胡萝卜软腐欧氏杆菌菌落变异型菌株在氯化三苯基四氮唑平板上的变色机理     

赵立平  王金生  方中达 《植物病理学报》1989,(1)

在含0.005%氯化三苯基四氮唑(TTC)的酪蛋白氨基酸—蛋白胨—葡萄糖(CPG)平板上,胡萝卜软腐欧氏杆菌苗落变异型菌株(简称EccM)生长差、菌落既小且白、而普通野生型菌株(Eccw)则为红而又大的菌落。EccM的苗落特征与下列因素有关:①当以葡萄糖、果糖、蔗糖或其它相关的糖类为碳源时,EccM菌株产生的酸特别多,若培养基中加入碳酸钙、菌落周围可形成酸溶的透明圈;②CPG培养基的缓冲力很弱,只有KingsB的1/8—1/10,EccM生长后、培养基pH很快降到5.5以下,这是生长的pH下限值;③在pH<6时,菌体脱氢酶活性受到强烈抑制,还原TTC的能力明显减弱。上述因素共同作用就使EccM在TTC平板上生长差,颜色白,与EccW很容易区别开。  相似文献   

戊型肝炎病毒分子生物学及疫苗研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵宇军  刘丽  李维达  赵立平  于敏  相文华 《畜牧兽医科技信息》2004,20(1):12-15

戊型肝炎是由戊型肝炎病毒感染会引起一种急性、自限性疾病。病毒采取粪-口途径进行传播。在发展中国家是主要的病毒性肝炎的病原体。与其他病毒性肝炎相比戊型肝炎的奇怪特征是感染的怀孕妇女的病死率很高。由于缺乏体外可行的繁育系统,有些地方分离的戊型肝炎病毒在灵长类人猿中保存。其后病毒的基因组被克隆出来,其核酸序列也已经测出。戊型肝炎病毒现在临时归入类戊型肝炎病毒类家族。病毒核酸基因组:正链RNA,7.5kb大小。编码至少三种蛋白质,ORF1编码病毒的非结构多聚蛋白,这些蛋白具有与其他正链RNA病毒的复制酶和加工酶同源的活性…  相似文献   

土壤微生物分子生态学研究中总DNA的提取   总被引：35，自引：0，他引：35  

赵勇  周志华  李武  刘彬彬  潘迎捷  赵立平 《农业环境科学学报》2005,24(5):854-860

建立了一种土壤DNA提取方法。根据DNA产量和纯度2个评价指标,从3种手提土壤DNA方法中优选出方法B为手提DNA方法（Lab method）,它包括样品预处理,细胞裂解,粗DNA纯化,其中细胞裂解组合了玻璃珠击打．SDS裂解,溶菌酶裂解。进一步应用PCR-限制性片段长度多性（Restriction fragmentlength polymorphism,RFLP）技术及PCR-温度梯度凝胶电泳（Temperaturegradientgelelectrophoresis,TGGE）技术．结合DNA产量、纯度、片段大小以及所反映的微生物群落结构特性等指标评价了手提方法（Labmethod）得到的总DNA质量,并将这些结果与2种应用较广的商业试剂盒（Mo Bio UhraClean Soil DNA Kit和Bio 101 FastDNA SPIN Kit（For Soil1）所得DNA的各种指标进行了比较。结果表明,手提方法（Labmethod）的粗DNA产量低于Bio 101 Kit的,但高于Mo Bio Kit的。这些方法所得DNA的长度都在21kb左右,Labmethod提取的DNA没有严重被剪切现象,而2种试剂盒提取的DNA都有不同程度的剪切。手提方法得到的DNA经纯化后,应用细菌及真菌特异引物进行PCR扩增,均能获得目的片段,表明该方法能从土壤中同时有效提取细菌和真菌总基因组DNA。并且,手提方法所得DNA的细菌16SrDNA和真菌18SrDNA的PCR-RFLP图谱与两种商业试剂盒的图谱基本相似,但3种方法提取的DNA在细菌16S rDNAV3区和真菌28SrDNA片段的PCR-TGGE图谱上都存在一定差异．主要表现在一些弱势条带的有无或强弱上。这说明手提方法提取的总DNA与2种商业试剂盒一样,在一定程度上能反映微生物群落的多样性和组成。总之,手提DNA方法（Lab method）所用试剂普通,价格便宜,能在4h以内获得够质够量的土壤DNA用于微生物分子生态学研究,较适合于广大普通实验室进行土壤DNA提取工作。  相似文献   

SPF仔猪肠道菌群结构的分子分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

丁德忠  庞小燕  华修国  崔立  赵立平 《上海交通大学学报(农业科学版)》2005,23(3):256-260

目的：对SPF（Specific Pathogen Free）仔猪断奶前后的肠道菌群组成进行动态监测,并以普通饲养仔猪（自然分娩）为对照作相关分子微生物生态学分析.方法：利用剖腹取胎的方式将仔猪从母体子宫中取出放于屏障系统中饲养,于7日龄时转移至消毒的开放式环境中,14日龄断奶,分别于10日龄、16日龄和22日龄以及32日龄采集仔猪新鲜粪便样品.提取粪便样品中细菌总DNA,获得其ERIC-PCR指纹图谱,再将其中一个样品的ERIC-PCR产物以地高辛标记为混合探针通过杂交对指纹图谱上DNA条带序列的异同进一步比较.结果：SPF仔猪和普通仔猪在断奶后肠道菌群的组成发生较大变化,而且SPF仔猪的肠道菌群和普通仔猪有显著差异.  相似文献   

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究 Ⅲ.马传贫弱毒LP继代细胞冻干疫苗保存期及对马免疫期试验     

董君平  王振漪  彭达春  沈荣显  赵立平  吕晓玲 《中国预防兽医学报》1992,(2)

马传贫弱毒LP继代细胞疫苗冻干后置于-40℃及冷库保存18个月,其毒价为10~(-7)/ml,与冻干前湿苗的毒价一样。用冻干疫苗免疫的马其免疫期可达25个月。  相似文献   

我培育健壮越冬蜂的做法     

赵立平 《中国蜂业》2002,53(5):13-13

一年一度的越冬蜂繁殖期间 ,大家都注重怎样让蜂王多产卵 ,多培育越冬蜂 ,以使来年蜂群强壮。但我们往往重视培育越冬蜂 ,却忽视了喂越冬饲料的时间问题 ,从而或多或少地影响了越冬蜂繁殖的效果。适龄越冬蜂应该是指那些没饲喂过幼虫、没有参加采集的蜜蜂。前几年 ,我 1 0月份才开始喂越冬饲料 ,而我地区 8月 2 0日至 9月 1 5日前后是繁殖越冬蜂的最佳时期 ,因此有部分越冬蜂参加过饲喂幼虫 ,致使越冬蜂因饲喂幼虫和搬运饲料提前衰老死亡 ,造成群势弱 ,直到来年刺槐流蜜期也难复壮 ,严重影响槐花蜜的产量。近几年 ,我一改过去的做法 ,采取在…  相似文献   

马传染性贫血病毒疫苗株EIAV_(FDDV)穿膜蛋白GP45的截短突变     

马建  史楠  吕晓玲  赵立平  姜成刚  林跃智  孔宪刚  沈荣显  周建华 《畜牧兽医学报》2010,41(3)

为研究中国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱过程中基因组的进化特征,作者对EIAVFDDV前病毒的囊膜基因env进行了分析。使用PCR方法体外扩增EIAVFDDV前病毒DNA的env,并随机挑取PCR的阳性克隆子进行测序和序列比对分析。结果表明,随机挑取的PCR阳性克隆中,29/30的克隆子在第2 128-2 130位核苷酸处存在TGG→TGA(翻译中止密码)的突变。该基因对应的EIAV穿膜蛋白gp45的氨基酸数在突变株中较未截短株中减少154,变成259个aa。对EIAVFDDV进行Western blot分析时发现,EIAVDLV45 ku的gp45条带被约35 ku的条带取代。由此推测,EIAVFDDV疫苗株绝大多数病毒颗粒的gp45是截短型。对该代次疫苗株免疫马匹第15和40天体内EIAV前病毒DNA和基因组RNA的序列进行分析,结果表明该截短毒株具有在体内和体外进行复制的能力。由于已有研究表明细胞嗜性改变与gp45的截短有关,因此,推断EIAVFDDV的gp45的截短是其适应在体外培养的驴胎皮肤细胞上复制传代的结果。综上所述,本研究发现EIAVFDDV的gp45存在高比例截短突变,证明该截短突变毒株具有在体内和体外进行复制的能力。但该截短突变是否可通过改变EIAVFDDV在免疫马体内的细胞嗜性,进而影响其毒力和免疫原性,还有待进一步验证。  相似文献   

猪戊型肝炎病毒基因ORF2片段克隆及其原核表达     

李丹丹  张馨心  于婧  赵立平  相文华 《中国兽医杂志》2009,45(3)

猪戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)是一种无包膜的正义链RNA病毒,直径为27～32 nm,表面粗糙,呈不规则球型.由于HEV组织培养困难,难以研制减毒或灭活疫苗,因此,利用基因工程技术制备重组抗原,研制多肽疫苗成为戊型肝炎研究的热点[4].  相似文献   

马传染性贫血病毒疫苗株S2基因不同变异位点逆向突变感染性克隆的体外复制特性分析     

高旭  姜成刚  高华  林跃智  赵立平  相文华  周建华 《中国预防兽医学报》2009,31(12)

为研究EIAV弱毒疫苗株(EIAV_(FCCV15))S2基因发生的稳定性突变对疫苗株特性的作用以及S2基因的功能,以EIAVFDDVl5感染性克隆质粒pFDDV3-8为模板,根据疫苗研制过程中S2基因发生的4个主要稳定性变异位点,构建及拯救出S2基因不同差异位点逆向突变为强毒株相应氨基酸的6株感染性克隆衍生毒株.经实时定量PCR、逆转录酶活性和western blot等检测表明,疫苗株S2基因4个稳定性变异位点全部逆向突变的感染性克隆衍生毒、,pFDDVS2rl-3-4-5在体外培养靶细胞中的复制水平低于亲本疫苗株感染性克隆衍生病毒和其他组合的逆向突变的感染性克隆衍生病毒,提示ELAV疫苗株S2蛋白4个稳定突变位点的综合作用可能是决定疫苗株和强毒株特性差异的因素之一.以上结果为体内感染S2基因逆向突变感染性克隆衍生病毒,进一步揭示S2基因在ELAV弱毒疫苗致弱过程中的作用提供了依据.  相似文献   

冬季奶牛养殖"十字诀"     

张锡龙  赵立平 《畜牧兽医科技信息》2005,(11):36-36

随着冬季的来临，气温不断下降，直接影响奶牛的产奶量，那么冬季如何养好奶牛，根据经验可总结成10个字：建、勤、温、湿、精、汁、水、补、防、净，供你借鉴。  相似文献