加拿大一枝黄花重发原因及其防治上存在的问题   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵秋祥  金中时  王永山 《现代农业科技》2011,(1):208+211

介绍了加拿大一枝黄花的重发原因,分析了其防治上存在的问题,以期为加拿大一枝黄花的防治提供参考。  相似文献   

关于盐城市大丰区推广应用杂交水稻制种全程机械化技术的思考     

卢俊  朱孔志  丁珊  金鑫  杨力  王永山 《上海农业科技》2023,(4):39-40

近年来,为适应现代种业发展新形势,江苏省盐城市大丰区进行了杂交水稻制种方式的转型升级,示范推广了杂交水稻制种全程机械化技术,该技术具有省工、节本、增效等优点。为进一步促进杂交水稻制种全程机械化技术的推广应用,对该技术的技术集成及其在大丰区的示范应用情况和应用效果进行了总结与评价,并对该技术的应用前景进行了展望。  相似文献   

大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制     

夏兴霞  王永山  孟祥升  朱国强  张雪寒  何孔旺 《中国兽医寄生虫病》2010,18(4):47-53

用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜（NC）上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1~5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。  相似文献   

犬PD-1单克隆抗体的筛选与鉴定     

王卓  徐司雨  夏兴霞  李志敏  毕振威  钱晶  莫菲  诸玉梅  王永山  孙树民  谭业平 《中国兽药杂志》2024,58(5):10-16

为筛选犬程序性死亡受体1(cPD-1)单克隆抗体,以原核表达并纯化复性的cPD-1胞外区蛋白为靶抗原免疫BALB/c小鼠,应用单克隆抗体杂交瘤细胞技术和间接ELISA方法,经3轮轮筛选和克隆化,获得1株能稳定分泌抗cPD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F9。间接ELISA检测显示1F9杂交瘤细胞株连续传代培养能稳定分泌单克隆抗体,效价达到1∶2048,亚型鉴定重链为IgG1,轻链为κ;以HEK293细胞表达cPD-1胞外区蛋白为检测抗原,Western-blot和间接免疫荧光试验进行鉴定,结果显示1F9单克隆抗体能特异性结合cPD-1胞外区蛋白。本研究通过小鼠杂交瘤技术成功筛选到1株鼠源cPD-1单克隆抗体。  相似文献   

不同传染性法氏囊病病毒分离株VP2基因部分核酸序列及其编码蛋白的比较   总被引：3，自引：1，他引：2  

王永山  罗函禄等 《中国兽医学报》1999,19(5):429-433

根据已报告的传染性法氏囊病病毒（ Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ） ｃ Ｄ Ｎ Ａ 序列,在病毒 Ｖ Ｐ２ 区域,设计 １ 对引物,并在 ２ 引物上分别加 Ｐｓｔ Ⅰ和 Ｅｃｏ Ｒ Ｉ酶切位点。对 ２ 个 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 分离株 Ｊ Ｓ３ 和 Ｊ Ｓ４,用异硫氰酸胍酚氯仿抽提一步法提取病毒 Ｒ Ｎ Ａ,然后进行逆转录和 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增,将扩增片段经酶切纯化后克隆于 ｐ Ｕ Ｃ１８ 质粒载体中,以双脱氧链末端终止法测定 ｃ Ｄ Ｎ Ａ 序列。将测定的分离株与标准对照株（ Ｓ１） Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ Ｖ Ｐ２ 基因片段的核苷酸序列进行计算机分析比较, Ｊ Ｓ３ 与 Ｓ１ 的同源性为 ９７％ , Ｊ Ｓ４ 与 Ｓ１ 的同源性为 ９７％ , Ｊ Ｓ３ 与 Ｊ Ｓ４ 的同源性为 ９９％ 。推导编码蛋白氨基酸序列, Ｊ Ｓ３ 和 Ｓ１ 的同源性为 ９７％ , Ｊ Ｓ４ 与 Ｓ１ 的同源性为 ９６％ , Ｊ Ｓ３ 和 Ｊ Ｓ４ 的同源性为 ９８％ 。这表明在我国流行的 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 毒株与标准毒株相比不仅在免疫学反应上有差异,而且在病毒核酸序列上有变异,这种变异是造成疫苗免疫失败或免疫逃避的分子基础。  相似文献   

传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫功能研究     

马金荣  欧阳伟  王永山  吴晓悠  朱向东  张海彬  范红结  王忠灿  唐雨德 《中国预防兽医学报》2012,34(6):471-475

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本研究根据已发表的鸡源补体C3d序列,设计并合成在5’端添加编码连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2基因融合的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d。用脂质体法转染BHK21细胞,48 h后,westernblot分析表明,表达的重组蛋白为162 ku;间接免疫荧光试验检测转染细胞中具有特异性荧光。用pcDNA-VP2-3C3d与前期构建的pcDNA-VP2分别免疫2周龄SPF鸡,二免14 d后,间接ELISA法检测IBDV抗体效价,pcDNA-VP2-3C3d组抗体水平显著高于pcDNA-VP2组;MTT法检测鸡脾淋巴细胞增殖活性,pcDNA-VP2-3C3d组免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性显著高于pcDNA-VP2组(p<0.05)。本研究表明C3d可以增强VP2基因免疫诱导的IBDV特异性体液和细胞免疫应答。  相似文献   

不同食料对甜菜夜蛾生物学特性的影响   总被引：6，自引：1，他引：5  

赵田芬  邓树梓  王永山  陈华  王凤良 《安徽农业科学》2005,33(5):791-791,814

观察结果表明,以青椒叶为食料,幼虫历期最长,其次为花生叶;取食常规棉与抗虫棉对幼虫发育历期影响不明显;对蛹历期的影响与幼虫历期趋势一致。取食常规棉幼虫的蛹最重;取食不同食料对甜菜夜蛾产卵量没有明显影响。  相似文献   

麦套玉米田玉米粗缩病综合防治技术     

王永山  王风良  梁文斌 《植物医生》2011,(5):11-12

大丰市地处苏北沿海中部．常年种植玉米2万hm2以上．其中春玉米1.3万hm2．以露地移栽为主。2008年和2010年玉米粗缩病在春玉米上暴发．造成减产40％～60％．许多农民误认为是种子质量问题．后经专家鉴定为玉米粗缩病所致。该病已成为大丰市玉米生产上威胁最大的毁灭性病毒性病害,一旦发生,造成严重减产。  相似文献   

传染性法氏囊病病毒检测系统的建立   总被引：4，自引：0，他引：4  

王忠灿  王永山  唐雨德  谭维国  施正良  欧阳伟 《中国兽医学报》2008,28(9)

为了建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)检测系统,本试验在同一个试验技术平台上对9种IBDV检测方法进行了比较分析.IBDV野毒株盲传4～5代可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞,死亡胚体水肿、出血,病变细胞圆缩、脱落.4个血清Ⅰ型1BDV毒株,用交叉中和试验可进一步分为3个血清亚型.用RT-PCR/SSCP技术分析4个毒株,扩增产物的电泳迁移率有差异.AGP、间接ELISA、夹心抑制ELISA以及中和试验等4种方法同时检测不同来源血清样品中的IBDV抗体,其他3种方法比AGP具有更高的敏感性,敏感度相差104倍.用AGP检测法氏囊组织样品,抗原效价可达到1:10,而细胞培养物和病鸡粪便则没有出现沉淀线;3种样品用夹心ELISA、RT-PCR、cDNA探针斑点杂交、RT-PCR/SSCP检测以及病毒分离等5种方法检测,均为阳性.  相似文献   

1％多抗霉素水剂防治黄瓜自粉病田间药效试验     

王永山  陈华  丁世峰 《上海蔬菜》2013,(2):54-54

多抗霉素（polyoxin）是金色链霉菌所产生的代谢产物,属于广谱性抗生素类杀菌剂,具有较好的内吸传导作用,其作用机理是干扰病菌细胞壁几丁质的生物合成,使菌体细胞壁不能进行生物合成导致病菌死亡。为探明该杀菌剂对黄瓜白粉病的防治效果,2012年我们开展了1％多抗霉素水剂防治黄瓜白粉病田间药效试验,取得了非常理想的试验结果,现总结如下。  相似文献