锦鲤保护性组织RNA提取及引物扩增研究   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

王亚军  刘必谦  吴立山  洪松柏 《水生态学杂志》2008,29(2):116-119

从养殖锦鲤各种组织中提取完整的RNA, 是分子生物学研究锦鲤应激表达、体色变异、生长发育等功能基因表达的关键实验。在不伤害养殖锦鲤个体健康的情况下, 取用鱼体的鳍条、鳞片、鳃丝、血液4种保护性组织,可以最大程度地减少对珍贵锦鲤个体的损伤, 并达到研究相关基因表达的目的。本研究利用TR izo l法提取RNA, 获得的各样品RNA条带完整、纯度高。结果表明, 4 种保护性组织提取的RNA 经过逆转录反应, 得到了高质量的CDNA。内标基因( B- actin)、热激蛋白基因( hsp70)、金属硫蛋白基因(MT)扩增得到清晰的条带, 通过NCB I数据上的BLAST比对证明, 各序列的同源性在95%以上。利用本研究的方法, 可以充分保护养殖锦鲤个体的完好性, 用于进一步的分子生物学研究。  相似文献   

鲫肠道上皮细胞原代培养方法的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

宋增福  吴天星  潘晓东 《淡水渔业》2008,38(1):67-69,34

探讨了健康鲫(Carassius auratus)幼鱼肠道上皮细胞的原代培养方法。结果显示,用含有抗生素、胶原蛋白酶Ⅰ、EDTA和胶原蛋白酶Ⅳ组成的D-Hanks液消化无菌分离的鲫肠道可以获得大量细胞团及绒毛隐窝;用含有抗生素、胎牛血清(FBS)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素的DMEM培养液进行培养,并根据肠道上皮细胞与成纤维细胞贴壁时间的差异进一步纯化,连续培养12d后可以得到纯化的肠道上皮细胞。  相似文献   

体重和温度对草鱼摄食小浮萍的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

张亚辉  龚江  梁杰锋  沈建忠  马徐发  胡莲  万成炎 《水生态学杂志》2018,39(1):56-62

研究草鱼(Ctenopharyngodon idella)对浮萍的摄食能力及主要影响因素,为合理利用草鱼控制小江回水区浮萍暴发提供依据。草鱼(体重29.7~491.2 g)取自红安县中海农业科技有限公司渔场,小浮萍种源采自重庆市云阳县高阳镇黄莲坝库湾。在试验室条件下研究了草鱼对小浮萍的最大摄食量、最大摄食率与体重和温度的关系。结果表明,在水温(25.82±0.57)℃条件下,随着体重的增加(40.36~478.17 g),草鱼的最大摄食量增大,但最大摄食率呈减小的趋势,两者与体重的相关关系分别为C_(max)=2.460W~(0.779),FR_(max)=246.0W~(-0.221);水温(16.55~30.50℃)对草鱼的最大摄食量和最大摄食率的影响极显著(P0.01),最大摄食量和最大摄食率与水温的回归方程分别为C_(max)=0.074T~(2.045),FR_(max)=0.164T~(1.940);建立的预测不同温度和体重条件下草鱼对小浮萍最大摄食率的模型为:FR_(max)=0.410T~(1.940)W~(-0.221)。  相似文献   

2株鲤鱼源乳酸菌体外抗逆性研究          下载免费PDF全文

单晓枫  孙烨林  张洪波  张喜宏  钱爱东 《水生态学杂志》2008,29(2):124-127

对2株鲤鱼源乳酸菌作为益生菌候选菌株进行体外抗逆性试验。通过耐受胆盐、耐受pH 值、耐受蛋白酶和耐高温等试验, 对这2株乳酸菌进行研究。其中在胆盐耐受性试验中, YL- 1和YL- 7在胆盐浓度0. 4%、培养4 h时仍有30%以上的存活率; 在pH 值耐受性试验时, 2株乳酸菌均可在一定的酸性和碱性条件下存活; 胰蛋白酶对2株菌的存活率没有影响; 在70e 的高温中, 2株乳酸菌均有一定的耐受性。  相似文献   

草鱼巨噬细胞的集结及相关的组织变化     

张奇亚  李正秋 《中国兽医学报》1999,19(5):504-507

给草鱼腹腔注射细微炭粒（墨汁）后不同时间取样，比较观察了草鱼胸腺、肝、脾、头肾和肾组织中巨噬细胞集结（ｍ ａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ ， Ｍ Ａ）状况及相应组织的变化。结果表明，在头肾和脾组织中， Ｍ Ａ 的数量和体积均较肝和肾中的多而大，胸腺中所产生的 Ｍ Ａ 数量较肝和肾中的少，体积也小；注射墨汁后 １～３ 周内，在胸腺、头肾、肝和脾组织中， Ｍ Ａ 的数量和体积均有不同程度的增加，但在注射墨汁后第 ４ 周的肾组织中， Ｍ Ａ 的体积缩小而且密度降低，同时肾组织结构有逐渐恢复的趋势，可能是由于 Ｍ Ａ 分解后通过肾小球和肾小管排泄到膀胱或体外的缘故。对草鱼 Ｍ Ａ 的组织分布、排除等分析认为， Ｍ Ａ 可作为草鱼非特异细胞防御作用的解剖学和细胞学的一种生物标记。  相似文献   

短时间微流水处理对异育银鲫肌肉品质的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

蔡礼彬  任章睿  吕昊  杜红英  刘茹  熊善柏 《华中农业大学学报》2020,39(4):128-136

采用微流水系统处理池塘养殖异育银鲫(Carassius auratus gibelio),测定不同处理时间(0～9 d)鲫肌肉的主要营养成分、滋味特征、气味特征和挥发性成分等参数,研究微流水处理对鲫肌肉品质的提升作用。结果显示,微流水处理对养殖鲫肌肉中水分、粗蛋白和粗脂肪含量的影响不大(P0.05),但对鱼肉中灰分、肌糖原和总糖含量及滋味、气味及感官评分有显著影响(P0.05)。随着微流水处理时间延长,鲫鱼肉中肌糖原、总糖含量显著下降,灰分明显增加(P0.05)。电子舌和电子鼻检测结果显示,微流水处理可显著改变鲫肌肉的滋味特征、气味特征。随着微流水处理时间延长,鲫肌肉中异味挥发物含量明显减少、鱼肉自身代表性风味物质含量明显增加,且蒸熟后鱼肉的气味、滋味、质地和总分等评分明显升高,微流水处理7 d的鲫肌肉的感官评分优于0、1、3、5 d样品的,而与微流水处理9 d的样品无差异。综上可见,短时间微流水处理(≤7 d)不影响鲫鱼肉中粗蛋白和粗脂肪含量,但可显著改善养殖鲫肌肉品质,其适宜处理时间为7 d。  相似文献   

利用紫苏子提取物作为异育银鲫饲料添加剂的生产试验     

吕耀平  王小芬  张小平 《中国饲料》2007,(8):32-33

通过在异育银鲫饲料中添加300mg/kg紫苏子提取物,经随机抽取两处10口池塘,计算同期池塘应用及未应用紫苏子提取物添加饲料池塘投入产出情况:应用紫苏子提取物作为添加剂的池塘,异育银鲫增重率比未使用紫苏子提取物的池塘高9%～15%;饲料系数下降11.4%～11.8%,异育银鲫重量增长了50～99kg/亩,产值增长680～853元/亩。  相似文献   

Essential oil of Aloysia citriodora Paláu and citral: sedative and anesthetic efficacy and safety in Rhamdia quelen and Ctenopharyngodon idella     

《Veterinary anaesthesia and analgesia》2022,49(1):104-112

ObjectiveTo verify the efficacy of citral in inducing sedation and anesthesia in silver catfish (Rhamdia quelen) and grass carp (Ctenopharyngodon idella) and to assess the safety of essential oil (EO) of Aloysia citriodora and citral in inducing and maintaining anesthesia in silver catfish.Study designClinical study, randomized, parallel, multi-arm with control group in target species.AnimalsA total of 96 juvenile and 72 adult silver catfish and 80 juvenile grass carp were used.MethodsSilver catfish and grass carp were exposed to different concentrations of citral, 15–675 and 15–600 μL L^–1, respectively, during the maximum period of 30 minutes to verify sedation and anesthesia induction and recovery times. In addition, for anesthetic induction, silver catfish were exposed to the EO of A. citriodora and citral at 225 μL L^–1 for 3.5 minutes. Then, fish were transferred to an anesthesia maintenance solution at 50 μL L^–1 for 10 minutes to assess hematologic and biochemical variables at 60 minutes, 2 and 6 days after treatment.ResultsCitral only induced sedation from 15, 25 and 40 μLL^–1 in both species. Anesthesia without mortality was induced in silver catfish at 50–600 μL L^–1 and grass carp at 75–450 μL L^–1. At 675 and 600 μL L^–1, mortality was recorded in silver catfish and grass carp, respectively. The EO of A. citriodora and citral were safe in inducing and maintaining anesthesia in silver catfish, with mean corpuscular hemoglobin concentration being the only variable that varied in relation to time and treatments.Conclusions and clinical relevanceCitral was effective in inducing sedation and anesthesia in both species. In addition, A. citriodora EO and citral were safe in inducing and maintaining anesthesia in silver catfish. Both agents are promising substances for the development of new drugs for fish.  相似文献   

纳米氧化物对美托洛尔生物富集的影响研究     

卢媛  宋琪  许佳瑶  孙红文 《农业环境科学学报》2022,41(3):455-463

为揭示氧化物纳米颗粒（NPs）对离子型有机污染物在水生生物体内富集的影响,本研究考察了两种典型的氧化物NPs对鲤鱼富集β-阻断剂美托洛尔的影响以及美托洛尔在鱼体内各部位的分布,并通过批平衡实验进一步探讨了吸附解吸与生物富集的关系。结果表明：NPs共暴露时,在摄取阶段结束时美托洛尔生物浓缩因子（BCF）值增加了2.39倍（TiO₂ NPs）和3.49倍（SiO₂ NPs）。净化阶段鱼体内的美托洛尔半衰期由20.09d缩短到8.39d（TiO₂ NPs）和6.13d（SiO₂ NPs）,净化结束时鱼体内的美托洛尔残余浓度则略有升高。NPs的共暴露未改变鲤鱼摄取美托洛尔的途径,但显著升高了鱼鳃和内脏中美托洛尔的浓度。相对于TiO₂ NPs,SiO₂ NPs对美托洛尔具有更强的、且不可逆的吸附,使用Freundlich模型拟合的lg K_F值分别为2.21（TiO₂ NPs）和4.47（SiO₂ NPs）。研究表明NPs能够通过吸附载带促进鱼体对美托洛尔的富集,吸附态美托洛尔主要通过摄食和鳃的呼吸作用随NPs进入鱼体内,由NPs携带进入鱼体内的美托洛尔一部分发生解吸从而被鱼体利用,未发生解吸的部分随NPs的排出被排出体外。  相似文献   

草鱼IFNa和IFNd重组蛋白表达、纯化及单克隆抗体制备     

王梓璇  贾钊  邬恺正  朱晓真  王俊亚  冯浩  邹钧 《水产学报》2022,46(11):2053-2065

为系统研究草鱼I型干扰素的合成、分泌和免疫功能,本研究在大肠杆菌中表达并提纯了草鱼IFNa（CiIFNa）和IFNd（CiIFNd）重组蛋白。将CiIFNa和CiIFNd成熟肽分别克隆到pET-21d或pEHISTEVb表达载体上,并转化到大肠杆菌中;IPTG诱导表达得到CiIFNa和CiIFNd成熟肽的包涵体,经过盐酸胍变性、蛋白复性和浓缩后,利用AKTA分子筛层析获得了纯度较高的重组蛋白。用重组蛋白免疫小鼠,通过PEG法诱导得到杂交瘤细胞;将稳定分泌抗体的阳性细胞株的细胞悬液注射入小鼠腹腔,制备腹水抗体并进行纯化。本研究纯化了草鱼CiIFNa和CiIFNd各2株抗体,并采用SDS-PAGE、ELISA、Western blot和免疫荧光法对其进行了较全面的鉴定。研究结果表明CiIFNa和CiIFNd单克隆抗体特异性好、效价高,能够特异识别在大肠杆菌和真核细胞中表达的重组蛋白,且不存在CiIFNa和CiIFNd分子间的交叉识别。本研究制备的单克隆抗体为深入研究草鱼干扰素的细胞来源和蛋白表达规律奠定基础。  相似文献