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兔出血症病毒CD株衣壳蛋白(VP60)基因的克隆、核酸及氨基酸序列比较分析 总被引:6,自引:0,他引:6
以兔出血症病毒 CD株人工感染家兔 ,发病死亡后 ,取肝脏匀浆 ,用 Trizol试剂从匀浆上清中提取病毒 RNA。根据 Gen Bank已发表序列保守区设计并合成引物 ,采用 RT- PCR方法扩增了 RHDV衣壳蛋白 VP6 0基因。将所扩增片段克隆到 p MD18- T载体上 ,并进行了序列测定 ,测序结果表明 ,CD株 VP6 0基因全长 174 0 bp。该序列与已发表的其他分布于世界各地的 14株 RHDV序列进行了比较和基因进化树分析。无毒株与各强毒株之间的同源性为 85 .3%~86 .5 % ,强毒株间的同源性较高 ,为 92 .1%~ 10 0 %。根据进化树可把强毒株分为 2大群 ,一群为 CD株、Iowa2 0 0 0株、0 0 - 139株、99- 0 5株 ,其余的为另一群。进一步细分 ,还可以分为 4个亚群和 7个组。但毒株之间的地域性差异并不明显。同时根据 15株 RHDV VP6 0基因的核苷酸序列推导了其所编码的氨基酸序列 ,并进行氨基酸序列的比较和亲水性、柔性区、抗原性和表面结构的比较分析。结果显示 ,各毒株氨基酸之间的的同源性在 90 .5 %~ 10 0 %之间 ,其中无毒株与各强毒株之间的同源性为 90 .5 %~ 91.9% ,强毒株间的同源性在 95 %~ 10 0 %之间 ;氨基酸变异分析未发现突变造成的 VP6 0蛋白高级结构的根本性变化 相似文献
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长白猪γ-干扰素基因的克隆与序列分析 总被引:3,自引:2,他引:1
将长白猪外周血淋巴细胞进行体外培养,在ConA的刺激下培养8h~24h后,提取培养的淋巴细胞的总RNA,应用RTPCR技术扩增淋巴细胞γ干扰素cDNA,并将其克隆到pGEMT载体上,进行测序。序列测定结果表明,克隆获得的IFNγ基因全长为534个碱基,ORF为501个碱基,编码166个氨基酸,分子质量为19.4ku。此基因与我国藏猪、成华猪以及GenBank上发表的猪IFNγ基因的核苷酸同源性均为100%,并且在氨基酸水平上也完全一致。说明几种我国地方猪IFNγ在基因的核苷酸以及蛋白的氨基酸水平上不存在差异和突变,同时也证实了长白猪干扰素γ基因的正确、完整克隆。 相似文献
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将自行研制的免疫增强剂与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗联合使用。结果表明该免疫增强剂能量显著提高HVT疫苗的保护率和HVT苗活力,同时能提高机体T、B淋巴细胞免疫功能。联合使用的结果,经实践证明能更有效地控制鸡马立克氏病的发一。 相似文献
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肾型鸡传染性支气管炎病毒X株S1基因序列的测定及同源性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV) S1基因序列 ,设计了 2对引物并以 RT- PCR特异性扩增出IBV X株的 S1基因 ,基因产物大小为 1.6 4kb,与设计相符 ,对其进行序列测定后 ,与标准毒株 H5 2、H12 0、M41、BEAU和澳大利亚 T株的 S1基因进行同源性比较。结果表明 ,X株与 H5 2、H12 0、M41、BEAU和澳大利亚 T株的核苷酸序列的同源性分别为 75 .8%、76 .1%、76 .3%、75 .5 %和 76 .9%,由此可以看出 ,IBV X株与标准毒株在 S1基因上存在较大差异。 相似文献
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在数控技术专业的专业课教学中尝试在车间现场讲解和学生实际动手练习代替课堂讲授的教学模式,更好地激发了学生学习的兴趣,教学效果良好。 相似文献
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免疫接种是防制新城疫的重要手段,然而在新城疫免疫接种实践中,由于新城疫疫苗种类较多、免疫方法不一,新城疫免疫失败时有发生,导致新城疫发生。造成新城疫免疫不成功的因素有很多,现结合在实践中的一些研究就免疫失败及其对策进行分析,分述如下。 相似文献
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分别用3批鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(LaSota+W93),NDLaSota单苗和IBW93单苗免疫SPF鸡,并于免疫后第3、7、14、30、90、150天分别用NDV和NIBV强毒攻击。结果表明,二联活疫苗(LaSota+W93)于免疫后7~150d可获得与相应单苗同样的保护力。 相似文献
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