体质较硬、不均匀、表面不光滑9例。25例中16例由于怀疑恶变行冰冻切片检查发现肿物恶… 相似文献
26.
27.
利用PCR技术将T3223-6 cDNA扩增克隆到原核表达载体pET-28a,将重组质粒转入克隆菌Nova-blue,提取质粒进行酶切和测序鉴定后转入表达菌BL21star(DE3).用1 mM IPTG诱导培养重组表达菌,对菌体裂解物进行SDS-PAGE分析,检测重组蛋白的表达情况.用旋毛虫感染猪血清和正常血清,通过western blotting检测重组蛋白的反应原性.结果表明:经IPTG诱导后重组转化菌的裂解产物出现44 kD左右的表达带,大小与理论值相符;western blotting检测结果显示重组蛋白可以被旋毛虫感染猪血清识别,具有反应原性. 相似文献
28.
根据GenBank中旋毛虫53000抗原基因的序列设计引物,用PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因p53cDNA,将其克隆到pMD-18T载体,转化至大肠埃希氏菌NovaBlue后测序分析,结果表明,克隆到1176bp的p53cDNA,共编码391个氨基酸。序列分析表明,p53cDNA序列与GenBank中的旋毛虫p53基因序列相比共有12个核苷酸发生改变,二者的同源性为98%,所编码蛋白质氨基酸序列的同源性为98%。将其克隆到原核表达载体pET28a并转化至表达菌BL21star(DE3),经IPTG诱导表达后获得约48000的重组蛋白。Western blotting检测证实,p53重组蛋白可以被旋毛虫感染猪血清识别,具有很好的抗原性。 相似文献
29.
30.
嗜水气单胞菌喹诺酮类药物抗性决定区基因片段的克隆与突变分析 总被引:1,自引:0,他引:1
将分离到的4株对环丙沙星,诺氟沙星和氧氟沙星等喹诺酮类药物耐药的嗜水气单胞菌、2株敏感菌,进行旋转酶基因A亚单位(gyrA)喹诺酮抗性决定区基因(QRDR)PCR扩增。引物序列A1:agagttcctatcttgattacg;a2:ctgtgatgtaggtcatcaact,在gyrA基因中的位置分别为53-73和620-640。PCR扩增后,将扩增产物克隆到pMD-18T载体,酶切鉴定后测序。用DNAstar软件分析比较其蛋白序列,发现4个氨基酸突变位点,分别是83位点的Ser-Ile(4株耐药菌),92位点的Leu-Met(4株耐药菌),174位点的Ile-Phe(3株耐药菌),202、203位点的Asn、Leu-Asp、Arg(3株耐药菌,另1株Leu未突变)。83位点的突变与大肠杆菌等一致,122位点具有保守的Try,耐药菌突变后的氨基酸残基分子量均比对应增大。4株耐药菌、2株敏感菌的喹诺酮抗性决定区基因片段序列巳登录GenBank,注册号AY039655,AY039656,AY138539,AY138540,AY138537,AY138538。 相似文献