鸭β-防御素10基因的克隆、遗传进化分析及其生物学特性的初步研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

廖文艳  马得莹  王瑞琴  韩宗玺  邵昙昊  李慧昕  刘胜旺 《畜牧兽医学报》2009,40(9)

旨在从鸭肝脏组织中克隆鸭β-防御素10(AvBD10)基因,并在原核表达重组鸭AvBD10蛋白,研究重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性.试验采用RT-PCR法,从鸭肝脏组织中扩增鸭AvBD10基因,测定该基因在鸭各组织器官中的分布;将鸭AvBD10基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,构建重组表达质粒pGEX-duck AvBD10,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达;亲和层析纯化蛋白,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性.结果表明,鸭AvBD10 cDNA大小为169bp,编码55个氨基酸残基,与鸡AvBD10氨基酸同源性为85.5%.该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达.重组鸭AvBD10融合蛋白的分子量约为30 ku,重组蛋白占菌体总蛋白的34%.重组鸭AvBD10蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抗菌活性.结果,从鸭肝脏组织中扩增了鸭AvBD10基因,该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达.重组鸭AvBD10融合蛋白具有广谱抗菌活性,该重组蛋白对温度和酸碱度有很高的稳定性.  相似文献   

重组鸡β-防御素12蛋白的原核表达及其生物学特性分析     

马得莹  徐杨  李妍妍  徐倩倩  张婷婷  韩宗玺  刘胜旺 《东北农业大学学报》2014,(10)

为探讨鸡β-防御素12（AvBD12）的生物学特性,试验采用RT-PCR方法从鸡脾脏组织中扩增到鸡AvBD12基因,其cDNA大小为198 bp,编码65个氨基酸。将该基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pProex HTa上,进行原核表达。Tricine-SDS-PAGE电泳表明,重组鸡AvBD12融合蛋白分子质量约为14 ku。对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定,结果显示,纯化后的重组鸡AvBD12融合蛋白对金黄色葡萄球菌和兔波氏杆菌有较高抗菌活性,对猪霍乱沙门氏菌和乳酸菌的抗菌活性较弱。高盐浓度对其抗菌活性有显著影响。该重组蛋白对鸡红细胞无显著溶血活性。荧光定量PCR结果表明,AvBD12基因在所测定的15个鸡组织器官中均有表达。  相似文献   

铜对动物体内自由基防御系统酶活性及其基因表达的影响   总被引：7，自引：0，他引：7  

马得莹  单安山 《中国畜牧兽医》2003,30(5):27-29

作者简述了动物体内自由基的产生及其对动物体的损害，并较为详细地综述了高铜与低铜对动物体内铜锌超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、金属硫蛋白与铜蓝蛋白等自由基防御系统酶与蛋白酶的活性及其基因表达的影响。  相似文献   

中草药对正常和高温下蛋鸡生产性能和免疫功能的影响   总被引：11，自引：0，他引：11  

马得莹  单安山  刘玉芹  陈志辉  燕昌江  李焕江  李群道 《畜牧兽医学报》2005,36(3):235-239

研究了日粮中添加女贞子等4味中草药对正常和高温条件下蛋鸡的生产性能和免疫功能的影响。试验分2部分进行,第1期试验研究了日粮中分别添加女贞子等4味中草药对常温下蛋鸡的作用。试验选用51 周龄海兰褐蛋鸡144只,随机分为6个处理组,每处理4个重复,每重复 6 只鸡。试验 1~3 组分别添加 1%的女贞子、五味子和四君子汤,试验4组添加10 mg/kg的大豆异黄酮,试验 5 组添加 5 mg/kg黄霉素,基础日粮为对照组。设预试期1周,从52周龄开始正式试验,至57周龄结束,试验期6周。试验测定了蛋鸡的生产性能、免疫功能和2种血清激素水平。第2期试验研究了日粮中分别添加女贞子等4味中草药对高温条件下蛋鸡的作用。试验选用 58 周龄海兰褐蛋鸡96只,分组与测定指标同试验1,鸡舍内平均温度为(32±0 5)℃,相对湿度为50%~70%,试验期为4周。结果表明,4种添加剂对常温下蛋鸡的生产性能和血清激素水平没有明显影响(P>0 05),女贞子、五味子、四君子汤和大豆异黄酮能显著提高蛋鸡血清抗体水平与淋巴细胞转化率(P<0 05)。女贞子、五味子、四君子汤和大豆异黄酮能显著提高高温条件下蛋鸡的生产性能和免疫功能,降低血清中皮质醇含量,对雌二醇含量没有影响。  相似文献   

禽类实验动物发展的影响因素及对策(一)——国内外禽类实验动物的研究概况   总被引：1，自引：0，他引：1  

周琦  陈洪岩  马得莹 《畜牧兽医科技信息》2006,(12):21-23

从1789年Pasteur用鸡研究鸡霍乱开始,鸡作为实验动物已有几百年的历史,通过鸡验证了孟德尔的遗传定律,成功地研制出人类的第一个抗癌疫苗—鸡的马立克氏病疫苗。以鸡为代表的禽类实验动物具有繁殖快、卵生,体外孵化容易控制,试验成本低,一次可获得大量的鸡胚和胚胎细胞的特点,同时在胚胎期,鸡的免疫系统发育不全,鸡胚和鸡胚细胞适宜做多种病毒的培养基,用于禽病的病原学、流行病学、病理学和用于制备禽病诊断的检测试剂和疫苗生产等,用于疫苗的安全性及效力检验等,使禽类实验动物的应用十分普及。1国外禽类实验动物研究进展美国、日本、法…  相似文献   

鹅β-防御素基因克隆与生物学特性的初步分析   总被引：2，自引：1，他引：1  

周财源  蔺利娟  韩宗玺  邵昱昊  刘胜旺  马得莹 《畜牧兽医学报》2011,42(8):1193-1200

本试验采用RT-PCR方法,从鹅的骨髓细胞中扩增到禽p-防御素(AvBD)基因.测序结果表明,该基因的cDNA大小为201 bp,编码66个氨基酸.经遗传进化分析发现,该基因推导的氨基酸序列与鸡AvBD5的同源性最高,达84.8％.因此,将其命名为鹅AvBD5.进一步将该基因定向插入到pGEX-6p-1的EcoR Ⅰ和...  相似文献   

鹌鹑β-防御素10基因的克隆与表达及其体内分布的检测   总被引：1，自引：0，他引：1  

蔺利娟  王瑞琴  韩宗玺  邵昱昊  刘胜旺  程宝晶  孙黎  李子瑞  马得莹 《中国预防兽医学报》2011,33(7)

为测定鹌鹑β-防御素10 (AvBD10)体外抗菌活性及检测其在鹌鹑脏器组织的分布,本研究应用RT-PCR方法从鹌鹑肺脏组织中扩增到鹌鹑AvBD10,经序列同源性分析,鹌鹑AvBD10与鸡AvBD10的氨基酸序列同源性最高(83.8％).将该基因亚克隆到表达载体pGEX-6p-1中进行原核表达,SDS-PAGE电泳表明,鹌鹑AvBD10重组蛋白分子量约为31ku.该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性,结果显示,鹌鹑AvBD10重组蛋白具有广谱的抗菌活性.采用定量RT-PCR法检测到AvBD10在鹌鹑脏器组织中广泛表达.  相似文献   

影响畜产品质量与安全的营养因素及其调控技术   总被引：1，自引：0，他引：1  

单安山  李垚  马得莹  石宝明  李牧  庄滨峰  朱正鹏 《东北农业大学学报》2006,37(3):380-389

随着社会发展与人们生活水平的不断提高,人们对畜产品的质量与安全越来越重视。动物营养学的研究热点也逐渐转向研究如何通过营养调控的手段改善和提高畜产品质量与畜产品安全。文章介绍了与畜产品质量及安全相关的指标,如嫩度、系水力等。着重阐述了营养因素、饲养方式(限饲)和环境应激等因素对畜产品质量与安全的影响。最后阐述了如何通过营养调控手段改善畜产品质量与安全,以期为进一步深入开展肉质的营养调控研究提供参考。  相似文献   

鸡β-防御素基因的克隆、序列分析及其在组织中的分布   总被引：8，自引：1，他引：7  

马得莹  刘胜旺  李一经  单安山 《畜牧兽医学报》2008,39(8)

本研究采用RT-PCR法，分别从鸡肝脏和舌组织中扩增到鸡β-防御素（Gallinacin，Gal）Gal-6、Gal-8与Gal-9基因，经序列测定表明，Gal-6、Gal-8和Gal-9大小分别为201、204和201bp，其成熟肽分别由67、68和67个氨基酸残基组成。组织表达分析表明，Gal-6基因在鸡体内各组织器官中广泛地表达，在鸡皮肤、舌、心脏、小肠、胸肌、肝脏、肾脏、法氏囊、脾脏和胰腺中表达量较高；在肺脏、睾丸和骨髓中也有一定量表达。相比之下，Gal-8在鸡体内的表达较为局限，Gal-8基因仅在舌、小肠、肺脏和肝脏中大量表达。Gal-9基因在鸡体内组织中分布也较广泛，在舌和小肠中大量表达，在气管、肺脏、肝脏、肾脏、骨髓和胸腺有少量表达。  相似文献   

中草药对动物生长、内分泌和免疫功能的影响   总被引：24，自引：3，他引：21  

马得莹  单安山 《中国畜牧兽医》2004,31(1):16-19

作者综述了中草药添加剂对动物生长性能、内分泌、免疫功能、细胞因子活性和基因表达的影响.  相似文献