玻璃化法超低温保存匍匐翦股颖胚性愈伤组织及其植株再生   总被引：2，自引：0，他引：2  

李红民  马晖玲 《甘肃农业大学学报》2009,44(4)

采用玻璃化法对匍匐翦股颖愈伤组织进行超低温保存条件及植株再生进行初步研究.结果表明:将继代2次的愈伤组织接种到预培养基上,4℃低温预培养5 d.预培养后的愈伤组织在常温下用装载液过渡10 min,再于0℃下用玻璃化溶液PVS2处理50 min后,加入新鲜的PVS2迅速投入液氮中保存1 h以上,取出后在30℃水浴中解冻,用MS+1.0 mol.L-1蔗糖溶液洗涤3次,每次10 min,细胞存活率可达85.6%,接种在恢复培养基上培养,胚性愈伤组织能正常进行体细胞胚胎发生、成熟和植株再生.  相似文献   

新技术在鱼类胚胎冷冻保存中的应用     

沈蔷  章海敏  胡军祥 《浙江农业科学》2013,1(6):0-736

鱼类胚胎冷冻保存对鱼类遗传育种、生物多样性保护及濒危物种保护具有重要意义,综述近年来,科研工作者对鱼卵及胚胎的冷冻保存技术进行的大量研究,论述了几种新型研究技术的应用前景。  相似文献   

超低温冻存时间对史氏鲟精子活力的影响     

刘娟娟  舒德斌  郭柏福  高勇 《水产科技情报》2013,40(3):113-115, 121

为研究超低温冻存时间对史氏鲟精子活力的影响,使用史氏鲟冻精与鳇鱼卵子进行了杂交授精试验。结果显示:经超低温冷冻后的精液,与对照组的鲜精(126.7±9.4 s)比较,其寿命显著下降(冻存5 h的为78.7±4.11 s,336 d的为72.0±4.32 s,702 d的为57.3±2.05 s),且授精率和受精卵的孵化率受到显著影响。冻存5 h的精液,其授精率和受精卵孵化率分别为(73.31±15.27)%和(55.68±9.81)%,与鲜精比较差异不显著(P>0.05),而冻存时间为336 d[授精率(59.20±2.39)%,受精卵孵化率(53.08±1.23)%]和702 d[授精率(25.29±8.26)%,受精卵孵化率(21.38±9.91)%]的精液则差异显著。结果表明,超低温冷冻对史氏鲟精子造成了一定程度的损伤,长时间的超低温冻存会显著降低精子的活力,影响授精率和受精卵的孵化率。  相似文献   

玻璃化超低温保存对怀菊花再生苗形态及生理的影响     

赵喜亭  宋萍萍  王苗  赵月丽  郭婧  李明军 《湖北农业科学》2011,50(3):533-535,543

以怀菊花中的优良品种小黄菊为试材,研究了玻璃化超低温保存对怀菊花再生苗形态及生理指标的影响。结果表明,与常温苗相比,继代培养的玻璃化超低温保存再生苗前期(0～15 d)生长较慢,中期(15～30 d)开始快速生长,至45 d时,二者长势基本一致;叶片的可溶性糖、可溶性蛋白质和叶绿素含量均没有显著的差异。玻璃化超低温保存能够保持其形态和生理的稳定性。  相似文献   

厚壳贻贝早期幼虫低温保存的影响研究     

李一峰  杨金龙  王冲  沈和定 《水产学报》2012,36(1):73-77

探讨低温(4 ℃)条件下的厚壳贻贝早期幼虫保存可能性,同时调查了不同培育密度对低温保存的影响。在正常条件下,继续培育低温保存后的幼虫,并调查其存活率和生长的变化。 结果表明,在低温保存后,早期幼虫存活率较高,超过95%;厚壳贻贝早期幼虫的壳长和壳高出现显著性的增长。不同培育组间,培育密度对厚壳贻贝早期幼虫的存活和生长影响不同,表明密度是幼虫低温保存的一个重要因素。在正常培育条件下,低温保存后的幼虫,3周后其存活率明显低于对照组,但仍超过50%,且其生长速度明显高于对照组。因此,低温培育是保存厚壳贻贝早期幼虫的有效方法,可用于今后贝类幼虫生物学实验和人工育苗技术的改善研究。  相似文献   

珍珠龙精子超低温保存的初步研究     

史东杰  孙向军  梁拥军  孙砚胜  暴丽梅 《水产科技情报》2012,39(6):306-309, 313

为研究适合珍珠龙精子的短期超低温保存方法,比较了不同保存液、保护剂、降温方式、解冻方式对珍珠龙(Scleropages jardini)精液超低温保存后精子活力的影响,初步解释了经超低温短期保存后珍珠龙精子活力明显较鲜精低的原因.结果显示:采用Ringer's液作为保存液,以浓度为16％的二甲亚砜作为保护剂,选取五步法超低温冷冻保存精子[精子缓慢降温至-150℃→液氮面上3 cm(约-170℃),停留4min→液氮面(约-190℃),停留1 min→液氮],40℃水浴解冻,可取得最好的冻后活力,解冻后精子的活力为(36.7±4.1)％.  相似文献   

树莓茎尖玻璃化法超低温保存及植株再生研究     

李东红 《辽宁农业职业技术学院学报》2010,12(6):6-8

为了建立适于树莓茎尖的超低温保存技术程序,试验以树莓茎尖为试材,对树莓玻璃化法超低温保存进行了研究。结果表明适于树莓的超低温保存技术流程是先低温驯化21d,在含0.8mol/L蔗糖的固体培养基预培养4d,再经玻璃化液(PVS2)处理120min后浸入液氮,解冻后茎尖存活率达75%。  相似文献   

Cryopreservation of Queen Honeybee （Apis mellifera carnica） Born Worker Eggs by Vitrification     

LI  Zhi-yong XUE  Yun-bo WANG  Zhi LI  Xing-an 《中国农业科学(英文版)》2010,9(9):1353-1361

Many species of insect egg can be targeted individually or （and） collectively for cryopreservation by vitrification. However, there has been no report on cryopreservation of honeybee eggs by vitrification. In an attempt to define a preliminary procedure of cryopreservation of honeybee eggs by vitrification, queen honeybee born worker eggs （worker eggs） were stored through vitrification in liquid nitrogen up to 1 h, and then post-vitrification survival of the vitrified worker eggs in vitro and their hatching rates during maturation in vivo were observed using microscopic and close visual inspections. The procedure of cryopreservation by vitrification included dechorionation with sodium hypochlorite and permeabilization with isopropyl alcohol; equilibration by addition of loading solution （i.e., 25% vitrification storage solution） and dehydration by gradual replacement of loading solution with vitrification storage solution; cooling in liquid nitrogen vapor right before droplet vitrification in liquid nitrogen; and recovery in liquid nitrogen vapor right after storage in liquid nitrogen, thawing at temperature of thawing medium （5% sucrose in TC 100-insect medium） and rehydration by gradual replacement of vitrification storage solution with rehydration solution （5% fetal bovine serum in TC 100-insect medium）. It was found that among the worker eggs experiencing cyropreservation by vitrification, 1.25% of them were successfully passed through the four life stages, viz., egg, larva, pupa, and adult. In summary, it can be inferred that although a majority of worker eggs were dead after cyropreservation by vitrification, a few of them were developed into larvae, pupae, and finally emerged as adults.  相似文献   

低温保存萨福克种公羊鲜精效果研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

郭海根  王大广  吕礼良  王浩 《现代农业科技》2011,(15):303+305

肉用种公羊鲜精低温(2～5℃)保存,是根据精子的代谢活动随着温度的降低而逐渐减弱,当降至10℃以下时基本受到抑制的特点,延长鲜精的利用时间。2009年8月16日与22日,分2次在吉林省长岭县14号种羊场,对6头萨福克纯种肉用种公羊采精后作低温保存技术处理,用处理后的鲜精进行24、48 h活力评定,按五级评分法,活力均达4～5分。选择90只东北细毛羊2岁母羊经同期发情处理后进行人工授精,受精率达60.61%～63.63%。  相似文献   

大豆卵磷脂取代卵黄对猪精液低温保存的影响     

胡传水  朱银莉  许春荣  李美珍  胡传活 《广西农学报》2013,(1):36-38,63

为了进一步优化猪精液低温保存稀释液配方,用不同浓度（1．50％、3．00％、4．50%）的大豆卵磷脂取代稀释液中的卵黄,进行猪精液低温保存试验。结果表明,以卵磷脂完全取代猪精液低温保存稀释液中的卵黄时,3．00％、1．50%浓度组与含20．00％卵黄的常用稀释液保存效果相当（3％：P〉0．05,1．5％：P〈0．01）,其中含1．50％卵磷脂的稀释液保存效果最好。  相似文献