牛蛙(Rana catesbeiana)蛙皮抗菌肽基因的克隆、测序及其表达   总被引：2，自引：3，他引：2  

韩俊友  乔红伟  赵瑞利  胡博  谢芳  王金玲  郑伟  雷连成  韩文瑜 《中国兽医学报》2007,27(3):399-402

利用RT—PCR的方法从牛蛙皮肤组织中克隆到大小为270bp的片段RCABP，将其克隆到pGEM—T载体，测序获得1个新的碱基序列。将此基因克隆到原核表达载体pQE一80L，获得融合表达质粒pQE一80L／DHFR／ABP，在1％IPTG诱导下进行表达。SDS—PAGE检测表明，重组蛙皮抗菌肽蛋白的表达量占菌体总蛋白的24％，以包涵体形式存在。体外抑菌试验表明，所构建的质粒能在大肠杆菌中表达具有体外抑菌活性的蛙皮抗菌肽，该融合蛋白具有良好的应用前景。  相似文献   

香根鸢尾挥发油的化学成分分析及抗菌活性研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

邓国宾  张晓龙  王燕云  林瑜  陈小兰 《林产化学与工业》2008,28(3):39-44

采用GC-MS技术分析了新鲜的和自然陈化的鸢尾挥发油的化学组成,确定了各种成分的化学结构与GC含量,并采用滤纸片琼脂平板扩散法与微量肉汤稀释法针对3种真菌和12种细菌(包括7种临床致病菌)进行了挥发油的药敏实验。结果表明:新鲜鸢尾挥发油共鉴定出26种成分,占总峰面积的92.09%,由醛类、酮类、酸类、酯类等化合物组成,其中十四酸(31.77%)、己酸(15.33%)、3-甲基丁酸(12.20%)、戊酸(9.29%)、庚酸(7.91%)、3-甲基戊酸(7.25%)、辛酸(2.44%)、2,4′-二羟基-3′-甲基苯乙酮(1.04%)是主要成分;自然陈化3年鸢尾挥发油共鉴定出45种成分,占总峰面积的85.63%,主要由醛类、酮类、酸类、酯类、醇类、酚类等化合物组成,其中十四酸(28.02%)、十四酸乙酯(10.42%)、(Z,Z)-9,12-十八碳二烯酸(7.67%)、十二酸(6.41%)、己酸(5.14%)、十六酸(4.44%)、十二酸乙酯(4.09%)、亚油酸乙酯(3.87%)、十六酸乙酯(3.13%)、油酸乙酯(2.85%)、6-甲基-α-紫罗兰酮(1.39%)、n-癸酸(1.31%)是主要成分;新鲜鸢尾挥发油对大部分微生物均具有很好的抗菌作用,其最低抑菌浓度(MIC)为0.25g/L,最低杀菌浓度(MBC)为0.35g/L;自然陈化3年鸢尾挥发油对大部分微生物均具有很好的抗菌作用,其MIC为0.05g/L,MBC为0.08g/L。  相似文献   

粘粒含量——夏季风的良好替代指标   总被引：8，自引：1，他引：7  

管清玉  潘保田  高红山  王勇  王均平  苏怀 《干旱区资源与环境》2004,(Z2)

通过对位于东亚季风区尾闾部位的沙沟剖面、东部半湿润区王官剖面、东部湿润区扣马剖面的气候代用指标的分析发现 ,黄土地层中 <5 μm的粘粒含量指标对各剖面中黄土-古土壤序列指示得比较清晰 ,可以较好地反映东亚夏季风的变化。对黄土地层中粘粒含量的测试及其环境意义分析以及与经典的东亚夏季风的替代指标———磁化率、红度指标 (a )的对比分析发现 ,粘粒含量指标的意义比较明确 ,适应范围更广 ,灵敏性也较高 ,是一比较可靠的、新的东亚夏季风的良好替代指标。  相似文献   

路易斯安娜鸢尾组培工厂化生产技术研究     

刘慧春  朱开元  周江华 《北方园艺》2010,(20)

研究了路易斯安娜鸢尾组培工厂化生产技术。结果表明:工厂化苗木生产主要采用抑菌剂结合传统消毒方法进行脱毒、试管增殖、田间扩繁相结合的方法,壮苗期间同时生根,简化了组培程序,缩短了育苗周期,降低了生产成本。苗木移栽成活率达到98%以上,每年可生产优质无菌鸢尾苗30万株。  相似文献   

Mature-plant resistance of potato plants against potato virus YO (PVYO)     

R. Sigvald 《Potato Research》1985,28(2):135-143

Summary Mature-plant resistance of potato plants against potato virus Y^O (PVY^O) was studied in field experiments in 1976–1979 in southern Sweden. At intervals of 7 days, from mid June until mid August, PVY^O was mechanically inoculated to one well-developed upper leaf per stem of each plant. Each week, a new group of plants were inoculated. In 1976–1977, the natural spread of PVY^O by aphids was studied in relation to three different stages of potato plant development. The results of mechanical inoculation demonstrated that mature-plant resistance increases during July in southern Sweden but there were great differences between developmental stages. Early planting with sprouted seed resulted in plants with a considerable mature-plant resistance in mid July when late developed potato plants still were very susceptible.

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Zusammenfassung In Südschweden wurden zwischen 1976 und 1979 Untersuchungen durchgeführt, um zu prüfen, wann und in welchem Mass die Sorte Bintje im Sommer eine Altersresistenz gegen das Kartoffelvirus Y^O (PVY^O) ausbildet. 1977 wurden drei Gruppen von Kartoffelpflanzen unterschiedlicher Entwicklungsstadien mit PVY^O mechanisch inokuliert und von Mitte Juni bis fast Mitte August wurden jede Woche neue Gruppen von Pflanzen inokuliert. Nach der Ernte Anfang September wurden die Knollen auf PVY^O geprüft. Ebenso wurde die natürliche übertragung von PVY^O durch L?use von PVY^O-Infektorpflanzen auf benachbarte gesunde Pflanzen in drei verschiedenen Entwicklungsstadien untersucht. Die Ergebnisse der mechanischen Inokulation von Kartoffelpflanzen-früh und normal entwickelt-zeigen, dass die Altersresistenz der Sorte Bintje im Juli anstieg und Anfang August fast vollst?ndig ausgebildet war. Wurden die Kartoffeln sp?t gepflanzt, waren die Pflanzen Ende Juli noch sehr anf?llig für eine mechanische Inokulation und ein grosser Teil der Knollen war PVY^O-infiziert (Abb. 1, Tab. 2). Die natürliche übertragung von PVY^O bei verschiedenen Entwicklungsstadien der Pflanzen zeigte, dass die Zahl PVY^O-infizierter Knollen anstieg, wenn die Kartoffeln sp?t im Vergleich zur normalen Pflanzzeit gelegt wurden, mit und ohne Vorkeimung (Tab. 3). Die st?rkere Ausbreitung von PVY^O im Jahr 1976 gegenüber 1977 (Tab. 3) k?nnte mit dem st?rkeren Auftreten und der früheren Ausbreitung der L?use, vor allem vonRhopalosiphum padi (Tab. 4), im Jahr 1976 in Beziehung stehen.

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Résumé Des expérimentations sont menées dans le sud de la Suède entre 1976–1979; elles ont pour but de déterminer à quel moment et jusqu'à quelle limite des plantes de la variété Bintje présentent la résistance à maturité vis-à-vis du virus Y^O (PVY^O) au cours de l'été. En 1977, trois groupes de plantes à différents stades de développement sont inoculés mécaniquement avec PVY^O et chaque semaine, de la mi-juin à la mi-ao?t, de nouveaux groupes sont inoculés. Après la récolte, début septembre, des tubercules sont indexés pour déterminer PVY^O. La dissémination naturelle de PVY^O par les aphides, est également étudiée à partir de plantes-sources de PVY^O vers des plantes voisines saines, présentant trois différents stades de développement. Les résultats de l'inoculation mécanique de plantes à deux stades de développment précoce et normal, montrent que la résistance à maturité augmente pendant le mois de juillet pour la variété Bintje et est pratiquement totale vers le début du mois d'ao?t. Lorsque la plantation est tardive, les plantes sont encore très sensibles à l'inoculation mécanique et une forte proportion de tubercules est contaminée par PVY^O (figure 1, tableau 2). La dissémination naturelle de PVY^O pour des plantes à différents stades, montre que la proportion de tubercules atteints de PVY^O augmente lorsque les tubercules sont plantés tardivement par rapport à la date normale, avec ou sans prégermination (tableau 3). La dissémination plus importante de PVY^O en 1976 par rapport à 1977 (tableau 3) pourrait être correlée à celle des aphides également plus importante et plus précoce en 1976, notamment celle deRhopalosiphum padi (tableau 4).

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Study on the Anti-Escherichia coli Activity and Mechanism of Water Extract of Radix isatidis Powder     

JIANG Xiaowen  YAN Ge  LI Shuhong  YU Wenhui  WEI Jiayu  AI Liwen  BAI Wen 《中国畜牧兽医》2007,47(9):2968-2978

In order to explore the antibacterial activity and mechanism of the Radix isatidis powder water extract,the effects of the Radix isatidis powder water extract on the morphology and structure of Escherichia coli (E.coli) were tested by scanning electron microscopy and transmission electron microscopy.The effects of the Radix isatidis powder water extract on the conductivity and total leakage rate of E.coli and the content of alkaline phosphatase in the culture medium of the content of protein,DNA and RNA were stained by DAPI to detect the effect of the Radix isatidis powder water extract on the nucleic acid of E.coli,and the effect of the Radix isatidis powder water extract on the metabolism of E.coli in vivo,in vitro,ALT,AST,pyruvic acid and ATP.The results showed that after the Radix isatidis powder water extract acted on E.coli for 10 h,it was observed by SEM that the bacteria appeared to overflow and shrink,the length of the bacteria became shorter obviously,many residues were formed due to breakage,some of them were sunken in the middle and deformed.Under TEM,it was observed that the boundary of the cell wall of E.coli was unclear,the wall membrane was zigzag,deformed and some of the bacteria were broken.The protein content outside the cell was significantly different from that in the blank control group from 8 h (P<0.01), and that in the cell from 4 h (P<0.01). DNA content had no significant difference with blank control group before 12 h (P>0.05), but had significant difference with blank control group from 16 h (P<0.01); RNA content began to decrease at 8 h, and was significantly different from blank control group at 12 h (P<0.05), and was extremely significant from 16 h (P<0.01). There was no significant difference between ALT and AST (P>0.05). The pyruvate content in culture medium and bacteria was higher than that in blank control group, and the difference was very significant from 4 h (P<0.01). The ATP content in the culture medium was significantly different from that in the blank control group (P<0.01), and the ATP content in the cell was significantly different from that in the blank control group from 4 h (P<0.01).In conclusion,the Radix isatidis powder water extract could inhibit the synthesis and metabolism of bacterial genetic material and the content of pyruvate and ATP by destroying the integrity of cell wall and cell membrane.  相似文献   

Morphological disparities in the epidermal and anatomical features of the leaf among wild Brassica juncea populations     

CHAOHE HUANGFU  XIAOLING SONG  SHENG QIANG 《Weed Biology and Management》2009,9(3):234-242

In the present article, we investigated the epidermal and anatomical features of 10 wild Brassica juncea populations with different susceptibilities to glyphosate in detail. The characteristics of the leaf surface and anatomy could affect the efficacy of glyphosate uptake in weeds through the influence of its adherence and penetration. Our results showed that herbicide-resistant wild populations generally had greater leaf thickness, adaxial cutin thickness, and trichome density in the upper epidermis, but lower spongy tissue thickness and vascular bundle numbers, as compared with the susceptible populations, suggesting that differences in morphological traits among populations might contribute to their variable response to glyphosate. The possible morphological involvement in the differential susceptibility of wild B. juncea populations to glyphosate also was discussed.  相似文献   

鸡肠道抗菌肽的提取及活性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

谭淑樱  王海英  祁克宗  彭开松 《水禽世界》2009,(7):3-6

取新鲜鸡肠黏膜超声波破碎,乙酸浸提,经Sephadex G-50层析后,收集具有抑菌活性的组分进行超滤离心,抑菌实验表明滤过物具有抑菌活性.滤过物经SDS-PAGE分析为一个条带,分子量约为6.078KD,得到电泳纯的鸡肠道抗微生物肽.该肽具有一定的耐热性,但经90℃以上热处理后活性下降较大;pH值对其活性影响较大,在pH6～8时活性最强.  相似文献   

抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用     

李会  熊静  梅翠  王士源  周洋  李晓芬  付贵花  张阳  程鹏  何玉张  陈红伟 《畜牧兽医学报》2022,53(5):1576-1586

旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性的影响,考察其稳定性;通过在6孔细胞培养板中构建铜绿假单胞菌(PAO1株)成熟生物被膜,以人源抗菌肽LL-37和3种抗菌药为对照,采用结晶紫染色法检测生物被膜量,平板菌落计数法对生物被膜活菌数进行计数,苯酚-硫酸法结合Folin-酚试剂法检测生物被膜胞外基质含量,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察CRAMP干预PAO1生物被膜形态学的变化。结果显示,CRAMP在所测试浓度下对兔血红细胞溶血率均<2%;在62.5~125 mg·L^-1时对 RAW264.7没有细胞毒性。温度(25~100 ℃)、两种盐离子(Na⁺、K⁺)以及pH为5~10时对CRAMP的抗菌活性没有影响;胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶均不同程度影响了CRAMP的抗菌活性。6孔细胞培养板中,4倍MIC 的CRAMP极显著降低了PAO1生物被膜量(减少率为76.74%,P<0.01),极显著减少了生物被膜中的活菌数量(减少了1.2个CFU·mL^-1,P<0.01),效果优于LL-37和3种抗菌药。CRAMP组的胞外基质显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05)。CLSM结果显示：与对照组相比较,4MIC浓度下,CRAMP组的细菌总荧光强度(PI+SYTO)显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05);与空白对照组相比,CRAMP组和LL-37组的死菌荧光强度/活菌荧光强度比值 (PI/SYTO)均极显著增大(P<0.01)。综上表明,CRAMP具有低溶血性、低细胞毒性,除蛋白酶作用不稳定外,具有较好的稳定性,对PAO1成熟生物被膜具有明显的清除作用,且效果优于LL-37,具有良好的药物开发前景。  相似文献   

生物反应器培养BHK-21悬浮细胞增殖伪狂犬病病毒工艺优化     

王家敏  李自良  马芳芳  康碧静  田玲  李倬  马忠仁  乔自林 《畜牧兽医学报》2022,53(11):3936-3947

旨在筛选伪狂犬病病毒（PRV）敏感的BHK-21细胞并分析其生长和病毒增殖特性,优化反应器中BHK-21悬浮细胞的培养和病毒增殖条件,建立生物反应器培养BHK-21悬浮细胞增殖PRV工艺。本研究利用响应面和单因素优化法,以细胞生长动力学特性、TCID₅₀病毒滴度等参数为指标,优化1.2 L生物反应器中BHK-21悬浮细胞的最佳培养和增殖病毒条件,在5 L生物反应器中进一步批培养验证。结果显示,筛选获得PRV高敏感的BHK-21-02贴壁细胞和BHK-21-XF02悬浮细胞各1株,BHK-21-XF02悬浮细胞在含3%血清的SLM-BHK低血清培养基和SFM-BHK无血清培养基中均能实现良好的生长和病毒增殖。利用响应面法优化得到1.2 L反应器最佳培养条件为接种密度1.20×10⁶cells·mL^-1、搅拌转速120 r·min^-1、DO值40%,5 L反应器批培养72 h细胞密度可达（7.61±0.18）×10⁶ cells·mL^-1、细胞活率为（96.93±1.18）%。利用单因素法优化得到1.2 L反应器最佳病毒增殖条件为MOI 0.001、培养温度37℃、细胞密度2.0×10⁶cells·mL^-1、搅拌转速80 r·min^-1,5 L反应器批培养接毒后48 h病毒滴度达到最大值（7.13±0.11） lgTCID₅₀·mL^-1。本研究可为PRV疫苗相关研究和规模化生产提供参考。  相似文献