人血栓调节蛋白基因的表达及转基因小鼠的建立     

陈红英  苟克勉  王晓琳  陈学进  黄秀英  孙方臻 《中国兽医学报》2003,23(2):115-118

用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白（hTM)基因，将其克隆到带有人EF－1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上，得到表达质粒pEF-TM。在转染pEF-TM的COS－1细胞中，hTM得到了瞬时表达，并且正确地定位到细胞膜上。用pEF-TM转染猪内皮细胞（PEC），经G418筛先得到稳定转染的克隆。凝血活性测定结果显示，表达hTM的PEC凝血时间明显延长，表明其抗凝血能力增强。通过显微注射方法，得到了1只F0代hTM转基因小鼠。Southern杂交结果表明，该转基因小鼠整合了9个拷贝的pEF-TM DNA,并能将外源DNA遗传给后代。  相似文献   

口服鸡新城疫V_4株病毒免疫效果研究     

夏平安  侯安祖  李宏基 《中国预防兽医学报》1997,(2)

口服鸡新城疫Ｖ_４株病毒免疫效果研究夏平安①侯安祖②李宏基③摘要经嗉囊接种１０８．５ＥＩＤ５０鸡新城疫Ｖ４株病毒。后第４～８天，能从粪便中分离出病毒。５周龄鸡拌料一次口服１０８．５ＥＩＤ５０鸡新成疫Ｖ４株病毒，半年内ＨＩ抗体平均效价为２５左右，用１０?..  相似文献   

禽大肠杆菌外膜蛋白基因C(ompC)的序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

曹素芳  黄青云  张煜坤  温纳相  陈红英 《中国兽医学报》2004,24(4):332-334

根据 Gen Bank中人源大肠杆菌 K- 12外膜蛋白基因 C(omp C)的核苷酸序列设计引物 ,应用 PCR方法从禽大肠杆菌 O2 、O78株及它们的融合双价弱毒菌株 O2 ,78(Norr Chlr)中分别扩增得到 omp C基因 ,序列测定及分析比较发现 ,3个菌株的 om p C基因均由 170 2 nt组成 ,核苷酸序列完全相同 ,只有 1个大的开放性阅读框 (ORF) ,长 10 92 bp,编码由 36 3个氨基酸组成的前 Om p C蛋白 ,前 2 1个氨基酸残基组成信号肽 ,成熟的 Omp C蛋白由 342个氨基酸残基组成 ,Mr为 4 0 0 0 0。其氨基酸序列也完全相同。从基因水平上证明了禽大肠杆菌 O2 、O78株及融合双价弱毒菌株 O2 ,78(NorrChlr)存在相同的外膜蛋白 C抗原 ,从而为进一步研究 Omp C蛋白的免疫原性奠定了基础  相似文献   

口蹄疫与经典猪瘟二联RT-PCR诊断方法的建立及其应用     

刘海鹏  刘维全  江禹  夏平安  王本旭  王吉贵  马兴元  王萍  赵玉军 《中国畜牧兽医》2004,31(2):33-36

根据口蹄疫病毒(FMDV)与猪瘟病毒(CSFV)基因组序列高度保守区,设计合成2对引物,以CSFV和FMDV培养物提取RNA并反转录,进行RT-PCR特异性片段扩增,扩增片段大小分别为200 bp、141 bp.结果表明,扩增产物与设计的2对引物之间的序列大小一致.通过特异性与敏感性试验,CSFV与FMDV培养物均可扩增至10-5倍稀释,最终建立的二联RT-PCR方法对上述2种病毒的敏感性亦可达10-4倍稀释,约10 pg的总RNA,证明本法对上述2种病毒具有快速、特异和高度敏感的特点.  相似文献   

观念先进制度规范——考察香港、澳门警犬训练队有感     

高民群彭毅洪  陈红英 《警犬》2004,(7):12-13

一、训练观念和方法的差异。香港警犬训练队主张从犬出生3周后开始训练，主要是带犬熟悉环境，培养犬的工作欲望，规范犬的行为。这部分工作，我们通常称之为“幼训”，实践证明，经专业培训的人员进行“幼训“能有效提高犬的整体素质。  相似文献   

河南地区猪流行性腹泻病毒S基因和ORF3基因分子特征和遗传进化分析     

赵丽  李存法  韩昊莹  张鸿鑫  卢婷婷  陈红英  雷连成 《中国兽医杂志》2018,(5)

为了分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)近年在河南省的流行情况,本研究于2014年1月至2015年12月收集河南省不同地区的200份PED疑似病料进行S基因和ORF3基因检测,通过RT-PCR扩增、克隆测序及序列分析,显示15株河南流行株S基因和ORF3基因的部分氨基酸和核苷酸不同于参考株,发生了变异。其中15个毒株的S基因和ORF3基因变化显示,PEDV河南毒株和其他参考株均可分为两个群,基于S基因扩增的15株则独立成群,与其他参考毒株亲缘较远;基于ORF3基因扩增的15个毒株与国内分离株、美国株及韩国株均有较近的亲缘关系;同时,对于S基因和ORF3基因在整个进化关系中,本试验中的15个河南株均相对独立成群,与经典毒株CV777及国内所使用的疫苗株,亲缘关系较远。结果表明,PEDV有变异和进化的趋势,应从当前流行毒株中选用有效的疫苗才能更好地控制本病的发生。  相似文献   

ILTV Glycoprotein B(gB)与鸡Interleukin-18(IL-18)真核双表达载体的构建及表达     

刘金朋  商艳红  崔保安  朱前磊  王子馨  王淑娟  邵攀峰  陈红英 《四川农业大学学报》2011,(4):549-554

将ILTV gB基因和鸡IL-18基因插入到真核双表达载体pIRES中,构建共表达gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB/IL18和表达gB基因的pIRES-gB质粒.通过脂质体将其转染鸡胚成纤维细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测重组质粒在体外的表达.将重组质粒通过腿部肌肉多点注射免疫21日龄雏鸡,应用E...  相似文献   

临床分离鸡致病菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药敏分析     

付秀玲  苑丽  陈红英  潘玉善  吴华  武博达  胡功政 《河南畜牧兽医(综合版)》2006,27(12):6-9

用全自动微生物鉴定系统(VITEK-32)鉴定了临床分离鸡致病菌,并分别进行了超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测,并用试管两倍稀释法测定了各种抗生素对非产酶菌、产ESBLs菌的抗菌活性。结果表明,鉴定分离的33株致病菌有大肠埃希氏菌30株、阴沟肠杆菌1株、铜绿假单胞菌1株、法氏柠檬酸杆菌1株。在这些菌株中,首次从鸡中检测出法氏柠檬酸杆菌,所分离的33株致病菌中产ESBLs8株。产酶菌株对抗生素的耐药性严重,而抗生素与抑制剂联用能降低药物对细菌的最低抑菌浓度(MICs)。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株ORF5基因的克隆与变异分析   总被引：4，自引：4，他引：4  

周海范  夏平安  崔保安  柴春霞  张红英  杨霞 《中国兽医学报》2007,27(6):810-813,817

从河南郑州、新乡、周口不同地区猪场的急性病猪中分离到3株猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproduc-tive and respiratory syndrome virus,PRRSV),分别命名为PRRSV Hn-1/06、PRRSV Hn-2/06和PRRSV Hn-3/06,细胞中和试验证实其血清型与美洲型一致。利用RT-PCR方法克隆了它们的ORF5基因,并对其基因序列和推导的氨基酸序列与7个不同来源的PRRSV毒株进行了同源性和亲缘关系比较分析,结果表明,3个分离株之间的ORF5基因及其推导的氨基酸均同源性均大于95.5%;与VR-2332标准北美洲株和疫苗株RespPRRS MLV间的同源性均低于与中国CH-1a毒株,而与流行的欧洲株间的同源性均低于54.5%。同时对推导氨基酸序列与6个北美洲型PRRSV株进行变异分析比较,证实其推导氨基酸序列发生了变异,特别是中和位点处第39位明显不同,表明河南省流行的PRRSV为北美洲型的变异株。  相似文献   

多重PCR检测猪细小病毒和猪伪狂犬病病毒的研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

李小康  赵丽  崔保安  陈红英  魏战勇 《中国预防兽医学报》2007,29(3):227-230

根据GenBank上已发表的猪细小病毒（Porcine parvovirus，PPV）的VP2基因序列和猪伪狂犬病病毒（Porcine pseudorabies virus，PRV）的gH基因序列，设计合成了两对特异引物，分别建立了PPV和PRV的单项PCR诊断方法，通过对扩增条件的筛选，最终成功地建立了PPV和PRV的复合PCR诊断方法，即利用一次PCR反应，可同时扩增PPV的751bp和PRV355bp的特异性片段，而扩增猪圆环病毒Ⅱ型（PCV．2）及相应的培养细胞（PK-15）核酸结果均为阴性，对PPV和PRV的最低检出量分别为100Pg和10Pg的DNA。该方法适合对PPV和PRV的联合检测和鉴别诊断。  相似文献