伪狂犬病及其对毛皮动物的影响研究进展     

李欣彤  刘昊  刘帅  闫喜军 《中国畜牧兽医》2016,43(9):2483-2489

自2010年以来,伪狂犬病在国内外呈暴发和蔓延趋势。免疫后猪感染伪狂犬现象在欧美地区和中国多数省份都有报道,且有一定数量的死亡发生。伪狂犬病野毒感染的血清阳性率逐年上升,从2010年的7%左右上升到2014年的26%。同时中国东北、华北和山东一带还有不同程度的水貂、狐狸等毛皮动物感染发病的情况,通过血清学和分子生物学检测发现阳性带毒率高达30.6%～37.2%。另外,适应了毛皮动物的伪狂犬病病毒会引起毛皮动物迅速发病和较高的死亡率。为了更好地研究该病发生的原因并及时地制定防控措施,作者对目前伪狂犬病在国内外的流行情况、疫苗的使用种类和该病的检测方法等方面进行了综合、系统的概括,并总结了在毛皮动物上发病的特有现象,就该病如何在毛皮动物中进行有效的治疗和防控做出了具体的分析和展望。  相似文献   

2006—2007年我国水貂、狐和貉主要疾病发生和流行情况调查与分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

罗国良  赵建军  张海玲  王凤雪  柴秀丽  吴威  闫喜军  邵西群  易立 《特产研究》2008,30(4)

为了解近两年来我国水貂、狐和貉主要疾病的发生特点与流行情况。对来自水貂、狐和貉养殖区的380份病例进行流行病学调查、病理剖检和实验室检测与统计分析,结果检出犬瘟热病毒阳性病例共88例、水貂细小病毒肠炎26例、水貂阿留申病22例、水貂流行性腹泻42例、细菌性传染病96例、饲料和营养代谢性疾病56例、寄生虫疾病20例、其它及未确定原因病例为30例。本文分析并讨论了主要疾病的流行特点和原因。  相似文献   

貉白介素-18(IL-18)基因的克隆及序列分析     

张海玲  罗国良  赵春霏  柴秀丽  王凤雪  易立  闫喜军 《特产研究》2008,30(3)

从植物血凝素（PHA）诱导的貉外周血淋巴细胞中提取总RNA,通过反转录聚合酶链反应（RT-PCR）首次对貉IL-18的基因进行扩增。序列分析结果表明,该序列含有1个582bp的开放阅读框架,编码193个氨基酸,与已报道的北极狐和犬IL-18序列同源性高达95．9％和94．8％,氨基酸同源性为93．8％和91．2％,与其它物种的IL-18基因间具有较大种属差异性。  相似文献   

我国首次克隆到水貂α干扰素基因亚型     

赵春霏  张海玲  闫喜军 《特产研究》2008,30(3)

中国农业科学院特产研究所野生动物人兽共患病研究室应用RT-PCR方法从体外诱导的水貂外周血淋巴细胞中扩增出水貂的α干扰素13种基因（MiIFN-α）亚型。13种基因亚型基因序列全长均为564bp,编码187个氨基酸。亚型间核苷酸同源性为93．8％-99．3％,氨基酸同源性为88．3％-97．9％。GenBank登录号分别为：IFN-α1（EU863613）、IFN-α2（EU863614）、IFN-α3（EU863615）、IFN-α4（EU863616）、  相似文献   

水貂出血性肺炎多价灭活疫苗研制成功     

闫喜军  罗国良  柴秀丽 《特产研究》2008,30(1):5

水貂出血性肺炎又称水貂假单胞菌性肺炎,是由绿脓杆菌引起水貂的一种急性传染病。该病主要发生在每年9—10月份水貂换毛季节,以出血性肺炎、急性死亡为特征,死前出现呼吸困难、鼻孔流出红色带泡沫液体等症状,死后剖检可见整个肺叶弥漫性出血和败血症变化。本病世界各地均有发生,是危害水貂养殖业的重要传染病。  相似文献   

水貂白细胞介素-4基因的克隆、序列分析与原核表达     

范思宁  张海玲  赵建军  王洋  胡博  吕爽  马凡舒  李欣彤  凌明玉  赵辉  廉士珍  闫喜军 《中国畜牧兽医》2017,44(1):30-37

为了获得高纯度的白细胞介素-4（IL-4）蛋白,对分离得到的水貂外周血淋巴细胞经植物血凝素（PHA）诱导后,提取淋巴细胞总RNA,根据GenBank中登录的雪貂IL-4基因序列,设计并合成特异性引物,通过RT-PCR扩增获得了水貂IL-4基因序列全长399 bp,编码132个氨基酸,与雪貂氨基酸序列同源性高达99.2%,与熊猫、犬同源性均为90.0%。将编码成熟蛋白基因构建到原核表达载体pProEX-HTb,IPTG诱导后,SDS-PAGE及Western blotting结果显示,IL-4表达产物为15 ku的包涵体蛋白。通过His-Trap HP亲和层析预装柱变性、复性洗脱可获得高纯度的重组IL-4蛋白。本试验为水貂IL-4基因的进一步研究奠定了基础。  相似文献   

水貂阿留申病毒VP2基因的原核表达及初步应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

徐磊  闫喜军  张蕾  柴秀丽  赵建军  张海玲  高晗  白雪 《中国农学通报》2010,26(8):7-11

将水貂阿留申病毒ADV-G株VP2基因中主要抗原表位区的两个片段,分别克隆至原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,鉴定后得到重组质粒pET-VP2a和pET-VP2b,将重组质粒转化到宿主菌BL21中,用IPTG分别以不同浓度,不同诱导时间进行诱导表达,采集样品做SDS-PAGE、Western-blot分析,并以此蛋白作为包被抗原进行ELISA检测。结果发现以终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导,4小时后表达可达到高峰,其大小分别约为23kD和28kD, 该蛋白与ADV阳性血清能发生特异性反应。将此表达产物应用Ni-NTA His-Bind纯化系统进行纯化,其纯度可达到91%,纯化后的蛋白以60μg/孔包被96孔板,检测不同地区水貂血清,同时以对流免疫电泳法（CIEP）为对照,结果发现二者的符合率高达93 %,而应用该蛋白进行检测其反应更为安全,背景低,制备简单,这为今后应用该蛋白作诊断抗原检测水貂阿留申病奠定了基础。  相似文献   

水貂、狐狸和貉源犬瘟热病毒F蛋白信号肽区基因克隆及遗传变异分析     

孙彦刚  赵建军  白雪  牛登云  邵西群  胡博  刘昊  张海玲  张蕾  王洋  马凡舒  闫喜军 《中国畜牧兽医》2015,42(4):838-846

为了解近年来犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)在中国毛皮动物主要养殖区的流行情况及遗传变异情况,本试验于2012-2014年从山东、河北、辽宁收集疑似犬瘟热的水貂、狐狸和貉病料,经犬瘟热抗原检测试纸条检测和RT-PCR检测为阳性后,克隆测序了15株CDV F蛋白信号区(Fsp)基因序列.序列分析结果显示,15株CDV野毒株Fsp基因核苷酸序列和氨基酸序列的相似性均为93.6%~100.0%,与疫苗株相似性为80.7%~81.7%.基因系统进化分析结果显示,15株野毒株均属于中国当前流行的Asia-1基因型.氨基酸序列比对分析结果显示,Fsp蛋白在氨基酸3-14、16-37、47-67位等处存在高变异.通过对当前流行CDV野毒株Fsp基因序列分析,结果表明该Fsp基因区具有较高的变异率,可作为CDV基因分型的依据,同时本试验结果为毛皮动物犬瘟热的防控提供了参考依据.  相似文献   

水貂阿留申病基因工程诊断抗原的制备     

张蕾  柴秀丽  冯佩平  张海玲  胡博  白雪  赵建军  冯卓  王振军  徐磊  闫喜军  吴威 《中国畜牧兽医》2015,42(7):1686-1691

本研究旨在建立一种生产水貂阿留申病(Aleutian disease,AD)诊断抗原的新方法。试验提取水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)的基因组,PCR扩增ADV核衣壳蛋白VP2基因,构建重组表达质粒Bacmid-VP2,脂质体介导其转染昆虫细胞Sf9获得重组杆状病毒AcMVPV-VP2。电镜下观察表达的VP2蛋白,Western blotting检测目的蛋白的反应原性。以传统接毒方法生产的AD诊断抗原作对照,通过对流免疫电泳试验检测表达蛋白的生物学活性。结果表明,表达的重组VP2蛋白在电镜下组装成病毒样颗粒且能与ADV阳性血清发生反应。与商业诊断抗原相比,重组抗原诊断AD的阴阳性的符合率为100%。该方法可成为生产AD诊断抗原的替代方法。  相似文献   

犬瘟热病毒强毒株HBF-1株的培育及致病性研究     

高晗  闫喜军  柴秀丽  白雪  张蕾  徐磊  赵建军  张海玲  韶西群  罗国良 《中国预防兽医学报》2010,32(12)

为研究从北极狐病料样品中分离的一株强毒的致病性,本实验采用病例复制、RT-PCR检测、间接免疫荧光检测(IFA)和电镜观察等方法证实分离得到犬瘟热病毒(CDV),并命名为HBF-1。对该分离株H基因的核苷酸序列比对显示,HBF-1与疫苗株的同源性为91.0%～91.5%,与国内外分离株的同源性为93.5%～99.9%。病毒传代培育试验结果显示HBF-1已适应在北极狐、貉、水貂和犬体内繁殖,具有较广的感染范围。但各种动物的临床症状和剖检病理变化存在不同程度的差异,表明HBF-1分离株对北极狐、貉、水貂和犬的致病力不同;毒力测定结果显示其半数感染量分别为102.46 ID50/mL、102.95 ID50/mL、102.46 ID50/mL和102.58 ID50/mL,表明HBF-1为一株CDV强毒株,可以在不同的经济动物间进行水平传播。本研究结果为开发新的CDV疫苗提供了实验基础。  相似文献