猪圆环病毒2型ORF2基因在Sf9细胞中表达及免疫原性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱鹏  张小飞  徐延伟  尹秀凤 《畜牧与兽医》2015,(2):85-88

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳(Cap)蛋白。将优化合成的PCV2 ORF2基因克隆到杆状病毒转移载体p Fast HTA中,并将鉴定正确的重组质粒p Fast HTA-Cap2转化至大肠杆菌感受态细胞,经蓝白斑筛选得到含有目的基因的重组杆状病毒质粒(r Bac-Cap2),转染至Sf9细胞,获得重组杆状病毒,对感染重组杆状病毒的细胞培养物进行重组蛋白的表达,进行SDS-PAGE和Western blot分析,并对表达的重组蛋白进行小鼠免疫试验及其病毒血清中和试验。SDS-PAGE分析表明,优化合成的PCV2 ORF2基因得到表达,蛋白分子质量大小为33 ku;Western blot证实重组蛋白能够识别抗PCV2阳性血清,表明重组蛋白具有反应原性;小鼠免疫试验结果显示,该蛋白能刺激机体产生特异性抗体,具有较好的免疫原性;病毒血清中和试验证实,抗PCV2 Cap血清抗体具有中和病毒的活性,中和效价为1∶42。该蛋白在杆状病毒系统中的成功表达,为PCV2感染的诊断及亚单位疫苗的研制奠定基础。  相似文献   

应用PCR快速检测鸭疫里默氏杆菌的研究     

李春芬  李郁  魏建忠  张小飞  黄显明 《中国家禽》2008,30(1):18-20

根据鸭疫里默氏杆菌（RA）16SrDNA基因序列设计引物,对1株RA阳性株、9株临床分离鉴定的RA、3株大肠杆菌、1株多杀性巴氏杆菌和1株沙门氏菌进行PCR扩增,结果所有RA均出现643bp特异性扩增条带,其余非RA则均未扩增出特异性条带,表明该对引物及建立的PCR具有很强的特异性。优化的PCR反应体系能检出RA的最低DNA量为20pg。菌落直接PCR是增强RA快速检测鉴定的手段。应用PCR对病料组织直接进行RA检测,脑组织为首选检测对象,具有良好的实际应用意义。  相似文献   

猪瘟和猪伪狂犬病免疫程序的制定与评估     

孙华伟  张小飞 《猪业科学》2019,36(6):40-41

一个行之有效的免疫程序对猪场的作用是无庸赘述的,长期以来,国内鲜有中小规模猪场根据猪群的抗体水平量身定制适合本场的免疫程序,而是将大型规模化猪场的免疫程序奉为“圭臬”。笔者所在的江苏省农业科学院兽医诊断中心根据对多家猪场近3年来的跟踪监测,摸索出一套如何确定仔猪猪瘟、猪伪狂犬病疫苗首免日龄及免疫效果评价的方法。以美国IDEXX公司生产的试剂盒为例,在仔猪的猪瘟母源抗体值降至抗体阳性的临界值附近时,进行猪瘟疫苗的第1次免疫,并在第1次免疫后28d进行第2次免疫;在猪伪狂犬病母源抗体值降至0.4~0.5时,进行猪伪狂犬病疫苗的第1次免疫,并在第1次免疫后28d进行第2次免疫。在上述疫苗二免后4~8周进行对应疫苗免疫效果的评估较为适宜。相关信息为江苏省乃至全国猪场猪瘟与猪伪狂犬病免疫程序的制定与评价提供了科学数据参考。  相似文献   

高效液相色谱法测定板蓝根颗粒中腺苷的含量     

王亚芳  钟昆芮  李应超  周艳飞  张小飞  高婷  秦俊杰  王海军  战皓 《中国兽药杂志》2018,52(7):59-63

建立了兽用板蓝根颗粒中腺苷含量测定的高效液相色谱法。以Symmetry C18柱为固定相,甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(10∶90)为流动相,检测波长260 nm,流速为1.2 m L/min,柱温30℃。采用外标法定量计算含量。腺苷的线性范围为4~20μg/m L,回归方程y=71169x-6732,R2=0.9999;平均回收率96.62%,RSD为1.08%。方法操作简单、精密度高、稳定性好,测定结果准确可靠,可用于板蓝根颗粒中腺苷的质量控制。  相似文献   

小议猪场的"非线性回报"     

孙华伟  张晓曦  张敬峰  张小飞 《猪业科学》2019,36(8):126-127

世界事物间的本质是非线性的,线性只是非线性的特例。华为公司近几年在市场上惊艳绝俗,后发制人的优异表现与其前期扎实的积累与沉淀是密不可分的。中国养猪业应该像华为公司那样厚积薄发,培育世界顶尖的育种公司,引进或培育高层次养猪行业人才,对种猪群进行相关疫病的净化,发展AI养猪等。急于求成、挣"快钱"不仅是养猪企业,更是所有企业发展的大忌,如果没有前期坚实的积累,仅靠营销技巧打天下,无异于沙滩上的城堡,看似雄伟磅礴,实则缺乏根基。  相似文献   

茶树种苗工厂化快速繁育技术   总被引：5，自引：1，他引：4  

成浩  曾建明  周健  王丽鸳  常杰  葛滢  袁海波  谷保静  张小飞 《茶叶科学》2007,27(3):231-235

本文在全自动智能化温室内,按组培+温室培育和直接温室扦插培育两条技术路线,采用不同材料进行了茶树工厂化育苗试验。结果表明,以田间材料为组培起始物时,春季新梢第三腋芽萌发率最好,每周期增殖率可达2.75倍左右,成苗率在20%以上,直接移植生根率为成活小苗的90%左右。一年双季育苗试验表明,春夏季育苗在3月中旬开始,5个月后,茶苗高度达20.4±8.3βcm,练苗后移栽成活率近100%;秋冬季育苗在8~9月初开始,冬季完成根系建立,开春后达20βcm以上高度,练苗后移栽;施肥处理茶苗高度的增加量是不施肥对照的5.9倍。  相似文献   

鸭肝炎病毒A_(66)弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养   总被引：4，自引：0，他引：4  

张小飞  解启发  潘孝成  赵瑞红 《中国家禽》2000,(4)

将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）Ａ６６株接种于鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）进行细胞培养,通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查,证明了（ＤＨＶ）Ａ６６毒株能够在ＣＥＦ上增殖。试验还表明,犊牛血清对ＤＨＶ增殖具有明显的抑制作用。此外,还根据细胞培养物病毒滴度测定结果绘制出了病毒在ＣＥＦ上的生长曲线。从生长曲线可以看出,接种后８～１６ｈ病毒开始增殖,３６～６０ｈ细胞培养物中病毒滴度达最高水平。这与（ＤＨＶ）Ａ６６死鸡胚的时间基本一致鸭肝炎病毒A_(66)弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养@张小飞$安徽…  相似文献   

鸭肝炎病毒A66弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养   总被引：2，自引：0，他引：2  

张小飞  解启发  潘孝成  赵瑞红 《中国兽医学报》2000,20(1)

将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒 ( DH V) A6 6 株接种于鸡胚成纤维细胞 ( CEF)进行细胞培养 ,通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查 ,证明了 DHV A6 6 毒株能够在 CEF上增殖。试验还表明 ,犊牛血清对 DH V增殖具有明显的抑制作用。此外 ,还根据细胞培养物病毒滴度测定结果绘制出了病毒在 CEF上的生长曲线。  相似文献   

高斯过程机器学习方法在地下水位预测中的应用     

苏国韶  张研  张小飞 《中国农村水利水电》2008,(12):48-50,54

高斯过程是近年来发展起来的一种新的机器学习方法,它有着严格的统计学习理论基础,对处理高维数非线性小样本复杂问题具有良好的适应性.针对地下水位的动态变化是一个复杂的非线性过程,地下水位与其影响因素之间存在着复杂的非线性关系,将高斯过程机器学习方法应用于地下水位预测,并提出相应的模型.工程实例研究表明,地下水位预测的高斯过程机器学习模型是科学可行的,预测精度高,简单实用,对地下水位预测的问题具有较好的适用性.  相似文献   

高斯过程机器学习方法在地下水位     

苏国韶  张研  张小飞 《中国农村水利水电》2008,(12):48-50

高斯过程是近年来发展起来的一种新的机器学习方法,它有着严格的统计学习理论基础,对处理高维数非线性小样本复杂问题具有良好的适应性。针对地下水位的动态变化是一个复杂的非线性过程,地下水位与其影响因素之间存在着复杂的非线性关系,将高斯过程机器学习方法应用于地下水位预测,并提出相应的模型。工程实例研究表明,地下水位预测的高斯过程机器学习模型是科学可行的,预测精度高,简单实用,对地下水位预测的问题具有较好的适用性。  相似文献