基于血清4型禽腺病毒fiber-1蛋白间接ELISA检测方法的建立     

武晓倩  谢芝勋  罗思思  韦悠  邓显文  李小凤  万丽军  曾婷婷  谢丽基  任红玉 《中国兽医学报》2022,(6):1131-1136+1183

为了获得血清4型禽腺病毒(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)fiber-1重组表达蛋白,并建立快速鉴别检测方法,本试验将FAdV-4 fiber-1基因连入pET-32a表达载体,转化BL21(DE3)感受态细胞,将测序正确的重组蛋白经IPTG诱导表达、纯化和Western blot鉴定。以纯化的pET-32a-fiber-1重组蛋白作为ELISA包被抗原,优化反应条件,建立了检测FAdV-4抗体的fiber-1-ELISA方法。结果成功表达pET-32a-fiber-1蛋白,证实可与FAdV-4阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性。特异性结果显示,除FAdV-4与FAdV-10外,与其他病原的抗体无交叉反应;阳性血清稀释1 600倍仍可检测到,批内和批间最大变异系数均小于10%。检测了176份临床样品,75份为阳性,101份为阴性。fiber-1-ELISA方法易于操作,特异性强,重复性好,为FAdV-4抗体监测提供了有效方法。  相似文献   

没食子酸对黄牛卵母细胞体外成熟的影响     

黄永军  李小凤  文冬梅  佘春  邓凯  潘尔科  邵齐明  石德顺  韦英明  陆凤花 《中国畜牧兽医》2018,45(8):2247-2254

试验旨在研究没食子酸（gallic acid，GA）对黄牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响，进一步优化黄牛卵母细胞体外成熟体系。在卵母细胞体外成熟液（M液）中添加不同浓度没食子酸（0、10、30、50、100 μmol/L），成熟22~24 h后，统计卵丘扩展情况及卵母细胞成熟率；同时，对成熟的卵母细胞进行正常体外受精（IVF），统计早期胚胎的分裂率、囊胚率、囊胚卵裂球数及卵裂球细胞凋亡率。根据试验结果，选择最优浓度，使卵母细胞在含该浓度没食子酸的成熟液中成熟24 h后，检测其细胞内的活性氧水平（ROS）和总谷胱甘肽（TGSH）含量。结果显示，M液中添加30 μmol/L没食子酸组卵丘扩展分值和成熟率显著高于对照组（0 μmol/L）（P<0.05），其他处理组与对照组无显著差异（P>0.05）；成熟的卵母细胞体外受精后进行后续胚胎培养，其中10和30 μmol/L组的分裂率均显著高于对照组和100 μmol/L组（P<0.05），50和100 μmol/L组分裂率较对照组也有所提高，但差异不显著（P>0.05）；早期囊胚率统计发现，与对照组相比，30和100 μmol/L能够显著提高囊胚发育率（P<0.05），10和50 μmol/L浓度组则无显著差异（P>0.05）；与对照组相比，30、100 μmol/L没食子酸均能显著提高IVF胚胎的早期囊胚卵裂球数（P<0.05）；但囊胚卵裂球凋亡率与对照组无显著差异（P>0.05）；对卵母细胞内活性氧和总谷胱甘肽含量检测时，发现30 μmol/L没食子酸可显著降低细胞内活性氧水平（P<0.05），且显著提高总谷胱甘肽含量（P<0.05）。综上所述，在黄牛卵母细胞体外成熟液中添加适量的没食子酸能有效降低卵母细胞内活性氧水平，提高总谷胱甘肽含量，进而提高卵母细胞成熟的质量及其后续IVF胚胎发育能力。  相似文献   

生、熟鲜豆渣替代麸皮栽培金针菇的比较研究     

蒋端生  李海文  陈礼刚  肖向荣  蒋凌飞  何瑶瑶  袁盛建  樊前容  李小凤 《湖南农业科学》2011,(5):23-24

通过对豆腐源豆渣（生鲜豆渣）和豆奶源豆渣（熟鲜豆渣）两种不同来源的豆渣替代麸皮栽培金针菇试验,结果表明：生鲜豆渣与麸皮栽培的金针菇产量没有差异,熟鲜豆渣比麸皮栽培的产量低9.0%,但差异未达到显著水平。用鲜豆渣替代麸皮,每配制100 kg干料,可节支25元。  相似文献   

生、熟鲜豆渣替代麸皮栽培金针菇的比较研究     

蒋端生  李海文  陈礼刚  肖向荣  蒋凌飞  何瑶瑶  袁盛建  樊前容  李小凤 《湖南农业科学》2011,(10)

通过对豆腐源豆渣(生鲜豆渣)和豆奶源豆渣(熟鲜豆渣)两种不同来源的豆渣替代麸皮栽培金针菇试验,结果表明:生鲜豆渣与麸皮栽培的金针菇产量没有差异,熟鲜豆渣比麸皮栽培的产量低9.0%,但差异未达到显著水平.用鲜豆渣替代麸皮,每配制100 kg干料,可节支25元.  相似文献   

生理学对后续医学基础课程和临床课程学习影响的研究     

李小凤  黄汉玲  史柳芝  王彩冰 《农业环境科学学报》2013,1(2):228-229

生理学是医学生接触较早的一门医学基础课程,由于其逻辑性强,学生感到抽象难学,为了解医学生对生理学在后续基础课程和临床课程的学习影响,笔者通过对在校本科医学生进行问卷调查研究。结果表明,生理学是后续基础课程和临床课程的基础,学好生理学能降低后续基础课程和临床课程的学习难度,并能帮助后续基础课程和临床课程对知识的理解和分析。因此,生理学教师必须重视在教学过程中结合后续基础课程和临床课程的相关内容,医学生必须要认真、积极、主动学好生理学。  相似文献   

小儿呼吸道EB病毒感染实验诊断与发病机制研究进展     

何晓峰;刘金禄;王蕾;李小凤 《张家口农专学报》2013,(5):102-104,108

<正>EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染是儿科比较常见的一种病毒感染性疾病,我国3~5岁儿童VCA-IgG阳性率达90%以上[1]。该病毒感染时临床症状复杂多样,轻重不一,可累及全身多个系统,从而引起多种疾病,往往不能早期诊断,典型的小儿EBV感染表现为传染性单核细胞增多症。近年来,随着EBV感染实验室诊断技术的广泛应用,EBV感染的非典型表现越来越受到人们的关注,其中非典型表  相似文献   

鸡新城疫的诊断与防治     

魏敏  梁海梅  谭坤龙  李小凤 《现代农业科技》2007,(15):176-176

介绍鸡新城疫的流行特点、临床症状、剖检病变和救治措施,并提出以免疫接种为主的预防措施。  相似文献   

北京市农业标准化基地发展现状及对策     

李小凤  邢天琪  沙品洁  张金轶  周绪宝  于寒冰  郝建强  王全红  孙敏 《蔬菜》2024,(2):27-32

为深入了解北京市农业标准化基地质量安全管控能力情况,从农业标准化基地建设管理、农产品质量安全管控、品牌提升3方面调研了北京125家农业标准化基地,发现北京市农业标准化基地普遍存在产后机械化,投入品管理,标准体系建立,标准转化以及品牌建设、培育和推广方面仍较薄弱,承诺达标合格证的开具、标准梳理等方面执行水平尚需提高等问题,并针对问题提出加强农业标准化生产及培训、推行全程质量安全控制、规范质量标志管理等建议。  相似文献   

水稻稻飞虱飞机防治试验初报     

钟玲  邱高辉  宋建辉  史建苗  许斐斐  朱芹芹  廉清洪  李小凤  臧传松 《江西植保》2014,37(3):260-263

通过田间试验研究解放9型农用飞机喷洒吡蚜酮水分散粒剂和吡蚜酮·醚菊酯悬浮剂对水稻稻飞虱的防治效果。结果表明,飞机喷药雾滴分布均匀,穿透性强,水稻上部叶片平均药滴覆盖密度17.9个/cm2,中部叶片平均为13.5个/cm2。药效调查结果表明,飞机喷洒吡蚜酮水分散粒剂和吡蚜酮·醚菊酯悬浮剂对水稻稻飞虱防治效果好,药后1 d虫口减退率达83.06%,药后5 d达92.97%以上,药后7 d为96.0%。综合该结果,飞机施药适用于水稻稻飞虱的大面积防治。  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立     

谢志勤  谢芝勋  张艳芳  范晴  谢丽基  万丽军  罗思思  李孟  张民秀  曾婷婷  黄娇玲  王盛  李丹  韦悠  李小凤  任红玉  阮志华 《西北农业学报》2024,(3):381-388

旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,建立方法的最佳引物浓度为20μmol/μL,最佳探针浓度为10μmol/μL,最佳退火温度为56℃。特异性检测结果显示,建立的方法只检出ILTV,没有检出其他病原株。敏感性检测结果显示,采用建立的方法定量检出ILTV重组质粒标准品的最低限为4.6拷贝/μL。对3个连续稀释的pMD18-ILTV重组质粒DNA进行检测,3次重复检测结果的变异系数均小于5%。对83份病鸡喉拭子、肺及脾组织样品进行检测,采用建立的ddPCR检出ILTV阳性样品10份,荧光定量PCR检出ILTV阳性样品9份,ddPCR的阳性检出率(12.05%)高于荧光定量PCR的阳性检出率(10.84%)。结果表明,建立的ddPCR方法定量检测ILTV特异性强、敏感性高、重复性好...  相似文献