新型鸭呼肠孤病毒DH13株结构蛋白σB的原核表达及免疫原性分析     

杨惠湖  黄惠兰  袁生  李文俊  姚鑫炎  张玉倩  梁昭平  黄淑坚  张雪莲 《中国畜牧兽医》2021,48(11):4204-4212

本研究旨在利用原核表达系统表达新型鸭呼肠孤病毒（NDRV） DH13株重组σB蛋白,并检测其免疫原性,为NDRV基因工程疫苗研制等提供物质材料。采用RT-PCR方法扩增获得NDRV σB基因,构建原核表达重组质粒pET-30a-σB和pET-32a-σB,将2个重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,利用IPTG诱导获得相应的重组蛋白,通过SDS-PAGE分析重组蛋白的表达形式。纯化无His的σB蛋白,并以此蛋白作为免疫原免疫新西兰白兔,制备兔源多克隆抗体。利用Ni²⁺柱亲和层析法纯化含His的σB蛋白,以此蛋白作为检测原,通过间接ELISA方法测定兔源多克隆抗体效价;Western blotting鉴定多克隆抗体与重组蛋白的特异性识别能力。结果显示,PCR扩增获得大小约为1 100 bp的σB基因片段。SDS-PAGE结果显示,高效表达出了2种重组σB蛋白,大小分别约为41和46 ku,均以包涵体形式存在。间接ELISA结果显示,制备的多克隆抗体效价达1∶204 800,能特异性地识别原核表达的重组蛋白,表明重组无His的σB蛋白具有良好的免疫原性。Western blotting特异性鉴定结果显示,含His的σB蛋白和无His的σB蛋白均与制备的兔源多克隆抗体发生特异性反应,表明原核表达得到的重组σB蛋白具备良好的反应原性。本试验利用原核表达系统成功地表达出了重组σB蛋白,并证实了重组NDRV σB蛋白具有良好的免疫原性及反应原性,该结果将有助于后续对NDRV σB蛋白生物学功能的鉴定、NDRV诊断用抗原的制备及NDRV新型疫苗的研制。  相似文献   

SIDD管理模式对水管体制的作用     

赵健轧文倩  孔祥伟 《新疆农业科学》2007,44(Z1):230-232

介绍了项目推行中SIDD管理模式、组建的原则、程序和建立SIDD试点取得的成就.通过SIDD管理模式的推行,农民直接参与末级水利工程的建设,因而提高了水利工程的效益,减少了水资源的浪费.农民也因此减少了水费支出,实现了增产和增收.  相似文献   

昆明都市农业的地位和作用研究——基于滇中城市经济圈一体化发展的视角     

李茂萱  陈攀  张云倩 《云南农业大学学报(自然科学版)》2010,4(4):15-18

随着《云南省滇中城市经济圈区域协调发展规划》的出台，昆明市作为经济圈的核心，其农业发展为加快经济圈的一体化进程、保持圈内经济社会的和谐发展，将产生重要作用。分析了在经济圈一体化发展格局下，昆明都市农业的地位和功能，以及都市农业发展的内涵拓延，并提出了相关政策建议。  相似文献   

在现行土地制度下“小产权房”问题的理论探讨     

华文彬  石文倩  夏琪琪  蔡慧 《甘肃农业》2014,(11):12-15

近年来,随着土地制度的演进以及城市面积的扩张,房价日益高涨,催生了小产权房火热的市场,同时也带来了小产权房合法化等一系列的问题。基于此,文章在新中国成立以来的土地制度演进的基础上,结合产权理论对＂小产权房＂的历史与现实以及发展之路进行了分析探讨。  相似文献   

基于谐波法的塑料大棚内气温日变化模拟简     

李 倩申双和  陶苏林邹学智 《中国农业气象》2014,(1):33-41

  相似文献   

不同场合的插花布置探讨     

马林倩  陈子雨 《现代园艺》2010,(3):45-46

根据环境的不同,插花布置的手法和要求是有区别的。如展览馆、宾馆大堂等大型公共场所,以西方式或现代自由式插花为主,要求体量大、数量多、色彩丰富。如居室等小型空间范围,则以东方式插花为主,只需少数小体量的插花作品点缀,即可起到锦上添花的作用。  相似文献   

烹饪中的防癌措施     

倩如 《甘肃林业》2000,(4)

日常生活中要注意科学烹调 ,不让蔬采和食品中的营养成分流失 ,同时要防止吃进含有亚硝酸胺的食品。在烹调中要注意些什么呢 ?1 鱼、肉不可烧焦。2 多吃具有根茎的蔬菜。萝卜、豆芽、南瓜、莴苣和豌豆中含有一种酶 ,能分解亚硝酸胺或阻止致癌物质发生作用。3 蔬菜要先洗后切 ,切好即炒 ,炒好即吃。4 烹调时 ,作到旺火、急炒、快盛。5 不要挤出菜汁 ,因菜汁中含有丰富的维生素Ｃ、酶和其他养分。6 适当用点醋。7 不宜加用食碱。此外 ,科学研究还发现 ,腌菜、腌肉里都含有一定量的亚硝酸盐 ,食品加工中的防腐剂、着色剂也含有亚硝酸盐物质 …  相似文献   

日光温室专用燃煤热风炉加温效果分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

马丹  须晖  韩亚东  马健  李天来  杨晓娟 《农业工程技术:农产品加工》2007,(5):13-14

对SG-1型高效热风炉在辽沈Ⅰ型日光温室内的加温效果进行了测试.结果表明:加温后,一定距离内,距离热风炉越近的地方气温越高,靠近后墙处的温度要比前底角高,植株群体内部及植株冠层的温度绝大部分达到13℃以上,达到了番茄生长的适宜温度.加温时东西平均温差2.6℃,南北平均温差1.7℃.  相似文献   

陕西林地资源保护利用现状及对策探讨     

翟佳  刘文倩  吴普侠 《陕西林业科技》2005,(4):59-62

分析了陕西省林地资源的现状、特点，指出了陕西省林地保护利用的主要问题是；（1）保护与发展、培育和利用的矛盾；（2）农村产业结构调整与林地资源保护的矛盾；（3）经济快速发展与林地资源管理手段滞后的矛盾。并提出了解决这些问题的若干对策。  相似文献   

猪流行性腹泻病毒灭活疫苗的制备及攻毒保护研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐宏军  杨鹏程  任丽  胡来根  何孔旺  刘文倩  代洪波 《动物医学进展》2015,(1):35-39

为研究现用猪流行性腹泻病毒(PEDV)CV777疫苗毒株对流行毒株的免疫保护效果,以RTPCR进行PEDV CV777疫苗株、JS12流行株S基因克隆测序,进行PEDV S基因核酸序列分析与氨基酸序列分析。分别以转瓶工艺与细胞悬浮培养工艺培养Vero E6细胞,制备PEDV CV777株转瓶灭活苗与悬浮灭活苗。分别以PEDV转瓶灭活苗、悬浮灭活苗、PEDV流行株组织灭活苗(JS12株)产前30d免疫经产母猪;母猪产仔后14d进行仔猪攻毒保护试验。核酸序列分析显示,PEDV CV777株S基因与流行毒株的相似性在96.4%~99.7%之间,氨基酸序列相似性在96.7%~99.5%之间。转瓶工艺制备PEDV抗原效价为107.0 TCID50/mL,悬浮培养制备PEDV抗原效价为108.5 TCID50/mL。攻毒保护试验显示,悬浮灭活苗免疫母猪后,仔猪有2/10发病,保护率为8/10,转瓶灭活苗组发病率为8/10,保护率仅为2/10;组织灭活苗组9/10发病;对照组10头全部发病。该试验证明,提高PEDV CV777株的抗原含量,能够有效提高疫苗对PEDV流行毒株的保护效果。  相似文献