一株无血凝性兔出血症病毒的分离鉴定及其衣壳蛋白VP60基因的克隆和序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

田浪  王红宁  李建文  廖娟  张夏兰  周万蓉  王鸿宾 《畜牧兽医学报》2006,37(10):1078-1083

从临床病料中分离鉴定出1株无血凝性的致病性兔出血症病毒（RHDV），命名为Yaan-1。HA试验测得该毒株原代及经兔体传3代后的肝毒在25℃、37℃和4℃时均无血凝性；但在琼脂扩散试验和对流免疫电泳中均可见分离株与常规RHDV高免血清形成清晰的沉淀线；电镜观察可见30nm左右的病毒粒子。采用RT-PCR方法将Yaan-1株的衣壳蛋白VP60基因进行了克隆测序，序列分析表明VP60基因序列全长1740bp，编码579个氨基酸，测序结果提交GenBank（注册号为DQ069280），并与世界各国的常规RHDV分离株进行比较，结果表明核苷酸同源性为90．0％～98．0％，氨基酸同源性为94．1％～99．0％，氨基酸变异多发生在衣壳蛋白C、E区；同时对Yaan-1株的分子量、等电点、疏水性、跨膜区等分子结构特征进行了分析。本研究首次报道了无血凝性RHDV中国分离株，丰富了地方毒株资源，为明确我国地方株的分子流行病学，以及对VP60蛋白分子特征研究提供了新材料。  相似文献   

实时荧光定量PCR技术研究进展及应用   总被引：12，自引：1，他引：12  

张贺  李波  周虚  谭建华 《动物医学进展》2006,27(Z1):5-12

实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)技术是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术.它利用荧光实时检测PCR反应,具有灵敏度高、特异性强、节约时间等优点.文章就常用的4种方法,即DNA结合染色、水解探针、分子信标和杂交探针的原理和特点进行介绍,同时综述了荧光定量PCR技术在实践中的应用.  相似文献   

猪生殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT—PCR检测方法的建立     

《中国兽医科技》2006,36(2):98-102

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鸡病毒性关节炎病毒C-98分离株S1基因的克隆与序列分析     

常继涛关平原  乌日罕马立峰于富丽  特木尔巴根 《中国兽医科技》2006,36(4):287-291

提取鸡病毒性关节炎病毒（AVAV）内蒙古分离株（C-98株）总RNA，参考GenBank中禽呼肠孤病毒（ARV）S1133株S1基因序列设计了2对引物，应用RT—PCR技术扩增了病毒S1基因，将S1基因cDNA克隆到pGEM—T Easy载体后测序。将测定序列拼接后与参考毒株ARV-176、ARV-138、ARV-S1133、MDRV—YJL的S1基因序列进行了比较。结果显示，AVAV C-98分离株的S1基因与强毒株ARV-176株的同源性最高，达99．9％；与MDRV—YJL的同源性为99．3％，与弱毒疫苗株ARV—S1133的同源性也达97．9％；与ARV-138株的同源性最低，为81．2％。表明，AVAVC-98株与参考毒株的差异较小，与疫苗株ARV-S1133有很高的同源性。  相似文献   

Imported case of equine rabies in Finland: Clinical course of the disease and the antigenic and genetic characterization of the virus     

A.E. Metlin DVM  R. Holopainen MSc  S. Tuura  C. Ek-Kommonen DVM  A. Huovilainen PhD 《Journal of Equine Veterinary Science》2006,26(12):584-587

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禽呼肠孤病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

《中国兽医科技》2007,37(9):767-771

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牛疱疹病毒I型二重LUX荧光PCR鉴别检测方法的建立     

陈茹刘琳琳  曾彩云曾碧健 罗琼曹永长  毕英佐 《中国兽医科技》2007,37(11):944-949

采用LUX新型荧光PCR技术原理，建立了快速检测牛疱疹病毒I型（BHV-1）以及鉴别野毒感染和基因缺失疫苗免疫动物的二重实时荧光PCR方法。结果显示，该方法对多株BHV-1病毒均呈典型gE、gC双基因阳性反应，对其他常见动物疱疹病毒以及健康牛基因组DNA等均呈阴性反应；对细胞增殖病毒液的gE、gC双基因鉴别的检测敏感性可达0．4～O．04TCID50比常规PCR方法高100倍以上；对带毒牛血清、抗凝全血、牛新鲜精液和冷冻精液基因鉴别的检测敏感性分别达0．04TCID50、0．4TCID50、0．4TCID50和4TCID50。采用该方法从临床牛血样、鼻拭子样品中检出IBRV阳性样品，检测全程仅需约2h。对单基因克隆质粒的检测进一步证实该方法能特异地鉴定gE、gC基因，检测灵敏度分别达90、30拷贝。结果表明，该方法可应用于临床快速诊断BHV-1病毒感染，鉴别BHV-1病毒感染与对应的基因缺失疫苗免疫动物。  相似文献   

禽流感病毒和新城疫病毒二联RT-PCR检测方法的建立     

于洋  李敬双  徐长顺  吴健  周铁忠  于金玲  孙党章  史丽华 《动物医学进展》2006,27(4):84-86

参照国内外已发表的禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)的基因序列及其相关的RT-PCR检测方法,根据禽流感病毒M蛋白基因和新城疫病毒NP基因各设计一套特异性通用引物,扩增目的带分别为600bp和340 bp。通过对相关病毒检测,建立了AIV和NDV通用型二联RT-PCR检测方法。该方法具有快速、敏感、特异等优点,可为AIV和NDV的检测、流行病学调查及疫苗使用等奠定基础。  相似文献   

淫羊藿苷对大鼠腺垂体细胞合成分泌CTH的影响   总被引：2，自引：1，他引：2  

张森  于海峰  李晓艳  张贺  李波  王新  段小宇  韦旭斌  谭建华 《中兽医医药杂志》2007,26(1):17-19

通过腺垂体细胞的原代培养技术和半定量RT-PCR技术观察淫羊藿苷对大鼠腺垂体合成分泌GTH的影响。建立了腺垂体细胞总RNA的提取、FSH和LH特异基因的PCR扩增的体系和条件,并以β-actin为内参照与FSH和LH特异基因进行多重比较。结果淫羊藿苷能提高大鼠腺垂体细胞中GTHmRNA的水平,但并非与剂量呈线形关系,中剂量组(60μl/l)时大鼠腺垂体细胞中GTHmRNA的水平最高,与低剂量组(30μl/l)和高剂量组(100μl/l)差异显著。表明淫羊藿苷不但能通过直接作用与性腺来发挥“壮阳”的作用,而且其对垂体细胞也有刺激作用。  相似文献   

An epidemiological survey of Chrysanthemum chlorotic mottle viroid in Akita Prefecture as a model region in Japan     

Hideki Yamamoto  Teruo Sano 《Journal of General Plant Pathology》2006,72(6):387-390

In epidemiological surveys on Chrysanthemum chlorotic mottle viroid (CChMVd) in various chrysanthemums cultivated in Akita Prefecture, Japan, in 2002–2005, approximately 20% of cultivars harbored CChMVd, including more symptomatic types than nonsymptomatic. Large-flowered cultivars were less frequently infected than small-flowered and spray types. The number of CChMVd-infected chrysanthemums is increasing, and the disease is found throughout major chrysanthemum-producing districts. Chrysanthemums infected only with CChMVd, in general, had no noticeable symptoms of disease. Most of those dually infected with known viruses and/or viroid also had no symptoms characteristic of chlorotic mottle disease. The lack of noticeable symptoms in major Japanese cultivars may have resulted in the unnoticed spread of the viroid.  相似文献