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两株新城疫（ND）病毒分别分离自发病鸡群与鸵鸟群，本实验室对两株病毒的最小致死量致死鸡胚的平均死亡时间（MDT）、3日龄雏鸡脑内接种指数、6周龄鸡静脉接指数（IVPI）、血凝解脱速率和血凝素热稳定性进行了测定。结果表明，源于发病鸡群的分离物是一株中发型的ND病毒，属快速解脱型，血凝素对热的抵抗力较强；而源于鸵鸟的分离物是一株缓发型的ND病毒，属慢速解脱型，血凝素对热的抵抗力较差。本文还对新城疫病毒的毒力与血凝解脱速率和血凝素热稳定性的关系进行了讨论。 相似文献
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为了研究猪 Siglec-10（pSiglec-10）的分子生物学特征,利用 Ensemble 网站提供的预测序列（ENSSSCT00000032460）设计一对特异性引物,采用 RT-PCR 技术,克隆 pSiglec-10分子的全长 CDS 区,经过测序比较鉴定正确后,对该分子的基本特征进行分析;构建截短 pSiglec-10的原核表达载体,另将该分子的 CDS 区全长克隆至真核表达载体 pcDNA3．1-3′FLAG,将重组质粒转染至 PK-15和 Marc-145细胞中分析其表达定位特征。结果克隆的 pSiglec-10分子的全长 CDS 为2127 bp,编码709个氨基酸;pSiglec-10基因序列与猴的同源性最高,同源性达73．6％,与鼠的同源性为66．9％;与人的同源性为62．5％,氨基酸序列的同源性分别为58．9％、69．4％和65．3％;pSiglec-10 C 端的 ITIM 区域和磷酸化位点高度保守;pSiglec-10分子具有较好的抗原特性和亲水性;该分子主要表达定位在细胞浆中,在 Marc-145细胞中呈不连续的点状分布于细胞浆,细胞核周围荧光强度较强。pSiglec-10分子全长 CDS 区的克隆和分析将对该分子的功能研究提供一定的理论依据。 相似文献
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为了解连续免疫压力下猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的变异规律,以及为猪繁殖与呼吸综合征病的防控提供科学依据,以贵州分离株 PRRSV AS 为研究对象,监测分析了 PRRSV 接种免疫猪群后其主要基因变异情况。结果表明：1）接种 PRRSV 后,免疫猪只未发生死亡现象,但出现轻微的临床表现和病理变化,且能在病变组织中分离到 PRRSV,并扩增出与预期大小相一致的 Nsp2和 GP5基因条带;2）对Nsp2基因,两次分离物 PRRSV AS-a、PRRSV AS-b 与原始病毒 PRRSV AS 的遗传距离相应为0．018和0．064,呈加速渐远趋势;PRRSV AS-a 发生16处点突变,其中9处为非同义突变,7处为同义突变;PRRSV AS-b 发生25处点突变,其中非同义突变12处,同义突变13处;从 PRRSV AS 向 PRRSV AS-a 到PRRSV AS-b 演变过程中,Nsp2基因编码蛋白第285～293位抗原指数发生不同程度改变,且演变趋势呈正向选择作用;3）对 GP5基因,两次分离物 PRRSV AS-a、PRRSV AS-b 与原始病毒 PRRSV AS 的遗传距离相应为0．004和0．015,变异趋势不明显;PRRSV AS-a 发生2处点突变,非同义突变和同义突变各1处;PRRSV AS-b 发生3处点突变,其中非同义突变2处,同义突变1处;从 PRRSV AS 向 PRRSV AS-a 到PRRSV AS-b 演变过程中,GP5基因编码蛋白重要抗原表位未发生改变,但其演变呈正向选择作用。说明,在连续免疫压力下 PRRSV 容易发生变异。 相似文献
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RT—PCR对新城疫病毒（NDV）分离株的鉴定及其临床应用 总被引：1，自引：0，他引：1
采用新城疫病毒的通用引物PA PB、强毒引物PA PC、弱毒引物PA PD对11株贵州新城疫分离毒株与4株新城疫参考毒株进行了RT-PCR扩增.结果15株新城疫毒株均被PA PB引物扩增出359 bp的条带,F48E8、ND98、Fw、H2、P3、BY、L2、P1,P2被PA PC引物扩增出254 bp的条带,而PA PD引物未扩增出DNA条带;ND89、Lasota被PA PD引物扩增出254 bp的条带.而PA PC引物未扩增出DNA条带.采用3对引物对自然发病斗鸡脑、脾、咽喉试子、泄殖腔试子进行RT-PCR检测,确诊为斗鸡新城疫强毒感染,且与传统病毒分离与毒力鉴定的结果相一致. 相似文献
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为了解禽白血病病毒（ALV）贵州流行株的遗传变异情况及分子特征,本试验基于ALV env基因设计合成引物对禽白血病贵州临床病例进行目的基因扩增、克隆和序列分析。结果显示,从临床病例中筛选获得3份阳性样本,PCR扩增均获得大小约921 bp的目的基因片段,将其命名为：GZ-ALV-1株、GZ-ALV-2株和GZ-ALV-3株。序列分析结果显示,3株ALV贵州流行株之间核苷酸同源性在97.2%~97.6%之间,与国内外ALV-J的同源性相对较高,为93.1%~99.3%;而与A、B、C、D、E、K亚群ALV同源性仅为51.4%~53.2%。系统进化分析显示,3株ALV贵州流行株与ALV-J亚群参考株处于同一分支,表明本试验所检测的ALV毒株均为ALV-J亚群;与A、B、C、D、E、K亚群处于不同进化分支。基因变异分析显示,3株流行株37处相同核苷酸变异导致17处氨基酸发生位点变异,其中9个可变点在高变区hr1和hr2,1个可变点在低变区vr3。结果表明,3株ALV贵州流行株均为ALV-J亚群,env基因存在位点发生了变异,且可变位点位于序列高变区。本研究结果为明确贵州禽白血病流行概况及ALV的防控与净化提供基础数据。 相似文献
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为筛选与沙门菌小RNA gcvB相关的靶基因,采用高通量的转录组测序(RNA-seq)技术对野生型沙门菌和敲除小RNA gcvB沙门菌的mRNA进行对比分析,全面地预测GcvB的靶基因的数量与种类,通过GO和KEGG数据库对筛选基因进行比对注释,进一步分析筛选基因的主要功能及涉及的生物过程。并利用荧光定量PCR对部分差异表达基因进行验证。结果显示:差异表达基因共1 244个,其中基因表达上调678个,基因表达下调566个。GO富集分析显示,差异表达基因主要涉及氧化还原活性、铁离子结合、运动活性等分子功能,细菌鞭毛的细胞成分,细胞呼吸、钴胺素代谢过程和钴胺素生物合成过程等生物过程。KEGG数据库分析显示,差异表达基因主要参与细菌趋化性、卟啉和叶绿素代谢、不同环境中的微生物代谢、双组分系统、甲烷代谢等14个信号通路。对筛选出的10个差异表达基因进行荧光定量PCR验证,结果显示:差异表达基因相对表达量与RNA-seq测序结果基本一致。本研究为进一步探明小RNA gcvB与靶基因相互作用、小RNA的调控机制,以及沙门菌致病机制奠定了基础。 相似文献
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为了解本地生猪定点屠宰场(点)猪肉中的沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌3种食源性致病菌污染情况,对10个场(点)出场的猪肉进行抽样,采用沙门氏菌测试片、大肠杆菌O157:H7测试片及李斯特菌检测板进行快速检测,再用国标法对快速检测出的阳性样品进行复检鉴定。结果显示:50份样本中,检出沙门氏菌阳性7份,阳性检出率为14%;20份样本中,检出大肠杆菌O157:H7阳性1份,阳性检出率为5%,检出单增李斯特菌阳性5份,阳性检出率为25%。此外,还发现样本中存在细菌的混合污染,其中沙门氏菌和单增李斯特菌双阳性2份,3种菌全阳性1份。调查结果表明:本地屠宰场出场猪肉中,这3种主要食源致病菌污染情况较严重,特别是小型屠宰点,应引起监管部门重视,加快推进屠宰企业转型升级;快速测试片的检测结果准确性偏低,特异性差,需要尽快建立一种快速特异的检测方法,用于屠宰场的致病菌快速检测。 相似文献
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不同新城疫病毒株结构蛋白的分析 总被引：3，自引：0，他引：3
2株新城疫病毒ND98、ND99分别分离自发病鸡群与雏鸵鸟,ND98属于中发型毒株,ND99属于缓发型毒株。将2株分离株ND98、ND99与参考毒株F48E8、Lasota进行十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质转移印迹(Western-Blotting)。SDS-PAGE结果显示,ND98、ND99与F48E8、Lasota具有相似的结构蛋白：HN蛋白、F蛋白、NP蛋白与P蛋白、M蛋白;Western-Blotting试验显示,ND98与F48E8、ND99与Lasota具有相似的免疫原,ND98、ND99免疫原性存在一定的差异。 相似文献
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巴氏杆菌病又称禽霍乱、禽出血性败血症,是由多杀性巴氏杆菌引起鸡、鸭、鹅、火鸡等禽类的1种接触性传染病.急性病例主要表现为突然发病、下痢、败血症及高死亡率[1].2019年7月,思南县兴隆乡某养鸡场饲养的肉蛋兼用型鸡出现鸡冠发紫,拉绿色或白色粪便,个别出现神经症状为特征的临床病例,经采集病料实验室诊断为巴氏杆菌病.现将诊治情况报道如下.1流行病学调查该养殖场引进脱温肉蛋兼用型鸡4025羽于山林中放养,到场后仅进行了禽流感免疫.80日龄左右鸡开始发病,出现鸡冠发紫,拉绿色或白色稀粪,喜饮水.曾用硫酸粘菌素预混剂、大蒜素、阿莫西林、黄芪多糖、强力霉素、头孢噻呋钠、氨苄青霉素、克痢素、多西环素等药物进行治疗后病情有所缓解. 相似文献