应用属特异单抗和分属噬菌体鉴定沙门氏菌分离株的比较研究     

焦新安  文其乙  王怀茂  黄巍  张如宽  刘秀梵 《中国预防兽医学报》1996,(2)

本研究应用属特异单抗和分属噬菌体对102株疑似沙门氏菌分离株进行鉴定,并以标准程序作验证。结果表明,属特异单抗ELISA反应阳性的77株菌株中,76株为沙门氏菌,1株为弗劳地氏柠檬酸杆菌;而分属噬菌体O-I裂解阳性的74株细菌中,72株为沙门氏菌,2株为大肠杆菌,同时出现了漏检。这预示着属特异单抗试剂在沙门氏菌鉴定和快速检验中有很广阔的应用前景。  相似文献   

抗鸡白痢沙门氏菌单抗及其在鸡白痢病检疫中的应用研究     

焦新安  张如宽  刘秀梵 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》1992,(2)

应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了一组针对鸡白痢沙门氏菌O_9抗原的单抗。以单抗3-47-26酶结合物和鸡白痢沙门氏菌脂多糖抗原建立了一种抗体竞争ELISA试验以检疫鸡白痢病,该法通过样品抑制酶标单抗与LPS的结合,以检测鸡白痢抗体。试验结果表明,79份鸡白痢阳性血清具有显著抑制作用(95.0％±4.3％),而130份鸡白痢阴性  相似文献   

沙门氏菌快速检测试剂盒的研制及其应用     

文其乙  焦新安  刘秀梵  张如宽 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》1996,(2)

在建立直接ＥＬＩＳＡ方法基础上，首次研制出检测沙门氏菌的单抗快速检测试剂盒。对现场分离菌株进行的双盲考核试验共做２８０个菌株，两种方法的总符合率为９４．６％。以２０％的脱脂乳为冻干保护剂，经冻干后，其效价和物理性状最佳，试剂盒批内和批间重复试验的变异系数小于１０％，试剂盒的稳定性较好。采用本试剂盒检测了３０５９份人的粪样，检测出１６６份阳性样品，比市站多检出７２份阳性样品。在对６１９份肉样、６８８份鱼粉、６００份奶样、６２０份蛋样检测中，比常规国标方法多检出１００株沙门氏菌。因此，以直接ＥＬＩＳＡ为基础构建的快速检测试剂盒在沙门氏菌检验中，具有重要实用价值。  相似文献   

实验性鸡大肠杆菌病的免疫组化检测     

石火英  高崧  王宝安  许益民  张如宽  焦新安  万洪全  许金俊  刘文博 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2001,22(2):63-67

用致病性大肠杆菌 O1 8分离株和 /或低致病性禽流感病毒 (Mildly pathogenic avian influenza virus,MPAIV)接种 1 0～ 1 2日龄 SPF鸡 ,细菌接种后 1～ 96h对试验鸡的气管、肺、气囊、胸腺、法氏囊、脾脏、肝脏和肾脏的石蜡切片进行间接酶标抗体染色 ,发现大肠杆菌接种组、混合接种组的气管、肺在接种后 1 h可检测到细菌抗原 ,混合接种组检测到的细菌更多 ,存在时间更长。结果表明 :气管、肺和气囊是鸡大肠杆菌定居的场所 ;MPAIV可延长细菌在气管、肺和气囊中定居的时间 ,使鸡大肠杆菌病进一步加重  相似文献   

结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的真核表达及其牛结核病诊断价值评价     

时振华  孟闯  徐正中  万婷  单法  陈祥  焦新安 《农业生物技术学报》2015,23(2)

本研究旨在利用毕赤酵母(Pichia pastoris)系统融合表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的培养滤液蛋白10(culture filter protein 10,CFP10)和早期分泌抗原靶6蛋白(earlier secreted antigen target 6,ESAT6),并评价其作为牛结核病外周血γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)体外释放实验特异性刺激剂来诊断牛结核病的应用潜能.通过PCR扩增cfp1 0-esat6融合基因,构建pPICZα A-(cfp10-esat6)重组质粒,电转化毕赤酵母GSll5,添加甲醇至终浓度1.0％,诱导3d,取培养上清进行SDS-PAGE分析,镍离子金属螯合亲和层析柱纯化目的蛋白,Western blot分析重组蛋白的免疫反应性;取纯化的融合蛋白CFP10-ESAT6作为刺激剂用于牛结核病外周血IFN-γ体外释放实验,评价其牛结核病诊断价值.结果表明,目的蛋白(33kD)被成功分泌表达,该融合蛋白与抗CFP10、ESAT6、组氨酸标签和c-Myc4种单抗均发生特异性反应,具有较好的免疫反应性.165份奶牛外周血样品的IFN-γ检测结果表明,CFP 10-ESAT6融合蛋白与结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)作为刺激剂,二者阳性符合率为82.3％,阴性符合率为78.8％.本研究利用酵母表达系统成功表达CFP10-ESAT6融合蛋白,并表现出更高的生物学活性,在牛结核病外周血IFN-γ体外释放实验中可作为候选刺激剂,并能克服混合感染导致的PPD漏检问题,从而进一步提高检测的敏感性和特异性.  相似文献   

实验性鸡大肠杆菌病病理学动态变化   总被引：8，自引：2，他引：6  

石火英  高崧  王宝安  许益民  张如宽  朱坤熹  焦新安  陈义平  吴力力 《畜牧兽医学报》2002,33(5):508-512

用致病性大肠杆菌O18分离株和／或低致病性禽流感病毒（Mildly pathogenic avian influenza virus ,MPAIV)接种10－12日龄SPF鸡。在接种后1－96h进行临床症状与大体病理变化、组织学观察发现：大肠杆菌接种组、MPAIV接种组和健康接种组除扑杀鸡外未见鸡死亡，MPAIV与大肠杆菌混合接种组除扑杀鸡外死亡率为24％。混合接种组的病变比大肠杆菌接种组出现的时间早，恢复也慢，各脏器的病理变化更严重。MPAIV主要引起各实质器官的坏死，结果表明，大肠杆菌经气管内接种后试验鸡主要表现为呼吸道的炎症反应；MPAVI可使鸡大肠杆菌病严重化。  相似文献   

重组细菌疫苗载体的研究进展     

潘志明  张晓荣  焦新安 《畜牧兽医科技信息》2002,18(2):14-17

从卡介苗(BCG)、单核细胞增生性李斯特菌、沙门氏菌和志贺氏菌在实验动物模型上的研究结果看来,它们已有希望作为疫苗的载体.虽然它们在人类和灵长类动物上令人失望的研究结果阻碍了这种免疫预防策略的发展,但是由于细菌性DNA疫苗载体所取得的研究成果,使得人们近来对细菌疫苗载体的设计思路又重新发生兴越.本综述着重讲述细菌疫苗载体的优越性和局限性,并讨论这些疫苗运送系统的发展前景.  相似文献   

应用属特异单抗和分属噬菌体鉴定沙门氏菌分离株的比较研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

焦新安  文其乙 《中国畜禽传染病》1996,(2):5-7

本研究应用属特异单抗和分属噬菌体对１０２株疑似沙门氏菌分离株进行了鉴定，并以标准程序作验证，结果表明，属特异单抗ＥＬＩＳＡ反应阳性的７７株菌株中，７６株为沙门氏菌１－株为弗劳地氏柠檬酸杆菌，而分属噬菌体Ｏ－Ｉ裂解阳性的７４株细菌中，７２株为沙门氏菌，２株大肠杆菌，同时出现了漏检。这预示着属特异单抗试剂的沙门氏菌鉴定和快速检验中有很广泛的应用前景。  相似文献   

表达绿色荧光蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌感染动力学   总被引：1，自引：0，他引：1  

王芳  焦新安  刘文博  孟书霞  张如宽  刘秀梵 《中国兽医学报》2003,23(6):557-559

用表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550(pYAGFP)给BALB／c小鼠尾静脉注射和口服，时小鼠脏器进行细菌计数，并用间接ELISA法测定血清中抗细菌的抗体。结果表明，静脉注射重组菌的小鼠在肝脏、脾脏中重组菌数量有2个峰值，总的趋势是越来越少，而血清中抗体效价越来越高，可以初步推断，肝脏、脾脏中的细菌数量与血清中的抗体水平呈一定的相关性；口服重组菌的小鼠，在各脏器中重组菌的数量呈现正态分布的变化趋势，其中派伊尔结(Peyer’s patches，PPs)中细菌数量与血清中的抗体水平呈一定的相关性，而脾脏、肝脏及肠系膜淋巴结中细菌数量与血清中的抗体滴度无关。  相似文献   

沙门氏菌高分子量核DNA的提取     

蔡学忠  焦新安 《江苏农业研究》1996,17(1):76-76

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