M蛋白基因shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

黄娟  姜平  李玉峰  蒋文明 《中国农业科学》2008,41(1):259-264

 【目的】通过靶向PRRSV基因组中的M基因的siRNA来抑制PRRSV在Marc145细胞中的复制。【方法】构建4个能转录小发夹RNA（shRNA）的质粒,将其与靶蛋白表达质粒共转染HEK293A细胞,观察荧光或进行半定量PCR;或将其转染Marc145细胞,感染PRRSV后进行IFA、TCID50和实时PCR检测。【结果】shRNA表达质粒对M融合蛋白表达的抑制率约为50％,使M真核质粒表达蛋白的mRNA水平降低54%～64%,表达的shRNA在PRRSV感染后48 h使病毒的TCID50和mRNA水平均降低到1/10～1/100倍,间接免疫荧光结果表明shRNA表达质粒转染孔的荧光细胞数显著减少。【结论】shRNA表达质粒特异性的抑制了靶蛋白M和PRRSV的复制,靶向PRRSV基因组M基因不同区域的siRNA可以作为控制该病毒传播的候选策略。  相似文献   

稠油水环发生器结构优化     

蒋文明  杜仕林  吴君强  刘杨  边江 《油气储运》2019,(8):937-943

水环发生器是水环输送稠油技术的重要装置,为了改善水环稳定性和提高输油效率,对水环输送稠油的减阻机理进行讨论,并采用数值分析的方法对水环发生器结构进行优化。采用VOF(Volume of Fluid)模型建立了水环流动数值模型,并完成了模型验证,研究了水环发生器不同间隙厚度对其稳定性的影响,探讨了水环发生器间隙厚度对水环输油效率的影响,得到了水环发生器最佳间隙厚度。结果表明:间隙厚度存在一个最佳值,过小不利于水环的形成和稳定,过大则会降低输油效率。研究结果为水环输送高黏原油提供了理论指导。  相似文献   

两株野鸟源H6N1和H6N8亚型禽流感病毒的遗传进化分析和对小鼠的感染性研究     

蒋文明  李金平  彭程  王素春  侯广宇  陈继明 《中国动物检疫》2017,34(4):90-93

为了解2016年在江西省鄱阳湖野鸟中分离的两株H6N8和H6N1亚型禽流感病毒(P419和P339)的生物学特性,本研究对其进行了全基因组序列测定、受体分析和对BALB/c小鼠的感染性试验。序列分析结果显示,这2个毒株属于不同的分支,并经历了不同亚型病毒间的广泛重组。2个分离株的HA裂解位点基序均为PQIETR/GLF,符合低致病性禽流感病毒的分子特征。HA蛋白受体结合位点处第138、226、228位氨基酸残基分别为丙氨酸(A)、谷氨酰胺(Q)、甘氨酸(G),具有结合禽样流感病毒受体的分子特征。受体结合试验表明,分离毒株仅能结合禽样受体。Balb/c小鼠的感染性试验结果显示,分离株只在小鼠的上呼吸道鼻甲中进行有限复制,使小鼠体重发生轻微变化,未表现明显临床症状,表明这2株分离株可感染小鼠,但致病力不强。  相似文献   

GSP：兽用生物制品的运输、贮存与使用     

张振兴  李玉峰  蒋文明 《中国动物保健》2006,(8):9-10

首先对兽用生物制品的命名和兽药GSP的涵义作了概述，然后对免疫预防用制品、诊断用制品、治疗用制品的运输、贮存与使用分别进行了阐述，最后对改善我国兽用生物制品的监管提出了一些建议。  相似文献   

2021—2022年我国8株鸽新城疫病毒基因组特征     

彭真奇  于晓慧  邢安琪  克军宏  李阳  蒋文明  刘朔  李金平  彭程  张富友  王桂军  王静静  刘华雷 《中国动物检疫》2023,40(2):1-8

为了解我国最新流行的鸽新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）分子生物学特征,对2021—2022年国家新城疫参考实验室从不同地区鸽群中分离到的8株NDV代表株进行了全基因组测序和生物信息学分析。结果显示：8株鸽NDV基因组长度均为15 192 nt,基因排列方式为3’-NP-P-M-F-HN-L-5’,其F蛋白裂解位点氨基酸序列均为112RRQKR/F117,呈典型的NDV强毒分子特征;相较于参考序列,代表毒株F蛋白七肽重复区域、融合肽和跨膜区域,以及HN蛋白中和抗原表位、跨膜区域等功能区域均有多处氨基酸变异;代表毒株全基因组核苷酸同源性为91.9%～99.0%,均属于Class Ⅱ基因Ⅵ型病毒,但可分为2个小分支,其中4株属于基因Ⅵ.2.1.1.2.2亚型,另4株属于基因Ⅵ.2.1.1.2.1亚型。结果表明,我国近期流行的鸽NDV具有遗传多样性特征。本研究进一步掌握了我国鸽NDV的遗传进化特点,丰富了鸽新城疫的流行病学信息,为该病的科学防控提供了参考。  相似文献   

H7N9亚型禽流感疫苗研究进展     

梁少波  张琳  朱俊峰  刘朔  彭程  尹馨  李金平  侯广宇  刘华雷  格日勒图  蒋文明 《中国动物检疫》2021,38(12):77-81

自2013年以来,H7N9亚型流感对我国养禽业和人类公共卫生造成了极大影响。疫苗作为重要防疫工具,在H7N9亚型流感防控中起到了至关重要的作用。目前我国批准使用的H7N9禽流感全病毒灭活疫苗安全性高、免疫效果好,已在国内广泛应用。随着对H7N9亚型流感病毒研究的不断深入,研究人员对核酸疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗及通用流感疫苗等新型疫苗进行了探索和尝试,并取得了一定的进展,为我国禽流感疫苗的开发与应用夯实了技术基础。本文对各类型H7N9亚型禽流感疫苗的研发情况以及优点和应用情况进行了综述,以期为更好地防控禽H7N9亚型流感提供帮助。  相似文献   

芦荟多糖及其衍生物的制备与抗氧化活性研究     

蒋文明  周石洋 《保鲜与加工》2022,22(11):61-68

以新鲜芦荟为原料,采用热水提取多糖,Sevage法除蛋白,再经过透析处理制备得到精制的芦荟多糖,并对其衍生物和生物活性进行研究。芦荟多糖分子质量采用GPC-RI-MALS法测定,多糖结构经过13C NMR表征确证。为了研究芦荟多糖构效关系,对芦荟多糖进行了衍生化,其衍生物包括乙酰化芦荟多糖、磷酸化芦荟多糖和羧基化芦荟多糖。结构表征结果表明,芦荟多糖含有1→4糖苷键,并且为甲基化多糖。分子质量测定结果显示,芦荟多糖的平均分子质量为112 381 u。抗氧化活性测试结果表明,芦荟多糖及其衍生物具有良好的抗氧化活性,其中磷酸化多糖的抗氧化活性与阳性对照品VC相当。构效关系研究表明,磷酸化芦荟多糖其体外抗氧化活性最好。试验为进一步研究芦荟多糖结构、开发功能性食品与药物提供一定的理论依据。  相似文献   

鸭圆环病毒PCR检测方法的建立与应用     

李金平  张富友  朱峻锋  张琳  刘朔  彭程  蒋文明  刘华雷 《中国动物检疫》2021,38(1):106-111

鸭圆环病毒病是由鸭圆环病毒(duck circovirus,DuCV)引起的一种重要免疫抑制病,影响着我国养鸭业的发展。为建立针对DuCV的PCR快速检测方法,对GenBank中登录的DuCV全基因组序列进行遗传进化分析,通过对两种基因型的DuCV全基因组序列进行比对,在共同保守区筛选出1对引物,建立了可以同时检测DuCV两种基因型的PCR快速检测方法,并对该方法的敏感性和特异性进行评价。结果显示,该方法具有良好的敏感性,检测下限达1.0 fg;特异性良好,对其他常见鸭病毒核酸检测均为阴性;利用该方法对20份临床发病鸭样品进行检测,发现有6份呈DuCV阳性,序列分析表明均属于DuCV-1。该PCR检测方法的建立为鸭圆环病毒病的快速诊断和防控提供了重要手段。  相似文献   

鸽疱疹病毒与腺病毒感染的PCR检测方法的建立     

蒋文明  侯广宇  李金平  陈杰  刘朔  陈继明 《动物医学进展》2009,30(8):63-65

鸽疱疹病毒和腺病毒是幼鸽常见的病原体,这些病毒共同引起一种疾病,称为幼鸽疾病综合征。论文建立了鸽疱疹病毒和腺病毒的PCR检测方法和双重PCR检测方法,并对发病鸽子进行了诊断。  相似文献   

2021—2022年我国部分地区鸽圆环病毒感染状况调查          下载免费PDF全文

邢安琪  于晓慧  彭真奇  蒋文明  克军宏  李阳  李金平  袁丽萍  许立华  王静静  刘华雷 《中国动物检疫》2023,(7):1-7

为了解目前我国鸽群中鸽圆环病毒(pigeon circovrius,PiCV)的流行现状及遗传变异情况,2021—2022年对山东等11个省(自治区)PiCV感染状况进行了调查,共采集鸽相关样品658份,采用PCR方法进行PiCV病原学检测,并对3份PiCV病原学阳性样品进行基因组序列测定及遗传进化分析。结果显示:在主动监测的9个省(自治区)49个采样点中,检出464份PiCV病原学阳性样品,个体阳性率为75.20%(464/617),场点阳性率为91.84%(45/49),其中河南省个体阳性率最高(100%);在被动监测的3个省41份病死鸽组织样品中,共检出28份PiCV病原学阳性样品;3份病原学阳性代表样品(QingDao 957、JiLin2、FuJian 1179)与已报道的24条PiCV全基因组序列同源性为87.30%～95.90%;QingDao 957和JiLin 2与国内报道的JS15-1序列亲缘关系较近,而FuJian 1179与国外报道的PL53参考序列属于同一分支,推测QingDao 957和JiLin2毒株在国内流行的PiCV中占主导地位,而FuJian 117...  相似文献