猪巨细胞病毒的PCR检测及其gB基因特征分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

李晶  余兴龙  李润成  罗维  向卫军  李薇  王亚  葛猛 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2009,35(5)

根据GenBank登录的猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因序列设计检测引物和全长gB基因引物,对来自湖南浏阳和江西景德镇不同养殖场的猪鼻拭子样品(51份)进行PCR检测,60.78%(31/51)的鼻拭子样品扩增出了260 bp的特异性条带.再以阳性样品为模板扩增全长gB基因,并将其克隆到pMD18-T载体,核苷酸序列测定和结果分析表明,所获得PCMVgB基因序列全长2 580 bp,编码860个氨基酸,与国外PCMV分离株的核苷酸同源性为97.6% ～ 98.9%,氨基酸同源性为97.0%～98.6%,且 PCMV可分为2个群:一群为中国湖南株、英国株和德国株,命名为A群;另一群为日本株、瑞士株和西班牙株,命名为B群.抗原表位优势、亲水性、表面可及性预测分析表明,PCMVgB蛋白是理想的免疫学抗原候选蛋白.  相似文献   

高致病性PRRSV缺失变异株Nsp2基因的克隆与遗传变异分析   总被引：2，自引：2，他引：0  

黄泽彬  李润成  尹德明  颜运秋  刘忠华  丁建  汪镇南  余兴龙 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2008,34(6)

从湖南省内多个出现疑似猪“高热病”症状的猪场采集病料70份,采用RT-PCR方法进行分子流行病学调查．结果检出PRRSV阳性病料54份,阳性率高达77．14％（54／70）．对其中8份分别来自娄底、浏阳、永州、双峰、益阳、株洲、宁乡和溆浦的病料中的PRRSV基因组Nsp2高变区部分基因片段进行RT-PCR扩增、克隆和序列测定分析．与国内外美洲型PRRSV分离株比较,序列相似性为72．2％～100％,其中,与公布的高致病性PRRSV缺失变异毒株的同源性最高,序列相似性为98．2％-100％．序列分析表明,这些毒株均是天然存在缺失的变异毒株,其Nsp2均有2个部位出现了缺失,分别为编码1个氨基酸的3个核苷酸的缺失和编码29个氨基酸的连续87个核苷酸的缺失,与高致病性PRRSV缺失变异毒株序列的缺失情况完全一致,且与其具很高的同源性,从而确定了分离的毒株均为引起猪“高热病”的猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株,这是国内外少见的PRRSV缺失变异及毒力显著增强的现象．  相似文献   

O型口蹄疫病毒代表性抗原VP1基因的人工合成与表达及其免疫原性检测   总被引：3，自引：2，他引：1  

李润成  余兴龙  白霞  侯强红  罗维  刘忠华  向卫军 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2008,34(3)

通过对GenBank近10年内收录的O型口蹄疫(FMD)病毒 VP1基因序列的同源性比较分析,并根据中国、老挝、缅甸等国家FMDV流行毒株的基因序列,设计并合成了有群内抗原代表性的结构蛋白VP1全基因序列.将合成的序列克隆到原核表达载体pET-28a( )中,构建了VP1的表达质粒pETVP1.SDS-PAGE和Western-blot分析表明,该质粒的BL21(DE3)LysS转化菌在IPTG诱导下可特异性表达VP1蛋白,该重组蛋白以包涵体的形式存在,相对分子质量约30 000,能与口蹄疫病毒(FMDV)阳性血清发生特异性反应.动物接种试验表明,重组蛋白能诱导小白鼠产生特异性抗FMDV抗体.  相似文献   

现有猪圆环病毒2型疫苗以及新型疫苗的研究进展     

屈泰龙  李润成 《湖南畜牧兽医》2013,(3):1-3

猪圆环病毒病是近几年来对养猪业威胁较大的传染性疾病之一,对传染性疾病的防控主要是通过疫苗免疫来实现。本文对目前商品化以及实验性猪圆环病毒疫苗的研究概况进行了介绍,以期为现有PCV2商品疫苗的临床选用提供参考,并为养猪人增强对PCV2新型疫苗的了解提供材料。  相似文献   

血清学结合病原RT-PCR检测对猪蓝耳病的诊断     

梁百里  余兴龙  杜丽飞  李润成  罗璋 《湖南畜牧兽医》2013,(6):18-20

湖南某猪场去年8月中份开始保育仔猪发病,临床症状表现猪群食欲下降、发热,呼吸急促、全身体表发红等．发病期间采用抗应激、抗感染措施,可缓解疫情,但下一批保育仔猪还会出现同样的疫情。同年10月初通过对母猪和仔猪血清学检测和病原检测,母猪的蓝耳病抗体阳性率仅为44．4％、阴性率56．6％、25日龄仔猪蓝耳病抗体阳性率12．5％、阴性率87．5％,60日龄仔猪蓝耳病抗体阳性率100％;病原RT-PCR检测结果发现在保育猪血液中存在蓝耳病毒感染。经了解该猪场去年5月中旬以前对种猪群进行蓝耳病疫苗接种。商品猪没有接种蓝耳病疫苗,而血清学检测,仔猪从哺保育初期到后期蓝耳病抗体阳性率显著上升,说明其间感染了蓝耳病毒。结合病原RT-PCR检测结果,确诊这次猪的疫情是蓝耳病感染引起的一次猪疫情。  相似文献   

一例母猪混合感染猪蓝耳病病毒和猪丹毒杆菌的实验室诊断     

李波  李润成  肖博仁  余兴龙 《猪业科学》2011,28(3):90-92

本试验对一猪场疫病进行了实验室诊断以及分离细菌的药物敏感性检测,结果表明该场生猪合并感染了猪繁殖与呼吸综合征病毒(猪蓝耳病病毒)和猪丹毒杆菌.该丹毒杆菌对青霉素及几种头孢、喹诺酮类药物敏感而对卡那霉素、阿米卡星、新霉素等不敏感.  相似文献   

猪圆环病毒-2的概况     

颜爱  李润成 《畜牧兽医科技信息》2012,(4):11-12

猪圆环病毒病是全球公认的危害养猪业的重要疫病,也是困扰我国养猪业发展的三大疫病之一。猪圆环病毒2(porcine circovirus2,PCV2)是该病主要致病原,其可引起猪机体免疫系统受损,从而引起免疫抑制,免疫失败。本文就  相似文献   

微生态制剂的作用特点与应用     

李润成 《兽药市场指南》2010,(8):41-41

目前，使用微生态制剂对生猪进行保健正在逐步被养殖场接受，为了让大家更多的了解微生态制剂的相关知识，笔者特将其作用特点及目前应用中遇到的问题和对策介绍如下，供参考。  相似文献   

1株多杀性巴氏杆菌的全基因组序列及致病相关基因分析     

许文博  吴丽梅  刘鑫  李升  黄复深  李润成 《畜牧兽医学报》2022,53(6):1858-1869

通过对多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)CS株全基因组的毒力基因分析,以期从基因组角度了解P. multocida CS的致病性机理。常规方法分离细菌,并进行毒力鉴定。基于二代测序平台对P. multocida CS进行测序,应用比较基因组学方法将其与GenBank中具全基因组来源于不同地域和宿主的P. multocida基因组进行比较分析。结果显示：猪肺疫病料中分离细菌滴鼻感染小鼠,测得其LD₅₀为5×10² CFU·mL^-1,显示较强毒性。将测序后的P.multocida CS株全基因组信息提交至NCBI,获得登录号SUB11119617。通过对P.multocida CS全基因组序列的分析表明,P.multocida CS株全基因组大小为2 599 048 bp,G+C含量为39.932%,编码CDs为2 580个,占整个基因组长度的69.6%,编码CDs的平均长度为952 bp。此外还有53个tRNA基因和3个rRNA基因。有87.95% 的编码CDs可进行COGs功能分类,29个为功能未知基因。利用RaAXML的最大释然法(maximum likelihood,ML)进行系统进化分析发现,P. multocida CS株与1个猪源性、2个牛源血清A型毒株,和1个猪源性D型毒株有较近的亲缘关系。P. multocida CS株含254个毒力相关基因,分为4大类11小类。其中铁摄取系统、黏附系统、分泌系统和双组分调控系统相关的多个基因在不同的毒株(包括血清型)的分布存在多态性。通过对基因出现频率的分析发现,铁摄取系统相关的tbpA和铁复合物外膜受体蛋白基因(iron complex outer membrane receptor protein gene,irp)以及黏附的相关的ppdD和ompA基因在血清A型出现的频率较高,这是否与不同菌株的毒力差异相关有待进一步证实。P. multocida CS的分泌系统由Ⅰ型(hly基因)、Tat型、Sec-SRP型3种类型组成。其中,hlyD基因在不同的血清型的分布频率存在多态性。P. multocida CS株的双组分信号转导系统(TCSs)由16个调节相关基因,12个感应相关基因和2个有hybrid相关基因。这些基因在不同血清型分布的多态性与不同菌株毒力的关系有待进一步研究。综上所述,组成铁摄取系统、黏附系统、分泌系统和双组分调控系统的基因在不同的血清以及同一血清型内出现频率存在多态性,它们与P. multocida菌株毒力强弱的关系有待进一步研究。  相似文献   

生猪蓝耳病的防控     

李润成 《畜牧兽医科技信息》2009,(8):26-26

猪繁殖呼吸障碍综合症(PRRS)又称为猪蓝耳病,是由猪繁殖呼吸综合症病毒(PRRSV)引起的猪的一种传染病.1987年在美国首次发现该病,2006年我国部分省市猪群暴发蓝耳病并且大部分猪场同时继发了其它的各种疫病,对养猪业造成了很大的损失.  相似文献