西尼罗热病毒RT-PCR检测方法的建立   总被引：3，自引：0，他引：3  

姜焱张常印  陈国强 《中国动物检疫》2005,22(5):25-27

参考Genebank发表的西尼罗热病毒(West Nile virus，WNV)E糖蛋白基因序列，自行设计合成一对引物，对WNV进行RT—PCR扩增，产物经琼脂糖电泳分析，呈现一条约400bp的条带，将其克隆入pMD18-T—Vector载体中，并进行序列测定，与已发表的WNV基因比较发现，核苷酸的同源性为99．7％，证实为WNV的E基因，通过对样品多次检测，都能扩增出一条约400bp的条带，表明该方法比较稳定。  相似文献   

我国部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株ORF5基因的遗传变异分析     

李和平吴发兴  郑忠屹李晓成陈德坤  黄保续 《中国动物检疫》2005,22(10):23-26

参考Genbank发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PKRSV）ATCC VR-2332的ORF5基因序列，设计并合成了一对引物．对来自福建、浙江、山东等地的PRRSV分离毒株进行RT-PCR扩增．获得约748bp的DNA片断，将其分别克隆入pMD18-T载体中，并进行测序。应用DNAStar软件分析所测序列，并与ATCCVR-2332、CH-1a、MLV、Lv等毒株的ORF5序列进行比较，结果表明：SHDl与F114、MLV、ATCCVR-2332同源性高达98．5％，与CH-1a同源性为91．0％，与其它毒株同源性为86．6％~88．4％；F114与MLV、ATCCVR-2332同源性为99．3％～99．7％．其余分离毒株在遗传关系上和CH-1a又分为明显的两个群．显示近年来各地PRRSV分离毒株与cH-1a株的遗传差异越来越大。  相似文献   

土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白基因的克隆及其序列分析     

魏佳何国声  徐梅倩姚宝安 《中国兽医寄生虫病》2005,13(4):1-8

目的利用RT-PCR和RACE技术克隆土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白基因全长序列并进行序列分析.方法根据日本血吸虫和曼氏血吸虫肌动蛋白基因的保守区设计引物,利用RT-PCR扩增出土耳其斯坦东毕吸虫的肌动蛋白基因的大片段,再结合RACE技术分别得到肌动蛋白的3＇端和5＇端,将三部分序列拼接后获得肌动蛋白基因的全长cDNA序列并进行序列分析.结果成功克隆了土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白的全长cDNA并提交GenBank,登录号为DQ017265,核酸序列比对表明东毕吸虫肌动蛋白基因的核苷酸序列和日本血吸虫、曼氏血吸虫的同源性分别为90%和91%.结论土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白的全长cDNA的克隆为进一步表达及其生物学性能的分析提供了理论基础.  相似文献   

隐性白肉鸡羽速自别雌雄系的选育(1)     

杜炳旺  曹宁贤  张琪林  王效京 《中国家禽》2005,9(Z1):34-36

本研究根据现代遗传学基因测交理论,共用32只表型慢羽公鸡与245只快羽母鸡组成测交试验.结果表明,所测的32只公鸡无一只为纯合慢羽基因型.但发现测交后代的快慢羽分布比例与孟德尔遗传上的分离定律完全吻合.同时通过混合精液输精,实施扩群繁育,其中选留慢羽种母雏1460只,表型慢羽种公雏150只,从而为建立隐性白鸡慢羽系奠定了基础.  相似文献   

毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株微线蛋白-2基因在大肠杆菌的表达     

覃宗华  谢明权  蔡建平  艾哈迈德  彭新宇  魏文康  吴惠贤 《中国兽医学报》2005,25(1):22-25

根据克隆的毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株微线蛋白-2基因(EnMIC-2(Gd))的cDNA序列设计特异性引物，用PCR方法扩增其阅读框架(ORF)后，克隆至质粒表达载体pET-32a( )，成功构建了重组表达质粒pET-32a( )-EnMIC-2。用CaCl2法将其转化至宿主细菌E.cliBL21(DE3)，并用IPTG成功诱导了EnMIC-2重组抗原在大肠杆菌表达。表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的10．8％，其相对分子质量约为55000。重组蛋白经SDS-AGE分析后，用E．necatrix(广东株)感染鸡的高免血清进行Western Blotting分析，结果为阳性。  相似文献   

绵羊肺腺瘤病毒NM株前病毒gag基因的克隆与序列分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

刘淑英  马学恩  李景鹏 《畜牧兽医学报》2005,36(1):54-57

参照GenBank中已发表的绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的全基因序列，设计合成3对引物，对JSRVNM株的gag基因分3段进行PCR扩增，经琼脂糖凝胶电泳分析，分别呈3条531、888和949 bp的特异条带，将其分别克隆人pMD-18T载体中，进行序列测定并拼接序列，得到完整的gag基因序列。分析结果表明，与南非代表株(基因序列号NC-001494)的gag基因序列比较，核苷酸同源性为89．0%，推导出的氨基酸同源性为90％。与美国代表株(基因序列号AF105220)的gag基因序列比较，核苷酸同源性为86．3％，氨基酸同源性为87％。  相似文献   

H1N1猪流感广东株血凝素基因的克隆与序列分析   总被引：6，自引：1，他引：6  

胡永浩  姚学萍  李海燕  赵有淑  杨焕良  陈化兰 《畜牧兽医学报》2005,36(2):172-176

用RT-PCR方法扩增H1N1亚型猪流感病毒广东分离株A／Swine／GuangDong／711／2001HA基因，对其进行了克隆和测序。结果显示，HA基因全长1771bp．共编码579个氨基酸。A／Swine／Guang Dong／711／2001HA基因编码的氨基酸序列中有8个糖基化位点，5个位于HAl基因的第27、28、40、104和287位点，3个位于HA2基因的21、153和213位点。与H1N1亚型猪流感经典毒株比较后发现，血凝素糖基化位点并不是高度保守的。将A／Swine／Guang Dong／711／2001与自Gen Bank读取的1918年人流感毒株A／South Carolina／1／18、1991年人流感毒株A／MD／12／91和1997年猪流感毒株A／Swine／Wisconsin／238／97等进行核苷酸同源性比较分析，A／Swine／Guang Dong／711／2001与A／SouthCarolina／1／18、A／MD／12／91和A／Swine／Wisconsin／238／97等毒株的核苷酸同源性分别为93．9％、94．7％和93．9％。从系统发生树来看，A／Swine／Guang Dong／711／2001与A／South Carolina／1／18和A／Swine／Wisconsin／238／97的亲缘关系相近。  相似文献   

母牛一胎双犊技术的研究     

张居农  蒋学国  许斌  郭成宽  仇其山  李强  牛志宏  王安江  王凤娇  张建军  张选珠 《乳业科学与技术》2005,27(3):137-138

选择9头母牛先行人工授精、7天后再移植冷冻胚胎以生产双犊。试验结果表明,母牛产双犊达44.44%(P<0.01)。提示:采用A(I人工授精)+ET(胚胎移植)是提高母牛双犊率的有效技术措施之一。  相似文献   

Likelihood of pregnancy after embryo transfer is reduced in recipient mares with a short preceding oestrus          下载免费PDF全文

J. Cuervo‐Arango  A. N. Claes  M. Ruijter‐Villani  T. A. Stout 《Equine veterinary journal》2018,50(3):386-390

  相似文献   

Familial Congenital Methemoglobinemia in Pomeranian Dogs Caused by a Missense Variant in the NADH‐Cytochrome B5 Reductase Gene          下载免费PDF全文

H. Shino  Y. Otsuka‐Yamasaki  T. Sato  K. Ooi  O. Inanami  R. Sato  M. Yamasaki 《Journal of veterinary internal medicine / American College of Veterinary Internal Medicine》2018,32(1):165-171

Background

In veterinary medicine, congenital methemoglobinemia associated with nicotinamide adenine dinucleotide (NADH)‐cytochrome b5 reductase (b5R) deficiency is rare. It has been reported in several breeds of dogs, but little information is available about its etiology.

Objectives

To analyze the NADH‐cytochrome b5 reductase gene, CYB5R3, in a Pomeranian dog family with methemoglobinemia suspected to be caused by congenital b5R deficiency.

Animals

Three Pomeranian dogs from a family with methemoglobinemia were analyzed. Five healthy beagles and 5 nonrelated Pomeranian dogs without methemoglobinemia were used as controls.

Methods

Methemoglobin concentration, b5R activity, and reduced glutathione (GSH) concentration were measured, and a turbidity index was used to evaluate Heinz body formation. The CYB5R3 genes of the affected dog and healthy dogs were analyzed by direct sequencing.

Results

Methemoglobin concentrations in erythrocytes of the affected dogs were remarkably higher than those of the control dogs. The b5R activity of the affected dogs was notably lower than that of the control dogs. DNA sequencing indicated that this Pomeranian family carried a CYB5R3 gene missense variant (ATC→CTC at codon 194) that resulted in the replacement of isoleucine (Ile) by leucine (Leu).

Conclusions and Clinical Importance

This dog family had familial congenital methemoglobinemia caused by b5R deficiency, which resulted from a nonsynonymous variant in the CYB5R3 gene. This variation (c.580A>C) led to an amino acid substitution (p.Ile194Leu), and Ile194 was located in the proximal region of the NADH‐binding motif. Our data suggested that this variant in the canine CYB5R3 gene would affect function of the b5R in erythrocytes.  相似文献