斑点免疫金渗滤法检测猪生殖与呼吸综合征抗体的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

孔繁德黄印尧  王生育张春安林开正  陆承平 《中国兽医科技》2005,35(1):36-40

应用提纯的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原包被硝酸纤维素膜，然后用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)建立了检测PRRS抗体水平的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。该法通过胶体金标记SPA直接显色，阳性者出现红色斑点，整个试验过程仅需5min即可判断结果；与猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病阳性血清不发生交叉反应；纯化PRRSV抗原的最低检测量为0．0553mg／mL，即55．3ng／点。对200份猪血清用该法与ELISA同时进行PRRS抗体检测，两种方法的符合率达98％。  相似文献   

猪和兔附红细胞体的体外培养   总被引：16，自引：0，他引：16  

房春林  杨光友 《中国兽医科技》2005,35(3):190-193

用RPMI1640和小牛血清按不同比例混合作为体外培养猪和兔附红细胞体的基础培养基，同时以去掉红细胞上自然感染的附红细胞体后的红细胞泥作为培养附红细胞体的寄生载体，进行猪和兔附红细胞体的体外培养。培养结果表明，以RPMI1640与小牛血清按6：4比例混合，同时选用兔红细胞泥作为载体的培养效果最佳，接种感染了附红细胞体的猪、兔阳性红细胞后24h生长达到高峰，感染率分别为40．2％和31．0％，而采用猪红细胞泥作为培养载体时红细胞感染率无明显升高。  相似文献   

PRRSV间接免疫荧光检测法的建立和应用   总被引：9，自引：0，他引：9  

彭长凌高崧  刘秀梵 《中国兽医科技》2005,35(4):256-260

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株人工单独感染3头3周龄仔猪，并用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染2头3周龄仔猪，每日检查试验猪体温、采食情况及临床表现，并用HerdChek IDExx试剂盒测其血清抗体。PRRSV PCV2联合感染猪分别在感染后1、3周剖杀，PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1、2和3周剖杀，对全部试验猪的肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM)．用PAM进行抹片，同时用肺组织直接进行触片做间接免疫荧光(IIF)检测。结果表明，用所获得的3株单克隆抗体均检测到人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原。另外，用IIF检测7头临床疑似PRRS病猪的PAM抹片。其中沭阳县的2头猪呈现阳性反应；对这2头猪的肺组织进行病毒分离。在盲传到第4代时Marc-145细胞上产生明显的细胞病变，进一步证实用所获得的3株单克隆抗体检测临床样品的结果准确而可靠，且获得的3株单克隆抗体均可通过IIF用于检测猪肺组织中的PRRSV抗原。  相似文献   

猪弓形虫病特异PCR诊断方法的建立   总被引：11，自引：2，他引：11  

谢德华朱兴全  崔焕粦丘初集范万红  廖申权翟敏莉林瑞庆  翁亚彪 《中国兽医科技》2005,35(4):289-293

以核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列作为弓形虫种特异的遗传标记．建立了猪弓形虫病特异PCR诊断方法。应用人工感染的方法建立了猪弓形虫病动物模型．摸索出猪弓形虫病PCR检测的最佳条件。敏感性和特异性试验结果显示，该PCR方法最低能检测到10个弓形虫速殖子的DNA，且与相关的8种原虫和线虫均无交叉反应，证明该PCR方法具有高度的敏感性和特异性。动物感染试验结果证明．在试验猪出现明显临床症状时(感染后第5d)．对取材的8个组织样品用该PCR方法检测，有6个组织样品为阳性，其中检出率最高的组织为肺门淋巴结。  相似文献   

猪血凝性脑脊髓炎病毒抗体的调查   总被引：11，自引：0，他引：11  

贺文琦陆慧君  耿百成宋德光  姜宁Hirano N 高丰 《中国兽医科技》2005,35(9):739-741

应用血凝和血凝抑制试验检测了从吉林省部分地区采集的猪血清中血凝性脑脊髓炎病毒（HEV）抗体。结果，212份样品中有94份呈现HEV抗体阳性反应，阳性率高达44．3％。被采集血清的猪未表现临床症状，说明该地区的猪群中存在HEV隐性感染。  相似文献   

猪生殖与呼吸综合征病毒M基因和N基因的表达     

赖维莉郭万柱  颜其贵韩国全 欧洋 《中国兽医科技》2005,35(10):771-774

将猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的M基因和N基因从重组质粒pMD18-T—M—N中亚克隆至pBV220原核表达栽体上，成功构建了重组表达质粒pBVM—N。将pBVM—N转化大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞．重组菌经温度敏感诱导表达，其细菌裂解物经SDS—PAGE可检测到分子质量约为19ku的目的蛋白，与M基因表达产物一致；经蛋白质分析软件Bandscan分析，其表达量可达19．1％；Western-blotting分析表明，该重组蛋白可被兔抗PRRSV血清所识别，与预期的M基因表达产物相一致，而N基因未获表达。  相似文献   

猪水泡病病毒结构蛋白基因的克隆及其蛋白二级结构和淋巴细胞表位的预测     

郑海学刘湘涛  尚佑军刘光清白兴文  罗静初谢庆阁 《中国兽医科技》2005,35(11):843-850

以免疫信息学和反向疫苗学为理论根据，利用RT-PCR法获得了猪水泡病病毒（SVDV）HK／70株的基因组序列并测序，应用生物信息学相关软件和方法，对SVDV结构蛋白的二级结构的不同方面及其抗原特异性淋巴细胞表位进行了预测，综合评价了SVDV结构蛋白的抗原特异性细胞表位，并计算出一些潜在的抗原位点。结果表明，VP1蛋白含有的细胞优势抗原表位最多，但其他结构蛋白也含有抗原特异性淋巴细胞表位，有的甚至有可能成为优势抗原表位或对优势抗原表位有协同作用。  相似文献   

多起综合症状猪病的诊疗体会     

张成虎 《兽药与饲料添加剂》2005,10(5):37-38

2004年,笔者对兰州市多家小型养猪场和散养户30～150日龄育肥猪出现的高烧、气喘、腹下发红、耳缘发紫、高死亡率等综合病征的病例进行了诊治,发现从外省购入和从城郊、农村猪市购买的仔猪发病率和死亡率居高,且多为混合感染.现将诊疗体会报告如下.  相似文献   

猪瘟与猪水肿病混合感染的诊疗     

吕亚辉  王海涛  蒋晓 《畜牧兽医杂志》2005,24(5):46-46

2005年1月16日我市某猪场60日龄的仔猪突然发病死亡，根据临床症状、病理变化和实验室诊断，最后确诊为猪瘟与猪水肿病混合感染，经采取相应的措施，疫情很快得到了控制。  相似文献   

一起母猪弓形体病误诊为感冒、猪瘟的报告     

罗文玲 《畜牧兽医杂志》2005,24(5):58-58

弓形体病又叫弓浆虫病，是由刚第弓形虫引起的病，根据发育阶段的不同分为5型：滋养体、包囊两型出现在中间宿主体内；裂殖体、配子体和卵囊只出现在终宿主——猫的体内。各种家畜、实验动物、人类等都能感染弓形虫病。滋养体呈新月形、香蕉形或弓形，常在急性病例的腹水、有核细胞内、细胞浆内发现；包囊常在慢性病例或无症状病例的脑、骨骼肌、心、肝、肺、肾、视网膜等组织内；裂殖体在猫的上皮细胞内进行无性繁殖；配子体在猫的肠内进行有性繁殖；卵囊随猫粪便排到体外至外界。  相似文献