精液质量对猪胚胎体外生产的影响研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

葛立军  卢庆  高俊锋  曹爱巧  郑筱峰  芮荣 《上海农业学报》2009,25(3):6-9

以猪鲜精、冻精进行体外受精试验.结果表明:用劣质鲜精(活力≤0.5、畸形率>30%)进行体外受精后,所获卵裂率与优质鲜精组(活力>0.8、畸形率<15%)差异不显著(51.0%对53.6%),但16-细胞胚发育率较优质鲜精组明显降低(28.9%对47.4%).用不同精卵比(A组12 000∶1、B组6 000∶1和C组3 000∶1)的冻精进行体外受精发现, A组卵裂率(37.5%)和16-细胞胚发育率(34.4%)均明显低于B、C组,后2组卵裂率和16-细胞胚发育率无明显差异(54.3%对54.2%,48.5%对45.7%).以活力较高(>0.5)的冻精进行体外受精后,所获卵裂率和16-细胞胚发育率与鲜精组无明显差异(54.3%对51.1%,48.2%对45.4%);而Ⅱ组(冻精活力≤0.4)的体外受精卵裂率虽与Ⅰ组(冻精活力>0.5)和对照组无显著差异,但16-细胞胚发育率仅为37.0%,明显低于Ⅰ组的48.2%和对照组的45.4%.试验结果表明:精液质量会影响体外受精胚胎的后续发育能力.  相似文献   

猪体细胞克隆胚胎体外发育过程中的凋亡规律     

剧世强  郭慧利  王利勤  林鹏飞  卢庆  芮荣 《畜牧兽医学报》2010,41(6)

本试验旨在研究比较猪体细胞克隆胚胎体外发育与凋亡变化规律,探讨其体外发育潜能与细胞凋亡间的关系。将体外成熟培养获得的猪MⅡ期卵母细胞随机分为2组,分别进行体细胞核移植(SNCT)与体外受精(IVF)处理,采用彗星试验(Comet assay)和Real-time RT-PCR技术对体外发育过程中各时期胚胎的细胞凋亡事件及抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达水平进行研究。结果表明,两组在卵裂率上无显著差异(77.6%vs 80.3%,P0.05),在囊胚发育率上,SCNT组胚胎明显低于IVF组,但无统计学差异(18.9%vs 24.5%,P0.05);随着胚胎发育,SCNT与IVF组胚胎的凋亡率均呈现不断增加的趋势,Bcl-2 mRNA表达量则逐渐下降;到16-细胞以后,SCNT组胚胎的凋亡率均显著高于IVF组,同时Bcl-2 mRNA表达量均显著低于IVF组(P0.05)。本试验结果表明,猪克隆胚胎生产效率低下可能与胚胎发育过程中的细胞凋亡有关。  相似文献   

山羊胚胎简易冷冻试验   总被引：3，自引：0，他引：3  

芮荣  王建辰 《畜牧兽医学报》1990,21(2):127-131

用RPE冷冻器冷冻20枚山羊桑椹胚和囊胚。冷冻液为1M甘油杜氏磷酸盐缓冲液(PBS)。胚胎装于0.25ml塑料细管内,0℃时置入冷冻器。以1℃/分降温,-6.5～-7℃诱发结晶,再以0.5℃/分(0.3～0.8℃/分)降温至-30℃,然后投入液氮保存5～12天。35℃水浴解冻。20枚胚胎冻后形态正常率为65％(13/20)。将13枝形态基本正常的胚胎移植给5只受体羊,结果4只受体羊妊娠,产羔7只,冻胚存活率为35％(7/20)。除1只冻胚羔产下后90分钟死亡外,另6只冻胚羔生长发育正常。  相似文献   

新促孕液及其加味方治疗子宫内膜炎的试验研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

孔祥峰  胡元亮  黄小燕  郭振环  芮荣  何子双  孙峻岭  杨柳青 《畜牧兽医学报》2006,37(4):379-383

以新促孕液为基础方，分别添加清热、活血、补气中药组成3个加味方，通过子宫灌注治疗家兔实验性子宫内膜炎，观察用药前后临床症状、子宫形态、子宫内膜显微和超微结构等临床病理学变化，比较新促孕液及其3个加味方的疗效。结果表明：新促孕液的疗效显著，用药后患兔的临床症状明显减轻，子宫周长和子宫指数明显降低，子宫内膜的炎性变化明显消退、损伤恢复较快；方2也有较好的疗效，可以作为新促孕液的改进方。  相似文献   

新促孕液及其加味方和组分药对家兔离体子宫运动的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

孔祥峰  胡元亮  孙峻岭  黄小燕  郭振环  芮荣  杨柳青 《中国畜牧兽医》2006,33(3):51-53

本研究利用多道生理信号采集处理系统测定了新促孕液(NFPL)和3个加味方及其组分药对家兔离体子宫运动的影响。结果表明,益母草、硼砂、丹参和黄柏均能显著增加子宫收缩波幅,元明粉和黄芩显著降低其波幅;元明粉、红花和黄芩均能显著增加子宫收缩频率,益母草、丹参、淫羊藿和硼砂均能显著降低其频率,并表现一定的量效关系。NFPL和方1均能显著增加子宫收缩波幅、降低其频率;方2在中、高浓度时能显著增加子宫收缩波幅,低浓度时能显著增加其频率;方3在低浓度时能显著降低子宫收缩波幅、中浓度时显著降低其频率。这些结果可为进一步改进NFPL组方的科学性和提高其防治效果提供理论依据。  相似文献   

表达绿色荧光蛋白的猪胚胎生殖细胞分离     

芮荣  邱妍  胡元亮  范必勤 《南京农业大学学报》2004,27(4):89-92

以质粒DNA为增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的载体，对处于快速增殖期的8株猪胚胎生殖(EG)细胞(4—9代)进行转基因试验。用1μg DNA和2μL LipofecTamine 2000转染EG细胞后，共获得4株转染EGFP基因的EG细胞系(EG—EGFP)，可发出强绿色荧光；EG—EGFP细胞连续培养2周以上可分化为多种细胞类型。显微注射EG—EGFP细胞至卵裂期胚胎、桑椹胚卵周隙内或囊胚腔中，共注射135枚胚胎，其中112枚存活并发育至囊胚(83．0％)；86枚嵌合体胚培养后含有荧光细胞，其中57枚囊胚在内细胞团(ICM)上发现有EG—EGFP细胞。  相似文献   

猪卵母细胞、胚胎玻璃化冷冻初步研究     

张德福  刘东  王邵凯  王少兵  芮荣  汤琳琳 《中国畜禽种业》2005,(11)

本试验研究了不同冷冻承载工具,玻璃化溶液处理时间和不同发育阶段对猪卵母细胞超低温冷冻保存的影响。(1)比较凝胶上样管(gel-loadingtip;GLT)、开放式拉长麦管(openpulledstraw;OPS)、玻璃微细管(glassmicropipette;GMP)保存法对卵母细胞冷冻效果的影响。(2)比较在EFS40中处理30s,1min,2min对卵母细胞冷冻效果的影响。(3)比较MII期和GV期的卵母细胞冷冻效果。结果表明,(1)GLT法体外存活率为52.8%略优于OPS法(50.5%)和GMP法(51.1%)。(2)解冻后30s组和1min组的体外存活率分别为48.82%、43.9%,显著优于2min组的18.8%(p<0.05)。(3)解冻后MII期体外存活率为53.6%,显著优于GV期的22.0%(p<0.05)。(4)冷冻对猪卵母细胞的发育潜能影响较大,用新鲜精液进行体外受精,仅有4.9%的受精卵分裂,极显著低于对照组的49.5%(P<0.01);并且发育至4细胞期的比例为1.7%,未能发育至8细胞期。胚胎在25%VS1冷冻液中平衡20分钟后将胚胎在65%VS1冷冻液中平衡20秒,然后将胚胎再放入到100%VS1冷冻液中在30秒的时间内装入GLT管投入到液氮中进行保存。扩张囊胚的冷冻效果要明显优于孵化囊胚。  相似文献   

用RPE冷冻器冷冻小鼠胚胎试验     

芮荣  王建辰  钱菊汾  王光亚 《四川农业大学学报》1988,(4)

用RPE冷冻器冷冻42枚桑椹胚和13枚囊胚。冷冻液为1M甘油杜氏磷酸盐缓冲液,胚胎采用0.25ml细管包装。0℃时置入冷冻器。以1℃/分降温,-6.5～-7℃诱发结晶,再以0.5℃/分(0.3～0.8℃/分)降温至-30℃,然后投入液氮。35℃水浴解冻。桑椹胚与囊胚的冻后存活率分别为71.4％(30/42)和53.8％(7/13),差异不显著(P>0.05)。胚胎冻后发育步调很不一致。  相似文献   

微囊藻毒素-LR对猪体外成熟卵母细胞氧化损伤与凋亡的影响     

石凤垚  李文慧  赵红宇  王阳  庄瑞雪  芮荣  剧世强 《畜牧兽医学报》2021,52(1):98-106

旨在探讨微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)对体外成熟猪卵母细胞的毒性损伤及其潜在损伤机制.本研究从屠宰场所获得的猪卵巢中收集GV期卵母细胞,将其随机分为4组,在卵母细胞体外成熟培养液中分别添加0、20、40和60μg? mL-1 MC-LR,研究MC-LR对卵母细胞第一极体(Pbl)排出、纺锤...  相似文献   

猪瘟病毒中和性单克隆抗体制备及阻断ELISA方法建立     

杨利  张浩明  李丁  郑其升  芮荣 《畜牧与兽医》2022,(5):68-74

采用毕赤酵母表达的猪瘟病毒(CSFV)重组E2蛋白免疫BALB/c小鼠，经间接免疫荧光(IFA)筛选，获得了17株特异性单抗。经病毒中和试验(VNT)验证，上述单抗均具有CSFV中和活性，其中单克隆抗体3H9的病毒中和效价最高，大于1∶10 240。采用HRP标记的CSFV单抗3H9为阻断抗体，配合酵母表达的CSFV E2蛋白作为包被抗原，建立了一种用于检测猪血清中CSFV中和抗体的阻断ELISA方法。该方法优化后的抗原包被浓度为0.5μg/mL,阻断抗体稀释度为1∶8 000。通过对100份阴性猪血清的检测，确定该方法的阻断率cut-off值为30%。该方法敏感性高，对中和抗体效价低至1∶16的血清检测仍呈阳性；特异性强，仅与CSFV抗体阳性猪血清呈阳性反应，与其他猪病病毒及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体阳性猪血清均呈阴性反应；良好的可重复性，批内、批间变异系数分别为0.90%～3.21%、1.89%～6.57%,均小于10%。对188份现有猪血清检测结果显示，该方法与病毒中和试验和IDEXX猪瘟病毒抗体检测试剂盒的符合率分别为96.3%、94.7%。用该方法对南京市浦口区某养殖场...  相似文献