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鸭β-防御素9基因的克隆、组织分布及其原核表达 总被引：4，自引：2，他引：2
【目的】从鸭组织中克隆鸭β-防御素9（AvBD9）基因,在原核表达重组鸭AvBD9蛋白;研究重组鸭AvBD9蛋白的体外抗菌活性与理化特性。【方法】采用RT-PCR法,从鸭肝脏组织中扩增鸭AvBD9基因,测定该基因在鸭各组织器官中的分布;将鸭AvBD9基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,构建重组表达质粒pGEX-duck AvBD9,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达;亲和层析纯化蛋白,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定重组鸭AvBD9蛋白的体外抗菌活性与理化特性。【结果】从鸭肝脏组织中克隆得到鸭AvBD9基因,序列分析表明该基因大小为204 bp,前体肽包括67个氨基酸残基。AvBD9基因在鸭体内广泛分布。SDS-PAGE电泳表明鸭AvBD9基因在大肠杆菌中高效表达,表达的重组鸭AvBD9融合蛋白以包涵体的形式存在,分子量约31 kD。重组鸭AvBD9蛋白对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽胞杆菌有抗菌活性,在-70～100℃或pH 3～10处理30 min后仍有抗多杀性巴氏杆菌作用。【结论】鸭AvBD9基因为204 bp,编码67个氨基酸残基,在鸭组织中广泛分布。重组鸭AvBD9蛋白基因在大肠杆菌中高效表达,该重组蛋白具有广谱的抗菌活性,对温度和酸碱性有较高的稳定性。 相似文献
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女贞子对蛋鸡育成期生长发育和免疫功能的影响 总被引：5，自引：3，他引：2
本研究旨在观察女贞子对蛋雏鸡生产性能和免疫功能的影响。试验选用1日龄海兰褐蛋雏鸡384只,随机分为4组,每组设6个重复。结果表明,女贞子对蛋鸡日增重、饲料转化率无显著影响;饲料中添加0.5%女贞子能显著提高雏鸡生长前期的法氏囊指数,添加1%的女贞子能提高雏鸡生长中、后期的胸腺与脾脏指数;女贞子能显著提高蛋雏鸡的新城疫抗体效价;女贞子对雏鸡生长前、中期的C3含量和生长中期的TNF含量有提高作用;女贞子能显著提高鸡外周淋巴细胞转化率。说明女贞子对蛋鸡育成期的生长发育和免疫功能有积极作用。 相似文献
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维生素抗冷应激的作用机制 总被引：1，自引：1，他引：0
在寒冷气候条件下,动物容易产生冷应激反应,导致其生产性能、繁殖性能、饲料消化率、免疫功能及抗氧化功能等下降,增加饲养成本,降低养殖业的经济效益。维生素具有免疫促进与抗氧化作用,能提高动物的免疫功能与抗氧化功能,调节动物自身的防御机能,改善冷应激下动物的抗氧化功能及肉品质量,提高抗应激能力,减轻冷应激的危害,使动物处于良好的生理状态,发挥最大的生产潜能。 相似文献
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女贞子、五味子、四君子汤、大豆黄酮和黄霉素对蛋鸡脂质稳定性的影响 总被引：6，自引：0，他引：6
试验选用51周龄海兰褐蛋鸡144只,随机分为6个处理组,试验1、2和3组分别添加1%的女贞子、五味子和四君子汤,试验4组添加10mg/kg的大豆黄酮,试验5组添加5mg/kg黄霉素,试验6组为对照组。研究中草药及大豆黄酮对蛋鸡脂质稳定性的影响及其机理,同时比较中草药、大豆黄酮和黄霉素的效果。设预试期1周,正试期为6周。结果表明:1)添加3种中草药和大豆黄酮均有降低蛋鸡组织、血清或蛋黄中脂质过氧化物含量的作用,其中3种中草药的作用明显优于大豆黄酮和黄霉素(P<0.05),黄霉素的作用不明显;2)中草药、大豆黄酮和黄霉素对超氧化物歧化酶活性没有显著提高(P>0.05),但能显著提高谷胱甘肽还原酶活性(P<0.05);3)3种中草药和大豆黄酮均可显著提高蛋鸡组织或血清中谷胱甘肽含量(P<0.05)。结论为:3种中草药和大豆黄酮均有增强蛋鸡抗氧化水平和脂质稳定性的作用;3种中草药的抗氧化作用优于大豆黄酮;黄霉素对蛋鸡的抗氧化机能没有影响。 相似文献
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重组鸡β-防御素6基因的表达和生物学特性的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过RT-PCR扩增出鸡β-防御素-6(AvBD6)基因.经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为204 bp,编码68个氨基酸残基.根据已发现的禽β-防御素和鼠β-防御素-6的氨基酸序列构建系统进化树.发现鸡AvBD6氨基酸序列与鸡AvBD7氨基酸序列同源性最高,为62.7%.将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,进行原核表达.SDS-PAGE电泳表明,表达的重组鸡AvBD6融合蛋白分子量约为32 ku.对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定.结果表明,重组鸡AvBD6融合蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌有较高抗菌活性,对大肠杆菌的抗菌活性较弱,对猪霍乱沙门氏菌无抗菌活性.重组鸡AvBD6蛋白对上述细菌的最小抑菌浓度范围为31.25μg/mL～250 μg/mL.此外,重组鸡AvBD6蛋白对温度和酸碱度有较高的稳定性. 相似文献
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中草药对鸡的抗热应激作用与抗氧化作用 总被引：5，自引：3，他引：2
本文综述了中草药对热应激鸡生产性能和免疫机能的影响 ,以及中草药的抗氧化作用与机理 相似文献
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【研究目的】旨在克隆与表达鸭β-防御素16（AvBD16）基因及测定其生物学特性,监测了鸭肝炎病毒感染后麻鸭不同组织AvBD16与TLR-7的动态变化。【方法】采用RT-PCR方法,从鸭骨髓组织中扩增到鸭AvBD16,并将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1 上进行原核表达,对其重组和合成蛋白进行生物学活性测定。采用荧光定量PCR方法,分别检测了鸭肝炎病毒对鸭AvBD16和TLR-7在不同组织中表达量的影响。【结果】鸭AvBD16 cDNA 大小为155bp,编码50个氨基酸残基,与鸡AvBD3氨基酸同源性最高,为62%。重组和合成鸭AvBD16蛋白对12种细菌均有不同程度的抑制作用,高盐浓度对其抗菌活性有一定影响,且溶血活性极低。重组AvBD16蛋白具有体外抗病毒活性。经鸭肝炎病毒诱导后,鸭AvBD16在肝脏及其他组织中被诱导表达或表达量显著上调,且与TLR7的表达量呈正相关。【结论】成功克隆并表达了鸭AvBD16基因,重组和合成AvBD16蛋白具有广谱的抗菌活性且不具有溶血特性。重组AvBD16蛋白具有抗鸭肝炎病毒的活性,体内抗病毒作用可能受TLR-7通路调节。 相似文献
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为研究鹅β-防御素1(AvBD1)的生物学特性以及初步尝试探寻其抗肠炎沙门菌的作用机理,利用RT-PCR方法从鹅骨髓组织中扩增到鹅AvBD1基因片段,并将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-goose AvBD1.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,重组鹅AvBD1蛋白在原核高效表达(相对分子质量约31 ku).该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性与理化特性.结果显示,鹅AvBD1基因cDNA片段大小为198 bp,编码65个氨基酸残基.经相似性分析发现鹅AvBD1氨基酸序列与鸵鸟AvBD1氨基酸序列相似性最高,为77.1％,而且重组鹅AvBD1蛋白具有广谱的抗菌活性,对12种细菌(包括革兰阳性菌和革兰阴性菌)均具有抑菌作用.高盐离子浓度显著降低重组鹅AvBD1蛋白的抗菌活性,且该重组蛋白的溶血活性极低.试验表明,肠炎沙门菌确实会诱导鹅AvBD1基因在鹅骨髓组织中的表达,说明鹅AvBD1起到了抗肠炎沙门菌感染的作用,而这种作用有可能与TLR4介导的信号转导有关. 相似文献