产γ-氨基丁酸屎肠球菌的筛选及γ-氨基丁酸的定量     

朱泉  程金龙  朱元召  尹龙  倪晋东  程茂基  杨章平 《动物营养学报》2016,(8):2504-2511

本试验旨在利用分子生物学方法鉴定分离得到1株产γ-氨基丁酸(GABA)屎肠球菌,并定量测定所产GABA的量。从泡菜、酸奶、土壤、新鲜牛奶样品中筛选出一目标菌株F6,进行形态学特征与革兰氏染色鉴定;再扩增菌株F6的16S r DNA基因,然后测定该基因序列和构建系统发育树;同时采用高效液相色谱(HPLC)法定量测定菌株F6发酵液中的GABA含量。结果表明:菌株F6菌落大而光滑、圆形、直径1~2 mm、边缘整齐、乳白色;在分离培养基上菌落周围形成透明圈,使分离培养基呈黄色;在MRS固体培养基上菌落不透明,周围有透明圈。革兰氏染色鉴定菌株F6为阳性菌。分子生物学鉴定分析显示,菌株F6的16S r DNA基因序列与Gen Bank数据库中屎肠球菌(Enterococcus faecium)的相似性大于99%。HPLC法测定得到GABA标准曲线线性方程为Y=7 080 733.139 5 X-4 511.692 7(R2=0.999 4),通过方程得出菌株F6发酵液中的GABA含量为7.1 g/L,保留时间为7~10 min。结果提示,本试验筛选得到1株高产GABA的屎肠球菌F6。  相似文献   

福州动物园动物高水平耐庆大霉素肠球菌耐药表型检测     

陈小丽  罗小青  唐耀  王璜  洪海波  陈夏  俞道进 《动物医学进展》2012,33(7):122-125

为了解福州动物园动物细菌耐药现状,选用肠球菌为指示菌,采用琼脂平板筛选法(ADSP法)筛选高水平耐庆大霉素肠球菌(HLGRE)。根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法测定耐药菌株对6种抗菌药物的耐药性,用PCR法对分离出的不同来源的高水平耐氨基糖苷类肠球菌进行菌种鉴定。从动物园圈养野生动物共分离出78株HLGRE,不同动物来源的分离率不同,其中草食动物HLGRE分离率最低,占55.56%;肉食动物HLGRE分离率最高,占84.38%。药敏试验结果显示,不同动物来源的HLGRE均对红霉素和土霉素的耐药率最高,分别为100%和96.1%,对氨苄西林和万古霉素的耐药率最低。  相似文献   

不同肠球菌基因组DNA提取方法对PCR鉴定的影响     

张祥  李晓博  谷素美  段志刚  王亚宾  胡慧  陈丽颖 《河南农业大学学报》2012,46(1):67-71

为研究肠球菌基因组DNA的不同提取方法对16SrRNA基因序列PCR、种属多重PCR、RAPDPCR等肠球菌鉴定结果的影响,分别采用6种基因组DNA提取方法(水煮法1、水煮法2、常规酚/氯仿抽提法、chelex-100法1、chelex-100法2和试剂盒法),对1株肠球菌标准菌株ATCC29212基因组DNA进行提取,以这些分别提取的DNA为模板在相同的扩增条件下进行PCR检测.结果表明,在16SrRNA基因序列PCR和种属多重PCR检测中以水煮法1进行肠球菌DNA的提取最适宜,而试剂盒法在RAPDPCR检测中效果最佳.  相似文献   

绵羊人工感染粪肠球菌的病理组织学观察     

柳建新  周霞  田晶华  朱翠萍 《动物医学进展》2008,29(1):43-46

用粪肠球菌人工感染羔羊,复制粪肠球菌病病理模型。病理组织学观察可见病羊大、小脑有微血栓形成;大脑有噬神经和卫星化现象;肝细胞、肾小管上皮细胞变性、坏死、肾间质出血;脾脏的动脉周围淋巴鞘出现有许多上皮样细胞组成的上皮样细胞结节。结果表明,粪肠球菌引起羔羊出现的神经症状是非化脓性脑炎引起的,同时还伴随败血症变化。  相似文献   

酸马奶酒中一株粪肠球菌抑菌物质的粗提及特性研究     

贺银凤  王锂韫  李少英  吴敬  田建军 《农业工程学报》2007,23(1):264-267

该文研究了分离自内蒙古锡林郭勒盟地区酸马奶酒样中一株粪肠球菌(H_1-1-2)的最佳培养条件和菌株的抑菌特性，从菌株的培养液中粗提了抑菌物质，并对抑菌物质的理化特性进行了初步鉴定。研究结果表明，粪肠球菌H_1-1-2最适生长温度37℃，发酵4 h后pH值开始下降，7 h后菌株进入对数生长期，抑菌物质的产生是在发酵8 h以后，12 h达到高峰；发酵液经超滤、凝胶柱分离、薄层层析、紫外吸收图谱的测定，抑菌活性物质是分子量大于50 ku的蛋白类物质；粗提物在pH 1.0～10.0范围内均有抑菌活性，在pH 4.0时可耐受60℃加热30 min，耐受一些表面活性剂，但对蛋白酶、过氧化氢酶敏感。  相似文献   

Risk factors for enterococcal bacteriuria in dogs: A retrospective study     

Michael W. Wood  Adam Lepold  Dahlia Tesfamichael  Michael R. Lasarev 《Journal of veterinary internal medicine / American College of Veterinary Internal Medicine》2020,34(6):2447-2453

  相似文献   

Evaluation of the heat‐killed and dried cell preparation of Enterococcus faecalis against villous atrophy in early‐weaned mice and pigs     

Takamitsu TSUKAHARA  Yoko YOSHIDA  Toshiki TSUSHIMA  Takumi WATANABE  Noritaka MATSUBARA  Ryo INOUE  Kazunari USHIDA 《Animal Science Journal》2011,82(2):302-306

Early weaning induces villous atrophy in the small intestine (SI) of piglets. Oral administration of live lactic acid bacteria (LAB) can improve villous shortening. In this study, we evaluated the oral administration of a heat‐killed and dried cell preparation of Enterococcus faecalis (a LAB) strain EC‐12 against villous atrophy in early‐weaned mice (Experiment 1) and pigs (Experiments 2 and 3). Twelve 16‐days‐old mice were divided into two groups in Experiment 1: gavage of EC‐12 (10 mg/kg body weight (BW)/day), or control. On day 21, SI was collected. Eighteen 21‐day‐old pigs were divided into two groups in Experiment 2: gavage of EC‐12 (10 mg/kg BW/day), or control. After 10 days, the villous height of jejunum was measured. Six 21‐day‐old pigs were divided into two groups in Experiment 3: the basal diet supplemented with EC‐12 at 0.05%‐fed group, or the basal diet‐fed group. After 10 days, the villous height of jejunum was measured. The villous heights in SI were significantly higher by EC‐12 administration in all experiments. EC‐12 successfully improved the villous atrophy in the early‐weaned mice and pigs when EC‐12 was administered orally.  相似文献   

致羔羊脑炎粪肠球菌人工感染小鼠模型的建立          下载免费PDF全文

周霞  剡根强  马勋  任晓燕 《西北农业学报》2007,16(5):15-17

选用断奶和成年的健康小鼠108只,分组经不同途径接种对羔羊具有致病性的粪肠球菌,分别进行半数致死量测定、临床症状观察、细菌学和病理学检查。结果显示两种日龄小鼠均对该菌株易感,最佳感染途径是腹腔注射,皮下注射次之,鼻腔不引起感染。感染小鼠表现出典型脑炎症状及病理变化。该菌株对小鼠的LD50为6.31×1010cfu,从感染死亡小鼠脑脊液、大脑、血液及部分实质器官中均分离出该菌。小鼠感染粪肠球菌与羔羊自然感染症状及病变相似。该动物模型的建立为进一步探究粪肠球菌感染的体内动态分布、感染机制、毒力因子研究及免疫应答奠定了基础。  相似文献   

日粮中添加益生茵对笼养蛋鸭产蛋性能及蛋品质的影响     

唐文富  黄江南  宋琼丽  刘林秀  季华员  费良保  储怡士  韦启鹏 《江西农业学报》2013,(11):95-96,104

研究了在基础日粮中添加乳酸粪肠球菌及复合益生菌对山麻鸭产蛋性能和蛋品质的影响。结果表明：与对照组相比,添加乳酸粪肠球菌组及添加复合益生茵组的总蛋重分别提高了1．19％和3．13％,料蛋比分别降低了4．73％和6．47％;这两组所产鸭蛋在蛋品质指标短径、蛋白高度方面均明显优于对照组。  相似文献   

致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05 Pfs基因的克隆、功能序列分析及原核表达     

郑婷婷  齐亚银  王熙楚  孔科委  周霞 《西北农业学报》2015,24(12):30-34

采用PCR技术从致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05基因组中扩增得到甲硫腺苷/S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(Pfs)基因的全序列,对其功能序列进行分析,同时与其他细菌相应序列及编码的氨基酸进行同源性分析,构建该基因的原核表达载体,对表达蛋白进行反应原性分析。结果显示:XJ05的Pfs基因全长696bp,与XJ01、XJ08、XJ11,与屎肠球菌TX 2466之间的同源性在99.1%以上,其中,XJ05与V583为100%,且关键的功能序列相同,与肺炎链球菌同源性在55.8%以上、霍乱弧菌同源性在55.0%以上;pfs基因编码231个氨基酸,XJ05、XJ01、XJ08、XJ11与肺炎链球菌、霍乱弧菌、粪肠球菌V583、屎肠球菌TX 2466的同源性在86.43%以上;构建的重组质粒经诱导后表达蛋白分子量为28ku,Western blot检测显示特异性条带。结果表明,表达的融合蛋白具有良好的反应原性。  相似文献