栉孔扇贝精子膜蛋白的提取分离及初步鉴定     

刘丽燕  杨爱国  王清印  周丽青  刘志鸿 《海洋水产研究》2008,29(2):73-81

通过SDS-PAGE电泳,从提取液的倍数、提取时间、Triton X-100的浓度、SDS的有无等4个方面对提取条件进行优化,确定栉孔扇贝精子膜蛋白的最佳提取条件是:将精液150g离心去除精原细胞,0·1mol/L PBS缓冲液清洗两次,0·1mol/L Tris-HCl缓冲液清洗两次,3000g离心10min(4℃)得精子悬液;然后向精子悬液中加入3倍体积含1%Triton X-100和0.1%SDS的膜蛋白提取液中冰浴振摇1·5h;4℃,50000g离心15min,收集上清精子膜蛋白溶液。SDS-PAGE电泳后,考马斯亮蓝R-250染色检测出22种膜蛋白,分子量在23~156kDa之间,PAS染色检测出糖蛋白有13种,苏丹黑B染色检测出脂蛋白有12种,其中既为糖蛋白又为脂蛋白的有8种。此研究结果可为以后进一步分离纯化栉孔扇贝的精子膜蛋白,研究其在精子发生和受精过程中的功能及作用提供基础资料。  相似文献   

栉孔扇贝的氮、磷排泄及其与温度、壳长之间的关系     

宋娴丽  孙耀  武晋宣  尹晖  徐林梅 《水产学报》2007,31(1):38-44

通过天然饵料条件下的室内流水法，测定并计算了栉孔扇贝氮、磷排泄物的排泄量及温度和壳长对其的影响，建立了相关的数学模型，并对栉孔扇贝排泄物中各种形态的N、P含量与组成进行了分析。结果显示:在实验条件范围内，扇贝排泄物中VDTN、VPTN的分布范围分别为14.94～248.28 μg·(h·ind) -1、1.47～84.08 μg·(h·ind) -1，VDTP、VPTP分布范围分别为0.007～42.54 μg·(h·ind) -1、0.916～17.78 μg·(h·ind) -1。DTN、PTN占总氮排泄量的百分比分别为77.2%、22.8%，其中氨氮占50.8%；DTP、PTP占总磷排泄量的百分比分别为75.6%、24.4%。各形态N、P排泄速率均随着温度的升高而增加，溶解、颗粒态N、P与温度之间的关系可以用二项式曲线描述，而与壳长的关系可以用幂函数关系描述。溶解、颗粒态N、P均随温度和壳长的增加呈加速增大的趋势，它们与温度和壳长之间的关系均可用对数曲线加以定量描述，其交互作用模型分别为：VDTN=131.13Lnt+217.95LnL-617.65，VPTN=67.41Lnt+54.07LnL-242.37，VDTP=8.67Lnt+65.82LnL-112.15和VPTP=11.73Lnt+11.14LnL-43.74，经协方差分析结果表明，其相关系数均呈非常显著水平。图2表4参22 关键词：栉孔扇贝； 氮； 磷； 排泄  相似文献   

Characterization of 95 novel microsatellite markers for Zhikong scallop Chlamys farreri using FIASCO-colony hybridization and EST database mining   总被引：1，自引：0，他引：1  

Aibin Zhan  Zhenmin Bao  Xiaoli Hu  Shi Wang  Wei Peng  Mingling Wang  Jingjie Hu  Chengzhu Liang  Zhiqin Yue 《Fisheries Science》2008,74(3):516-526

ABSTRACT:   In order to construct a simple sequence repeat (SSR)-based genetic linkage map and to promote molecular marker-assisted selection (MAS) in scallop breeding, the methods of Fast Isolation by AFLP of Sequences COntaining repeats (FIASCO)-colony hybridization and expressed sequence tag (EST) database mining were modified and used to develop 95 novel microsatellite markers for Zhikong scallop. The SSR-enriched library constructed by the FIASCO method consisted of 830 clones, and 295 (35.5%) positive clones were identified after colony hybridization. One hundred and fifty clones were randomly sequenced and the results showed all clones contained at least one microsatellite. Of 91 primer pairs designed, 72 were amplified scorable polymerase chain reaction (PCR) products and 70 were polymorphic with the allele number range of 3–16 alleles/locus (average 7.0 alleles/locus). When EST database mining was performed, 66 microsatellites containing ESTs were identified from 3467 sequences deposited in GenBank. Based on cluster analysis of length and GC content of the flanking regions, 47 primer pairs were designed and 23 scorable EST SSRs were obtained. Compared with genomic SSRs developed in this study, EST SSRs showed lower genetic variability with an average of 4.2 alleles/locus. The results in the present study demonstrate that modified FIASCO-colony hybridization is an efficient and low-cost method for the isolation of large numbers of microsatellite markers for scallop species.  相似文献   

不同地理种群栉孔扇贝营养成分的比较分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

杨凤影  张弼 《安徽农业科学》2009,37(9)

[目的]分析和评价辽宁、山东、江苏、广东4个不同地理种群栉孔扇贝的营养成分。[方法]用常规方法分析其软体部一般营养成分;用氨基酸分析仪分析氨基酸组成。[结果]蛋白质含量以山东种群最高;粗脂肪和灰分以辽宁种群最高;水分含量以广东种群最高。氨基酸的组成非常全面,各地理种群栉孔扇贝干物质中氨基酸总量由大到小的变化顺序为山东(761.9 mg/g)>广东(755.6 mg/g)>江苏(752.1 mg/g)>辽宁(741.1 mg/g);EAA/TAA比率在36.15%~37.64%;呈味氨基酸的含量较高,变化范围为306.9~312.6 mg/g。钾、磷、钙、镁、铁等元素的含量丰富。[结论]不同地理种群的栉孔扇贝一般营养成分、氨基酸及矿物元素含量虽存在一定差异,但与其他一些双壳贝类相比,栉孔扇贝是高蛋白、氨基酸和矿物元素含量较丰富的海洋食品。  相似文献   

不同贝龄华贵栉孔扇贝数量性状的通径分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘文广  林坚士  何毛贤 《南方水产》2012,8(1):43-48

对华贵栉孔扇贝（Chlamys nobilis）3月龄、6月龄、7月龄、9月龄和15月龄的4个数量性状（壳高、壳长、壳宽和体质量）进行了测量,分析了性状间的表型相关性及形态性状对体质量的影响程度。结果表明,4个数量性状两两间呈正相关,其相关系数达到极显著水平（P〈0.001）。形态性状与体质量间,壳长对体质量的相关系数较高,壳宽对体质量的相关系数较小。通径分析显示壳宽对体质量的通径系数最小,除7月龄外,壳高对体质量的通径系数大于壳长。相关指数分析的结果与通径分析结果相似,形态性状对体质量的相关指数为0.910～0.943。经多元回归分析,建立了4个月龄时期壳高、壳长和壳宽对体质量的线性回归方程。研究表明,在6月龄后以壳高为主要选择指标,可达到对体质量的选择,研究结果为华贵栉孔扇贝选择育种中选育指标的确立提供了理论指导。  相似文献   

浅海远岸水域筏养栉孔扇贝数量性状的相关性及通径分析     

王光花  蒋增杰  方建光 《现代农业科技》2011,(19):327-328,330

随机选取76个浅海远岸水域浮筏养殖的体型规则的2龄栉孔扇贝测定其壳宽、壳长、壳宽、总干重,计算相关系数,采用通径分析方法计算了以贝壳性状为自变量对总干重作依变量的通径系数、决定系数及相关系数,对各性状的影响大小进行剖分,明确影响远岸水域浮筏养殖的栉孔扇贝总干重的主要外部形态性状。结果表明:所测各表型性状与总干重之间的相关系数均达到极显著水平(P<0.01);壳长是主要影响因素,通过与壳高的协同作用影响总干重;所选表型性状对总干重的回归系数R2=0.737,表明所选性状是影响体重的主要性状。利用逐步回归分析方法建立以壳高、壳长、壳宽为自变量估计总干重的多元回归方程:Y=-39.582+2.977 X1+2.061 X2+11.181 X3。  相似文献   

Foxl2基因在栉孔扇贝发育过程中的表达图式     

刘晓玲  刘建国  王丹  张子炎  张志峰 《中国水产科学》2013,20(1):205-210

Foxl2基因在哺乳动物中是雌性相关基因,参与卵巢发育和功能维持。本研究利用荧光定量PCR和原位杂交技术,对栉孔扇贝(Chlamys farreri)foxl2(Cf-foxl2)在发育过程中的表达图式进行了分析。研究发现Cf-foxl2在受精卵中呈低水平表达,随着发育进行表达量增高,D形幼虫期表达量最高,之后表达量迅速下降。原位杂交结果显示Cf-foxl2表达量在担轮幼虫之前在体内均匀分布;强阳性信号在担轮幼虫口凹附近呈对称分布;至D形幼虫期强阳性信号主要集中在内脏团和外套膜边缘处;之后信号消失,直到性别分化后在卵巢中再次出现。本实验结果暗示Cf-foxl2与卵巢发育相关,鉴于该基因在发育早期的持续性表达特征,暗示其可能参与栉孔扇贝的早期发育过程。  相似文献   

栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒巢式PCR检测方法的建立   总被引：2，自引：1，他引：1  

李晨  王崇明  曲朋  黄倢 《水产学报》2013,37(2):281-287

为更好地实现对养殖海区栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)的快速诊断和分子流行病学的调查,以及AVNV的疫情监测,选择AVNV全基因组序列中的保守区段,应用Accelrys gene 2.5软件设计一对巢式引物,用于AVNV的检测.结果显示,引物的扩增片段分别为979和548 bp.实验优化了PCR体系中Mg2+和dNTPs浓度及扩增程序中的退火温度,并建立了完善的AVNV巢式PCR检测技术.研究表明,该PCR检测技术具有较高的敏感性,可稳定检测出5 pg扇贝样品组织总核酸中5×10 copies的病毒粒子.  相似文献   

两个海区栉孔扇贝感染AVNV的比较分析     

杨彩霞  李赟  王崇明  曲朋  黄倢 《水产学报》2013,37(10):1579-1584

急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)是一种能导致栉孔扇贝大规模死亡的DNA病毒,研究通过检测不同养殖模式和不同苗种来源的栉孔扇贝样本携带AVNV的情况,以寻找合理的养殖模式和苗种,降低疾病的发生。以扇贝单一养殖的青岛流清河海区和贝藻间养的荣成桑沟湾海区为采样点,每月(2010年3月—2011年4月)定期采集2个海区野生苗养殖和人工苗养殖的栉孔扇贝样品各10只,共得到扇贝样本480只。取扇贝外套膜组织,提取DNA,采用巢式PCR检测扇贝感染AVNV的情况,并对2个海区2类栉孔扇贝AVNV感染率进行比较。结果显示,在2个海区的2类栉孔扇贝体内均检测到AVNV,流清河海区野生苗和人工苗养殖栉孔扇贝AVNV感染率分别为21.1%和18.9%,桑沟湾海区2类扇贝AVNV感染率分别为11.1%和5.6%;2个海区AVNV感染扇贝均集中在7、8月份,其中,流清河海区最高可达80%,桑沟湾海区最高仅40%。研究表明,贝藻间养和选用人工苗能有效减少AVNV对养殖扇贝的感染,是控制养殖扇贝发病死亡的有效措施。  相似文献   

Gonadogenesis in scallop Chlamys farreri and Cf‐foxl2 expression pattern during gonadal sex differentiation          下载免费PDF全文

Xiao‐Ling Liu  Yun Li  Jian‐Guo Liu  Long‐Bo Cui  Zhi‐Feng Zhang 《Aquaculture Research》2016,47(5):1605-1611

Gonad development and sexual differentiation are important biological processes. More insight is needed in these processes to improve selection and breeding efficiency in the production of culture animals for monosex farm operations of commercially important shellfish species. Foxl2 is the earliest known sex dimorphic marker of ovarian differentiation in mammals, but studies on foxl2 in invertebrate species are rare. This study revealed the gonadogenesis and expression characteristics of foxl2 during the gonadal differentiation in the scallop Chlamys farreri, an important commercial mollusk in China. The result showed that C. farreri gonad becomes visible once juveniles reach a shell height of 5.5 mm. Sex can be distinguished based on gonad histology in animals with a minimum shell height of 9 mm. Expression of Cf‐foxl2 (C. farreri foxl2) was first observed in cytoplasm of ovarian germ and follicle cells, just after the initiation of ovarian differentiation. Results indicate that Cf‐foxl2 can be used as an early sex‐marker gene, and may have participated in the regulation of ovary differentiation in C. farreri.  相似文献