旋毛虫新生幼虫p46 000抗原基因的克隆及序列分析     

付宝权  吴秀萍  刘明远  张亚兰  原丽红  李莲瑞  卢强  陈启军  P.Boireau 《中国兽医学报》2005,25(1):37-39

应用旋毛虫感染猪血清，对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行了免疫筛选。对阳性克隆pBK-cMV-WN10的序列分析结果表明。cDNA全长为1352bp。含有1个1218bp的完整的开放阅读框架(ORF)，编码的多肽由406个氨基酸残基组成，其相对分子质量理论推导值为45900，等电点为5．43，N末端的信号肽及糖基化位点(NCS)表明其可能为分泌性糖蛋白，氨基酸序列19～156与158～295为重复区域，相似性为74％．C末端有1个半胱氨酸蛋白酶抑制剂结构域，但旋毛虫p46000抗原与其他线虫的半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白结构有很大差异，可能已经失去半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白的功能。PCR结果显示。从旋毛虫新生幼虫、肌幼虫、3日龄成虫和5日龄成虫cDNA中均扩增出此基因，表明此基因在旋毛虫各个时期均有表达。  相似文献   

旋毛虫3日龄成虫cDNA文库的免疫筛选   总被引：5，自引：0，他引：5  

张亚兰  付宝权  刘明远  原丽红  吴秀萍  李莲瑞  卢强  陈启军  P.Boireau 《中国兽医学报》2004,24(4):355-357

以旋毛虫感染猪血清为抗体探针 ,对旋毛虫 3日龄成虫 c DNA文库进行免疫筛选 ,将获得的阳性克隆进行测序 ,用分子生物学软件对所得 c DNA序列进行序列分析。结果从 4× 10 5个重组噬菌体中共获得 33个阳性克隆。序列分析结果显示 :共发现新 c DNA序列 16个 ,已知 c DNA序列 4个。其中阳性克隆 Zh8,9,10 ,12 ,13,14 ,2 0 ,2 6 ,2 8,2 9,36 ,5 4 ,6 8,70编码丝氨酸蛋白酶。通过免疫学筛选直接获得了具有免疫反应原性的阳性 c DNA克隆 ,为旋毛虫病诊断抗原及保护性抗原的筛选奠定了基础  相似文献   

米氏硫胺素芽孢杆菌的分离及鉴定     

张晶  徐宏伟  曾国航  宋显明  艾东旭  李莲瑞 《新疆农业科学》2016,53(1):59

[目的]分离、纯化土壤中的细菌,通过鉴定得到米氏硫胺素芽孢杆菌.[方法]通过生化鉴定、提取细菌基因组并进行细菌16 s rDNA测序等方法鉴定.[结果]此细菌生化鉴定结果符合《常见细菌鉴定手册》中的关于米氏硫胺素芽孢杆菌的生化鉴定,将细菌的16 s rDNA测序结果在NCBI上进行比对,表明该细菌为米氏硫胺素芽孢杆菌.[结论]分离、纯化得到的细菌经测序对比后确定是米氏硫胺素芽孢杆菌.  相似文献   

新疆南疆绵羊牛无浆体病的流行病学调查     

桂成坤  林留霞  张晶  宋倩倩  石长青  王新疆  李莲瑞 《塔里木大学学报》2019,(1)

为了调查新疆南疆地区绵羊牛无浆体病的流行情况,试验从南疆喀什、和田、阿克苏和巴州四个地区21个县市采集绵羊血液样品共637份。以巢式PCR扩增绵羊血液样品中牛无浆体的16S rRNA特异性片段。PCR扩增片段为551 bp的样品为阳性样品,表示感染了牛无浆体。结果表明:新疆南疆绵羊牛无浆体的总体感染率为52. 9%,其中喀什、和田、阿克苏、巴州地区的感染率分别为55. 3%、53. 3%、51. 3%、43. 3%。说明新疆南疆绵羊牛无浆体的感染率较高,为绵羊牛无浆体病的诊断和防控提供流行病学资料。  相似文献   

高致病性蓝耳病毒与低致病性蓝耳病毒RT-PCR检测方法   总被引：1，自引：0，他引：1  

顾海洋  左文斌  贺艳艳  潘辉  刘书东  李莲瑞 《塔里木大学学报》2011,23(1):20-24

将高致病性蓝耳病和低致病性蓝耳病病毒接种于Marc145细胞培养并观察细胞病变情况,将有细胞病变的病毒进行连续传代培养。根据高致病性蓝耳病与低致病性蓝耳病在NSP2基因上有87 bp连续缺失,从NCBI上下载7对高致病性蓝耳病保守序列设计一对引物。通过RT-PCR方法进行检测证明实验室所保存的这两株毒株分别为高致病性蓝耳病和低致病性蓝耳病,并且建立了高致病性蓝耳病与低致病性蓝耳病的检测方法。  相似文献   

多浪羊IFN-γ基因克隆及核苷酸序列分析     

左文斌  潘辉  李莲瑞 《塔里木大学学报》2011,23(2):19-23

为了分析新疆多浪羊的IFN-γ基因,根据GenBank中NM_001009803的mRNA序列设计引物,以新疆多浪羊淋巴细胞的总RNA为模板,用RT-PCR扩增多浪羊IFN-γ基因序列。测序结果表明I,FN-γ基因序列包含了一个582 bp的开放阅读框,通过GenBank中的Blastn序列比较分析,多浪羊的IFN-γ基因与普通绵羊的同源性高达99.82%,为多浪羊IFN-γ的功能研究及多浪羊免疫应答基因的筛选奠定基础。  相似文献   

叶尔羌高原鳅血液生理生化指标的测定   总被引：1，自引：0，他引：1  

沙爱龙  曲良  陈子涛  李莲瑞 《水生态学杂志》2012,33(5):73-77

以雌、雄叶尔羌高原鳅[Triplophysa(Hedinichthys)yarkandensis]各26尾为研究对象,比较其血液生理生化指标的差异.结果显示,雌鳅血清中谷草转氨酶活性显著低于雄鳅(P＜0.05),碱性磷酸酶活性极显著低于雄鳅(P＜0.01),而尿酸、肌酐、钙含量显著高于雄鳅(P＜0.05),其它各血液指标雌雄鳅虽有所不同,但差异均不显著(P＞0.05).该研究为叶尔羌高原鳅的疾病防治、人工养殖及遗传育种提供了参考资料.  相似文献   

MTT法测定棉酚对多浪羊淋巴细胞生长的影响     

王娟娟  贾山岭  万新军  李莲瑞 《湖北农业科学》2013,52(5)

通过MTT法测定棉酚对多浪羊淋巴细胞生长的影响,确定棉酚对多浪羊淋巴细胞产生影响的最短作用时间和最低浓度,用于指导生产实践.从新疆多浪羊外周血分离淋巴细胞,将其加入10 mL的RPMI-1640中,均匀加入96孔细胞培养板中,于CO2培养箱中37℃培养12h后,分别以不同浓度(5、10、15、20、25、30、35 μmol/L)的棉酚进行作用,作用时间分别为1、2、3、4、5、6h,加入MTT培养4h,加入DMSO溶液终止反应,用酶联免疫检测仪于490 nm处检测各孔的吸光值.结果表明,随着棉酚作用浓度及作用时间的递增,多浪羊淋巴细胞活性在逐渐下降,说明棉酚对多浪羊的淋巴细胞活性有明显的抑制作用.  相似文献   

南疆某规模化猪场猪瘟病原与抗体的检测分析     

郝斌  李雪娇  黎双  李莲瑞 《现代畜牧兽医》2023,(10):59-62

研究旨在调查南疆某规模化猪场免疫猪群的猪瘟抗原与抗体水平,为制定适应当地生产条件的免疫程序提供参考。试验运用酶联免疫吸附试验(ELISA)对该场免疫猪群的480份血清样品进行抗体检测与分析,并采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对采集的24份猪瘟疑似病料进行抗原检测。结果显示,对随机采集的480份血清样品进行猪瘟抗体检测,其中449份为阳性样品,阳性率为93.5%;不同类别群体中以母猪的抗体阳性率最高,为97.2%;2～4胎母猪与5～6胎母猪的抗体阳性率为97.8%;22～28 d的阳性率最低,为76.9%;36～50 d的仔猪抗体阳性率最高,为92.3%。对采集的24份猪瘟疑似病料进行抗原检测,显示均为阴性。研究表明,该规模化猪场的猪瘟免疫情况良好,未出现感染情况。  相似文献   

阿克苏地区某规模化猪场猪流行性腹泻的诊断和疫苗效果评价     

邢潇月  刘洋  李虎  胡亚辉  刘祥杰  张家浩  李莲瑞 《塔里木大学学报》2023,(2):60-66

2021年1月阿克苏地区某规模化猪场腹泻病爆发，采用猪腹泻胶体金试剂盒检测发病仔猪腹泻物，结果显示猪流行性腹泻病毒（PEDV)阳性率为100%。为探究其原因，于2021年1—12月采集该猪场6 567份猪肛拭子，通过实时荧光定量法检测不同月份PEDV的感染情况，为防控猪流行性腹泻（PED），选用TGE-PED二联弱毒苗和灭活苗对妊娠85 d和105 d母猪进行联合免疫，应用间接ELISA法监测妊娠母猪的IgG、IgA抗体水平，并对该场PEDV疫苗免疫效果进行评价。结果显示PEDV的检出率在1月、2月、11月、12月较高，其余月份较低；妊娠母猪PEDV的抗体IgG和IgA抗体阳性率在产前15 d和分娩当天均达到了100%，离散度小于40%，免疫效果较好；产前1 d各批次PEDV的IgG抗体阳性率仍达到100%，但IgA抗体阳性率有不同程度下降，且离散度有不同程度升高，推测母猪可能存在排毒情况。本研究为该猪场PED防控提供了理论依据。  相似文献