鸡白细胞介素4基因的克隆及其原核表达   总被引：1，自引：1，他引：0  

戴华  郑佳玉  陈俊华  孙林  潘志明  焦新安 《中国预防兽医学报》2008,30(6):473-477

应用RT—PCR技术,从被诱导的鸡脾脏淋巴细胞中扩增鸡白细胞介素-4（ChIL-4）基因cDNA,经克隆筛选和测序后,构建出重组质粒pGEX-6P—ChIL-4和pET—ChIL-4,分别转化相应的受体菌,经IPTG诱导和SDS—PAGE分析,结果表明ChIL-4基因在上述载体中均获得表达,融合蛋白大小分别为38ku和18ku．Western blot结果也显示,在相对分子质量38ku和18ku位置有特异性条带。这为重组ChIL-4的规模化生产、疫苗佐剂的研制及其单克隆抗体的制备奠定了基础。  相似文献   

应用噬菌体肽库技术定位沙门氏菌鞭毛蛋白上属特异性共同抗原表位     

刘文博  焦新安  高崧  张扬  潘志明  王芳  张如宽  刘秀梵 《畜牧兽医学报》2003,34(2):183-187

用生物素标记的沙门氏菌属特异性单克隆抗体de7作为分子探针，应用亲和筛选法从噬菌体肽库中筛选该单抗所针对的表位克隆，最终进行定位。经三轮筛选后，用斑点印迹法检测，得到良好的富集效果。通过免疫筛选法从第三轮筛选物中桃取了24个阳性克隆，再以斑点印迹、竞争ELISA进一步鉴定阳性克隆，证实已获得了沙门氏菌鞭毛属特异性共同抗原的模拟表位。测得的序列为SRRSFTTE，将其与沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列相比较，同源性较小，但在不同血清型沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列的Ⅰ区高度保守序列中，发现61-65位氨基酸的RSXXT序列与所得的线性表位有相同的排列，而大肠杆菌鞭毛蛋白氨基酸在此段的序列为RAXXT，且这种序列排列的几率为1/20^5，因此推断该单抗所针对的表位在该区段上。此外，以阳性克隆免疫Balb/c小鼠，并制备高免血清进行间接荧光检测和竞争ELISA鉴定，结果表明其具有优良的免疫原性和高度的特异性，这亦为模拟表位疫苗的研究提供了新思路。  相似文献   

沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原模拟表位的免疫生物学特性     

刘文博  焦新安  张扬  王芳  潘志明  高崧  张如宽  刘秀梵 《中国兽医学报》2002,22(1):32-33

为了探究沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原模拟表位阳性克隆生物学特性。用从噬菌体线性肽库及限制性库中筛选出的阳性克隆1和62分别免疫BALB／c小鼠，其高免血清对单抗de7的竞争－ELISA郊价达10^6以上，而其他血清则无抑制作用。在间接免疫荧光试验中，免疫血清均能与11株不同血清型的沙门氏菌反应，而不与大肠杆菌反应。以上结果表明，筛选获得的沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原模拟表位，不仅很好地模拟了天然表位，而且具有很好的抗原性。这为该表位分子基础及模拟表位疫苗的研究奠定了基础。  相似文献   

我国禽病的防治战略   总被引：1，自引：0，他引：1  

焦新安  潘志明  黄金林  刘秀梵 《水禽世界》2004,(11):3-6

我国养禽业连续20多年持续稳步增长,取得举世瞩目的成就,成为世界养禽大国。据农业部统计,2000年我国肉类总产量达6270万吨,人均占有量为52kg。另据联合国粮农组织(FAO)统计资料,2000年我国禽蛋的产量达到2216.234万吨,占世界总产量的41.9%,其中鸡蛋1886万吨,占总产量的85%,人均占有量达17.7kg,总产量及人均占有量均居世界第一位。改革开放以来,禽蛋平均年增长率达到13.5%。然而,一直以来,禽病是困扰我国养禽业的关键问题之一。目前我国禽病约有80余种,其中传染病占75%左右,造成的经济损失十分巨大,已成为制约我国养禽业发展的瓶颈。我国…  相似文献   

作为疫苗和疫苗载体的胞内细菌   总被引：2，自引：1，他引：1  

潘志明  张小荣  焦新安 《动物医学进展》2002,23(3):107-110

本文综述了结核分支杆菌、单核细胞增生性李斯特菌和沙门氏菌等胞内细菌作为疫苗物质和载体。目前，人们正在考虑预防这些病原体的新的免疫预防策略。策略之一就是使用胞内菌的减毒活菌疫苗以及减毒细菌疫苗载体。这一策略包括两方面的工作，即减毒疫苗菌株的改良和重新构建强毒菌株的减毒突变体。另一种策略是应用亚单位疫苗免疫，如核酸疫苗或病原体的蛋白抗原。  相似文献   

抗虫杂交棉新品种南抗3号在浙江试种表现     

王仁怀  吴伟  潘志明  吴其褒 《江西棉花》2004,26(1):37-38

抗虫杂交棉新组合南抗3号是南京农业大学棉花研究所育成的转Bt基因抗虫杂交棉。2001年已通过江苏省品种审定，2000年引入浙江省试种，2001年和2002年参加浙江省棉花品种区域试验，2003年参加浙江省棉花生产试验，综合性状表现较好，现已通过浙江省棉花品种审定前的现场考察，预计2004年通过浙江省品种  相似文献   

食源性人兽共患细菌病及其防控   总被引：2，自引：0，他引：2  

潘志明  黄金林  焦新安 《兽医导刊》2009,(6):4-7

人兽共患病是指可使人和动物（包括野生动物）都患病的疾病的总称，其中包括将疾病由动物及其产品传染给人和人将疾病传染给动物。近30年间，全球陆续发现了30多种新出现传染病和一批再度出现的老传染病，严重威胁着人类的健康，其中绝大部分是人兽共患病。目前，已证实的人兽共患病有200多种，其中我国大约有130多种。人兽共患病不仅造成畜牧业直接的巨大经济损失（每年数百亿元），  相似文献   

携带新城疫病毒F基因DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性   总被引：2，自引：0，他引：2  

潘志明  焦新安  唐丽华  黄金林  张辉  张晓明  张小荣  刘秀梵 《中国兽医学报》2007,27(1):17-21

根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计1对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源NDV分离株JS5F基因(约1700bp),测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F。pVAX1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接免疫荧光试验检测出F基因在COS-7细胞中的表达产物。将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)。重组菌以109CFU/只的剂量2次免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对NDVF蛋白的血清抗体和小肠粘膜抗体应答,SL7207(pVAX1-F)免疫组抗体水平显著高于SL7207(pVAX1)组(P<0.05)。将SL7207(pVAX1-F)以109CFU/只剂量口服免疫1日龄雏鸡,免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)免疫组对鸡具有良好的保护率(77.27%),与空白对照组和SL7207(pVAX1)空载体组之间存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能成功释放所携带的质粒,并能刺激机体产生免疫应答,可对NDV强毒攻击提供良好的免疫保护作用,提示该疫苗候选株对新城疫的控制有重要应用前景。  相似文献   

从噬菌体随机十二肽库中筛选新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶模拟表位     

孙林  焦新安  刘文博  潘志明  黄金林  彭大新  刘秀梵 《中国预防兽医学报》2004,26(6):428-431

以生物素标记的抗新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)的单抗M22为分子探针,从噬菌体随机12肽库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位.经过三轮亲和筛选,得到了四个能与单抗M22反应的阳性噬菌体单克隆,分别为CLONE 11、17、18、20.竞争ELISA试验表明,CLONE 20与M22的结合能被新城疫弱毒株La Sota特异性抑制,抑制率达67.3%.经测序,获得CLONE 20的插入序列为SWFHHHQARAPM,同源性分析认为WF和QAR在HN的抗原性中起重要作用.动物试验结果表明,CLONE 20能诱导SPF鸡产生一定水平的具有血凝抑制活性的特异抗体.以上结果显示SWFHHHQARAPM是具有免疫原性的HN抗原模拟表位.  相似文献   

早籼稻金早09的选育、特征特性及栽培技术要点   总被引：1，自引：0，他引：1  

王孔俭  潘志明  鲍正发 《中国稻米》2010,16(3):64-65

金早09系金华市农业科学研究院选育的中熟早籼新品种,其亲本为金早50/金早47,2008年10月通过浙江省农作物品种审定委员会审定。该品种茎秆粗壮,穗大粒多,结实率、千粒重较高,增产潜力大,抗稻瘟病,适宜浙江金衢稻区作直播早稻栽培。  相似文献