新疆石河子市牛源大肠杆菌分离鉴定及对β-内酰胺类药物的耐药性分析     

许淑芸  何白雪  俞杰  马雪  胡晓彦  邹思颖  李劼  周霞  黄新  钟发刚  吴桐中  韩猛立  张星星 《中国动物检疫》2022,39(7):49-54

为调查石河子市牛源大肠杆菌对β-内酰胺类药物的耐药表型和耐药基因携带情况,采集健康牛群粪便,采用常规细菌分离鉴定方法并结合16S rRNA PCR检测方法进行分离鉴定;参考Clermont方法对分离菌株进行系统分子分群,采用PCR方法检测分离菌株的β-内酰胺类耐药基因blaCTX-M、blaOXA、blaSHV和blaTEM携带情况,通过K-B纸片法测定分离菌株耐药表型。结果显示：分离鉴定出100株牛肠道大肠杆菌分属于A、B1、C和F群;分离株对头孢唑林和阿莫西林的耐药率在50%以上,对氨苄西林、头孢氨苄与头孢吡肟的耐药率均在5%以下,所有分离株对头孢吡肟敏感;5株分离菌株检测到blaSHV基因片段,1株检测到blaCTX-M基因片段,所有菌株均未检测到blaOXA和blaTEM基因片段。结果表明,石河子市牛源正常大肠杆菌已少部分携带耐药基因,且对部分β-内酰胺类药物产生了耐药性。结果提示,应加快减抗政策的实施。  相似文献   

流产布鲁氏杆菌RB51疫苗对性成熟公牛和怀孕青年母牛的生物安全性试验     

钟发刚  王新华 《中国奶牛》2001,(3):22-24

选用6头3岁娟姗公牛和7头怀孕中期杂种青年母牛，采用标准幼牛剂量的流产布鱼氏杆菌RB51（RSB51）疫苗免疫后，检测菌落和菌群的情况。结果表明：试验牛中无一头分离出流产布鱼氏杆菌（SRB51）疫苗菌体，公牛的配种可靠性正常，母牛的状态正常。宰杀剖检后，从公牛、母牛包括胎儿的任何组织中均分离不到（SRB51）疫苗菌种，但血清学分析可检测到SRB51特异性抗体。（Am J Vet Res 1999;60:722-725）  相似文献   

减毒活病毒疫苗对妊娠母牛及其胎儿感染病毒性腹泻Ⅰ型病毒的保护试验     

钟发刚 《中国奶牛》1999,(4):22-24

试验选用1岁青年母牛18头，BVDV（牛病毒性腹写病毒）血清检测阴性，BVDV分离阴性。同条件饲养，随机抽取12头母牛注射BVDV1型减毒活病毒疫苗（含致细胞病变株），在怀孕7O～75天，鼻腔接种1型BVDV，试验组所有牛均做抗体检测，同时对流产胎儿做感染情况的检测。结果表明：BVDV1型致细胞病变株的减毒活病毒疫苗能够保护母牛及其胎儿抵抗异源性BVDV1型病毒的感染。预防和控制中BVDV感染的关键是消灭持续感染的牛。检测并淘汰持续感染的的牛，使用疫苗防止胎儿感染，是一项有效的控制措施。怀孕125天前的胎儿在子宫中感染非致细胞病的BVDV将造成胎儿的持续感染，BVDV经胎盘的的感染机理尚不清楚。血液中少量的该病毒将足以造成胎儿的免疫耐受，为了遏止子宫感染和持续感染造成的恶性循环，采用的基本方法是注射疫苗保护胎儿。许多试验已通过了疫苗对胎儿抵抗自然感染和人工感染BVDV的保护试验。大多数灭活苗无法给胎儿供有效的保护。本项研究报道是关于减毒活病毒疫苗对胎儿可提供有效的保护，但对照组并没有对怀孕母牛做有价值的攻毒试验。当前，美国准许使用的疫苗并不要求对胎儿提供保护。本项研究的目的是确定BVDV减毒活病疫苗对胎儿感染非致细胞病变的1型BWDV提供的免疫保护。  相似文献   

绵羊MOET育种计划生物技术匹配的模拟计算     

刘守仁  王新华  石国庆  杨永林  钟发刚 《新疆农业科学》2001,(Z1):12-15

动物胚胎移植首次成功距今已逾百年,而近20年来的进展最快.MOET(Multiple Ovulation and Embryo Transfer)育种计划是超数排卵和胚胎移植技术与核心群育种技术相结合的一项系统工程,应用于单胎动物在提高育种进展和育种效益方面具很大潜力.目前MOET技术作为一种较为成熟的生物技术已在动物育种中广泛应用.这一育种计划的实施不仅可以提高母羊的繁殖力和迅速增加优秀个体的数量,而且可通过同胞测定缩短世代间隔.MOET育种计划的成功实施,除需要高产优质母羊组成的核心群作为胚胎移植的供体外,还必须通过科学合理的组织调配,使一系列相关生物技术在时间、空间上实现有机匹配,以免发生箍木桶拼板的“短板”效应,造成生物技术条件、种质资源的溢失浪费.影响育种进展和育种效益.本文依据绵羊MOET育种核心群实践,探讨其相关生物技术步骤合理组合匹配模拟计算.  相似文献   

牛Th1/Th2型细胞因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用     

韩猛立  蔡日鹏  黄新  何延华  薄新文  钟发刚 《中国兽医学报》2011,31(4)

根据GenBank中牛Th1/Th2(BoTNF-α、BoIFN-γ、BoIL-2、BoIL-4、BoIL-6、BoIL-8、BoIL-10)型细胞因子的基因序列,在保守区设计并合成各自特异引物,并以牛3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)基因为内参,采用SYBR GreenⅠ染料以建立实时荧光定量PCR检测方法。将Th1/Th2型细胞因子基因克隆至pMD18-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR-GreenⅠ荧光定量RT-PCR标准曲线和溶解曲线,并做灵敏性、特异性和重复性试验。对建立的Th1/Th2型细胞因子SYBR-GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法进行分析,结果表明牛IFN-α、IFN-β、IFN-γ和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×101～1×108 copies/μL范围分别呈良好的线性关系,相关系数均大于0.991。溶解曲线分析表明产物为特异的单峰,具有较高的灵敏性和特异性,重复性较好。建立了检测Th1/Th2型细胞因子的实时荧光定量RT-PCR方法,为在mR-NA水平对牛Th1/Th2型细胞因子的定量分析奠定了基础。  相似文献   

绵羊BMPR-IB基因作为多胎性能的候选基因在肉用多胎品种选育中的应用研究   总被引：2，自引：2，他引：0  

钟发刚  王新华  李辉  刘守仁  杨永林  甘尚权  王建华  张永胜  何其宏  魏荣安 《中国草食动物》2005,25(4):6-7

以中国美利奴多胎细毛羊和南非肉用细毛羊为亲本，以BMPR-IB基因作为多胎性能的候选基因，进行多胎肉用品种的选育。通过对其后代多胎基因型检测分析表明：多胎这一性状的选择，符合孟德尔遗传规律，从而验证其多胎性状由一对多胎基因(FecB)控制。通过BMPR-IB基因分子标记辅助选择，多胎性状的选择仅需3个世代(3～6年)的时间就可以达到要求，对于肉用这一性状的选择，还有待于进一步选配选育。  相似文献   

绵羊生长激素(oGH)的分子克隆与序列测定   总被引：6，自引：0，他引：6  

刘守仁  王新华  钟发刚  沈敏  杨华  连宏军  薄新文 《中国兽药杂志》2003,37(6):8-10

本文旨在新疆绵羊生长激素(oGH)基因的克隆。从阿勒泰×中国美利奴杂交羊脑垂体细胞中提取总RNA,分离得到具翻译活性的mRNA。用RTPCR方法扩增出编码oGH的基因,长度为671bp。将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,回收纯化。采用PCR克隆试剂盒将扩增产物连接至pTAdv质粒上,经PstI和XbaI双酶切鉴定正反插入后,筛选正向插入阳性克隆,并进行序列分析。结果表明克隆到的oGH基因序列与国外报道的序列有4个碱基差异,但所推导的氨基酸序列完全一致。oGH基因的开放阅读框架共含654个核苷酸,编码217个氨基酸,其中信号肽26个氨基酸,编码碱基为1～78(78bp);成熟肽191个氨基酸,编码碱基为79～651(573bp);终止密码子TAG(652～654bp)。其蛋白质的氨基酸序列与牛、人和鱼的序列同源性分别为99.08%、26.7%和5.9%。  相似文献   

牛病毒性腹泻病毒与宿主细胞的相互作用研究     

韩猛立  黄新  宋天增  杨井泉  薄新文  钟发刚 《湖北农业科学》2012,51(8):1519-1523

自1946年Olafson等首次在美国纽约州发现牛病毒性腹泻病毒(BVDV)以来,该病毒在世界各地广泛流行和传播,尤其对一些畜牧业发达国家的奶业和牛肉业造成了巨大损失.了解牛病毒性腹泻病的致病机理,研制出更加安全可靠有效的疫苗,对控制该病的发生和蔓延尤为重要.对BVDV的病原学、生物学特性以及对宿主细胞的相互作用等进行了阐述,以期为BVDV的预防及治疗奠定基础.  相似文献   

捻转血矛线虫Hc38保守结构域的表达及对绵羊的免疫保护试验     

赵军明  荣光  王新华  薄新文  钟发刚 《中国预防兽医学报》2008,30(4):295-299

构建捻转血矛线虫Hc38保守结构域原核表达重组质粒pPROEXHTa-Hc38,在DH5a中经诱导表达约17ku的蛋白,表达产物通过Westem blot鉴定,然后将其产物纯化,复性后制备油佐剂疫苗免疫4月龄绵羊,结果表明：对照组与实验组比较,虽然雌虫数量未见减少,但两者荷虫量差异显著（P〈0．05）。  相似文献   

牛病毒性腹泻病毒新疆分离株E2基因的克隆及序列分析     

黄新  钟发刚  薄新文  杨华  郭燕  刘志强  王新华 《中国预防兽医学报》2008,30(7)

应用RT-PCR方法从牛病毒性腹泻病毒（BVDV）新疆石河子分离株、玛纳斯不同年份两个分离株扩增获得的3株BVDV的E2基因序列,分别命名Shihezi148、Manasi和MNS2（GenBank登录号：EU159699、EU159703和EU169937）。序列分析结果表明3株E2基因长度分别为1121bp、1122bp和1122bp,分别编码373、374和374个氨基酸残基。核酸序列同源性和系统发生分析表明,3株病毒均属于BVDV基因1型（BVDV-1）,Shihezi 148株与澳大利亚Bega株亲缘关系最近,同处于BVDV-1c基因亚型群,其E2氨基酸同源性为90.11%。Manasi株和MNS2株E2基因核酸序列仅有4个碱基的差别,它们与Changchun 184和匈牙利VEDEVAC株亲缘关系最近,位于BVDV-1b基因亚型群。Manasi和MNS2株与Changchun 184株E2氨基酸同源性分别高达98.66%和98.93%。  相似文献