胶乳凝集抑制试验快速鉴定肉种类研究     

李爱民  宋华宾  郑明光 《中国动物检疫》1993,(2):4-6

以羧化聚苯乙烯胶乳作载体,将动物血清分别共价交联到载体微球表面,制成免疫微球。将此微球同相应抗血清配对,进行胶乳凝集抑制试验以鉴定牛肉、马肉、羊肉、狗肉和猪肉。通过对162份牛肉、43份马肉、100份猪肉、34份羊肉、30份狗肉、10份骡肉、4份驴肉和7份山羊肉的鉴定,制备的5种胶乳试剂敏感性均为100％。除马肉胶乳试剂和羊肉胶乳试剂有种属内交叉反应外,其它胶乳试剂特异性为100％。实验具有良好的重复性,试剂稳定性强,易于保存。5分钟内出结果,操作简便,适于基层单位应用。  相似文献   

SARS病毒核蛋白基因的克隆、序列分析及其在E．coil中的高效表达     

杨松涛  夏成柱乔军  高玉伟常爽黄耕  郑明光 《吉林农业大学学报》2005,27(3):331-334,343

对SARS病毒核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。根据GenBank中已发表的SARS全基因组序列，设计合成了1对特异性引物，对SARS病毒N蛋白基因进行了RT—PCR扩增。将PCR产物纯化后与pGEM—T连接得到重组质粒pGEM—N，进行核苷酸序列测定。结果该基因全长1269bp，编码422个氨基酸。与Tor2、Urbani和TW1株相比，核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性均为100％。将pGEM—N双酶切．回收目的基因片段并克隆到大肠杆菌表达载体pE328a中，构建了重组质粒pET—N；将其转化表达菌BI21(DE3)用IPTG进行诱导表达。SDS—PAGE结果表明：重组菌可表达相对分子量约为53kD的蛋白。Westem—blotting证实，重组N蛋白可以与SARS免疫血清发生特异性反应。经凝胶薄层扫描分析，重组N蛋白表达量约占菌体蛋白的43％。  相似文献   

生物素标记LT基因探针检测产肠毒素性大肠杆菌     

富常勤  周志江  郑明光 《中国兽医学报》1992,(3)

用碱变性法提取重组质粒pEWD299,经Hind Ⅲ酶切后,进行琼脂糖凝胶电泳,用电洗脱法回收LT基因850bp的核酸片段,再用二步法缺口翻译反应制备生物素标记的LT基因探针.通过菌落杂交试验表明,在严格去蛋白和RNA的条件下,该探针与试验中所有产LT和ST,或仅产LT的ETEC发生杂交反应;而与所有仅产ST的ETEC、侵袭性大肠杆菌(EIEC)、普通大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、小肠结肠耶尔森氏菌、霍乱弧菌均无杂交反应.其检测提纯的LT—DNA的敏感性水平为25pg,检测食品模拟标本中产LT大肠杆菌的敏感性达到130个细菌/g的水平.  相似文献   

山羊旋毛虫包囊形成过程的形态学观察   总被引：5，自引：0，他引：5  

郑明光  袁鸿锦 《中国兽医学报》1983,(1)

1979、1980两年,哈尔滨市居民因吃“涮羊肉”先后多次发生了人的旋毛虫病147例。该市组成了协作组进行调查研究。我校卫生检验教研室受协作组委托,对患者吃剩的病原肉进行了肉的类别鉴定与旋毛虫的检验,证明送检的羊肉中含有旋毛虫包囊。从而协助该协作组对吃“涮羊肉”感染旋毛虫病的问题给予了初步证实。  相似文献   

用PCR鉴定大肠杆菌O157:H7   总被引：14，自引：1，他引：13  

周志江  黄上媛  郑明光  汪力亚  王丽  李景云 《中国兽医学报》1999,19(3):248-250

根据大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７的编码ｅａｅ蛋白的ｅａｅ Ａ基因和大肠杆菌编码Ｈ７抗原的ｆｌｉＣ基因的核苷酸序列,合成了２对窦核苷酸引物,建立了一个检测大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７的ＰＣＲ方法,对１１株已知大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７（ＮＭ：无运动性）株和其他不同属的４２株已知肠道致病菌的检测结果表明,该方法只从大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７（ＮＭ）株的ＤＮＡ中产生预期的扩增产物,而从其他菌株的ＤＮＡ中未扩增出任何ＤＮＡ不  相似文献   

SARS病毒核蛋白基因的克隆、序列分析及其在E.coli中的高效表达   总被引：1，自引：1，他引：0  

杨松涛  夏咸柱  乔军  高玉伟  常爽  黄耕  郑明光 《吉林农业大学学报》2005,27(3):331-334

对SARS病毒核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。根据GenBank中已发表的SARS全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,对SARS病毒N蛋白基因进行了RT-PCR扩增。将PCR产物纯化后与pGEM-T连接得到重组质粒pGEM-N,进行核苷酸序列测定。结果该基因全长1269bp,编码422个氨基酸。与Tor2、Urbani和TW1株相比,核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性均为100%。将pGEM-N双酶切,回收目的基因片段并克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中,构建了重组质粒pET-N;将其转化表达菌BL21(DE3)用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结果表明:重组菌可表达相对分子量约为53kD的蛋白。Western-blotting证实,重组N蛋白可以与SARS免疫血清发生特异性反应。经凝胶薄层扫描分析,重组N蛋白表达量约占菌体蛋白的43%。  相似文献   

PCR鉴定牛肉方法的建立及初步应用     

张国利  郑明光 《中国兽医学报》1996,16(2):179-183

依据牛１．７０９卫星ＤＮＡ序列设计了１对引物，建立了ＰＣＲ鉴定生、熟牛肉的方法。应用本方法特异地扩增出预期的牛２１８ｂｐＤＮＡ片段，其检测敏感度对生牛肉达３３．６ｆｇＤＮＡ，对熟牛肉和高压牛肉为０．３２ｐｇ。运用该引物均可扩增出水牛、牦牛、奶牛、黄牛肉单一的相同大小的ＤＮＡ条带，而对马、山羊、绵羊、骆驼、鹿、猪等１５种动物肉的ＤＮＡ扩增则呈阴性。扩增片段经ＨａｅⅢ酶切分析确认，所得１２９、７９、１０ｂｐ片段与微机分析结果一致。利用本法对１０３份生、熟牛肉及其制品进行鉴定，检出率为１００％。对各种样品检测，均可在６ｈ内完成。  相似文献   

屠畜的应激反应与运输病     

郑明光 《中国兽医学报》1985,(2)

商品畜禽经收购集中,并经长途运输到达屠宰加工部门时,往往引起畜体掉膘、抗病力减弱甚至死亡。这些不良后果与屠畜的应激反应有着密切关系。目前,对屠畜的运输性应激反应和运输性应激病研究较多,本文仅就此问题综述如下。  相似文献   

运输性应激反应与肉的品质     

郑明光  Б.П.Романюк 《中国畜牧兽医》1983,(5)

畜牧业生产的集约化和专业化与作用于动物机体的各种应激因素有密切的关系,这些因素对畜产品的质量和数量都有不良的影响。本实验的目的是研究运输性应激反应对犊牛某些生理指标的影响。在捷尔诺波尔肉牛场中选择了两组小公牛进行实验。每组5头,18月龄,体重450公斤。研究是在冬季进行。第一组为对照组,第2组实验组。对实验组牛在运往肉联厂前30分钟肌  相似文献   

聚合酶链反应（PCR）鉴定猪肉方法的建立及应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

张国利  郑明光  周志江  刘明远  欧阳红生  卢强 《中国动物检疫》1998,15(2):3-5

依据猪小卫星ＤＮＡ序列设计了１对引物,建立了ＰＣＲ鉴定生、熟猪肉的方法。应用本方法特异地扩增出预期的猪３０７ｂｐ的ＤＮＡ片段,其检测敏感度对生猪肉达３８．６ｆｇＤＮＡ,对熟猪肉和高压猪肉为０．３７５ｆｇ全基因组ＤＮＡ。运用该引物仅可扩增生猪ＤＮＡ的单一片段,而对马、牛、羊等１２种动物肉的ＤＮＡ扩增则呈阴性。应用本法对６３份生、熟猪肉进行鉴定,正确率为１００％,对各种样品检测,均可在６ｈ内完成。  相似文献