miR-186-5p与α-MSH互作对绵羊黑素细胞黑色素生成的影响     

许冬梅  朱芷葳  唐中伟  李鹏飞  董常生  赵宇军 《畜牧兽医学报》2021,52(1):19-27

黑色素合成受多种基因和miRNAs的调控,为了研究miR-186-5p与α-MSH协同作用对绵羊黑素细胞黑色素生成的影响。本研究在绵羊黑素细胞中转染miR-186-5p表达载体,同时添加α-MSH,通过实时荧光PCR（quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR）和蛋白质免疫印迹（Western blotting）检测MITF、TYR、TYRP1和TYRP2 4种可能与之相关的基因表达情况;利用免疫组化检测MITF蛋白在黑素细胞中的表达和亚细胞定位;通过分光光度法测定黑色素含量变化;利用划痕试验测定细胞迁移情况,试验分为miR-186-5p转染组、miR-186-5p+α-MSH互作组和对照组,每组3个重复。结果显示,miR-186-5p能够抑制绵羊黑素细胞中MITF、TYR、TYRP1和TYRP2的表达,并最终抑制黑色素的生成。而添加α-MSH能缓解miR-186-5p对MITF、TYR、TYRP1和TYRP2表达的抑制作用,进而在一定程度上恢复黑色素的含量。另外,miR-186-5p还能抑制细胞分裂,并阻碍细胞的迁移,而α-MSH无法抵消miR-186-5p产生的这种负面影响。上述结果表明,在绵羊黑素细胞中,miR-186-5p和α-MSH均参与调控黑色素合成途径,其中,miR-186-5p主要起负调控作用,而α-MSH主要参与相关位点的正调控,并能部分恢复miR-186-5p导致的黑色素含量下降。值得注意的是,miR-186-5p还参与调控细胞的增殖和迁移,而α-MSH不参与相关调控。  相似文献   

microRNAs在成年羊驼皮肤组织中的表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

朱芷葳  贺俊平  程志学  王海东  李鹏飞  乔德瑞  董常生 《畜牧兽医学报》2010,41(10)

本研究旨在分析成年羊驼皮肤中miRNAs的表达,探讨miRNAs在皮肤和毛囊中的调控作用.利用多物种miRNA芯片与成年羊驼皮肤组织miRNAs杂交,来分析成年羊驼皮肤组织中miRNAs的表达.结果显示有20个miRNAs信号在4个样本中表达量高,microRNAs在羊驼皮肤表达,提示它们可能参与了皮肤和毛囊的更新、生长和发育.  相似文献   

real-time PCR将成为分子生物学研究的重要检测技术     

朱芷葳  赫晓燕  姜俊兵  范瑞文  董常生 《畜牧兽医科技信息》2006,(3):25-26

近年来,real-tim e PCR技术作为一种敏感、快速、简便、重复性好的检测技术已广泛出现在生物学研究领域。real-tim e polym erase chain reaction(RT-PCR)是Kary M ullis在二十世纪八十年代在PCR的基础上发展革新的一项新技术,它能使小量DN A片段扩增一百万倍。这项技术推动了分子生物学技术的发展,简便的操作不仅可应用于普通实验,还可用于人类基因组工程。根据2003年调查的406位科学工作者,48%的研究人员近年来正在使用这项技术。随着使用这项技术的人数增多,各类相关的论文也相继增多。real-tim e PCR将会影响PCR技术的发展,并…  相似文献   

bta-miR-377靶向调控牛下丘脑CART基因表达的研究     

任静  郝琴琴  成俊丽  朱芷葳  许冬梅  贾雪纯  李鹏飞 《中国畜牧兽医》2022,49(9):3301-3309

  相似文献   

核糖体蛋白S5(RPS5)基因对羊驼毛色调控的研究     

李鹏飞  董常生  范瑞文  白瑞  朱芷葳  杜海燕 《畜禽业》2006,(20):16-18

本研究利用southern blotting技术从羊驼皮肤cDNA文库中筛选出核糖体蛋白S5(Ribosomal proteinS5,RPS5)基因,测序后利用生物信息学方法对该基因进行了相关分析。经分析发现羊驼RPS5基因序列中存在CCGG位点,推测羊驼RPS5基因在此位点发生甲基化。RPS5基因通过调节处于不同凋亡方式的黑色素细胞,保证黑色素数量的产生,从而对羊驼毛色产生调控作用。  相似文献   

羊驼核糖体蛋白S5(RPS5)全长基因的筛选及其序列分析     

李鹏飞  董常生  杜海燕  范瑞文  白瑞  朱芷葳 《畜禽业》2006,(24):6-9

本研究利用southernblotting技术从羊驼皮肤cDNA文库中筛选出核糖体蛋白S5(RibosomalproteinS5,RPS5)基因,测序结果表明该片断大小为436bp,含有一个完整的ORF。并利用生物信息学方法对该基因进行了分析,发现该基因编码的氨基酸在第1到88位之间含有一个典型的CARD结构域,即六个反平行的螺旋结构形成的结构域,该结构域对RPS5基因功能的体现起决定作用。  相似文献   

PAX3转录因子在羊驼皮肤组织中的表达和定位分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱芷葳  贺俊平  于秀菊  李鹏飞  程志学  董常生 《畜牧兽医学报》2012,43(5):729-734

本研究旨在研究PAX3在羊驼皮肤组织中的表达和分布。利用免疫组织化学和Western blot技术研究PAX3转录因子在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达与分布。结果表明PAX3在毛球基底层细胞之间,毛乳头周围和毛根部都存在阳性表达,并在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达存在显著差异(P<0.05)。结果提示PAX3参与了黑色素细胞的增殖、分化和迁移,PAX3与色素的形成相关。  相似文献   

Mitf-M在羊驼皮肤组织的表达与序列分析及免疫组织化学定位   总被引：2，自引：2，他引：0  

朱芷葳  贺俊平  于秀菊  程志学  董常生 《中国农业科学》2012,45(4):794-800

【目的】克隆羊驼皮肤组织表达的Mitf-M CDS序列,比较分析羊驼皮肤组织Mitf-M的特征,进一步定位分析Mitf-M蛋白表达的位置,为深入研究羊驼毛色基因表达机制奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增方法分段扩增Mitf-M CDS区,分别利用Clustal X和BioEdit生物学软件对氨基酸序列进行多重序列比较分析,免疫组织化学技术对Mitf-M蛋白定位分析。【结果】羊驼皮肤组织表达的Mitf-M的CDS区由419个氨基酸组成,具有bHLH-zip转录家族的保守结构域,该基因与牛和犬亲缘关系最近,Mitf-M蛋白主要分布于羊驼皮肤组织毛球基底层细胞之间与毛乳头周围的黑色素细胞中。【结论】与其它物种相比较,羊驼皮肤组织表达的Mitf-M蛋白保守性很强,在进化过程中的变异不大,可见Mitf-M为毛发的色素沉积提供重要的物质基础。  相似文献   

β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位   总被引：2，自引：1，他引：1  

于秀菊  董常生  范阔海  贺俊平  姜俊兵  朱芷葳  董彦君 《畜牧兽医学报》2010,41(3)

旨在研究β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位,探索其与毛色的关系。以成年白色和棕色羊驼为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术、Western blot和免疫组织化学技术,对β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤中mRNA、蛋白表达水平和定位进行研究。实时荧光定量PCR结果显示,β-catenin在棕色羊驼皮肤组织中的相对基因表达量是白色羊驼皮肤组织的1.662倍;Western blot结果显示,羊驼皮肤组织粗蛋白提取物中存在分子量约85 ku与兔抗β-catenin多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带,棕色羊驼平均蛋白表达量显著高于白色羊驼;免疫组织化学结果显示,β-catenin在羊驼皮肤的表皮、毛乳头、毛根鞘和皮脂腺中表达,根据光密度值得出,除皮脂腺之外,在表皮、毛乳头和毛根鞘的表达差异极显著(P0.01)。结果提示β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤组织中定位以及表达的差异,表明β-catenin参与毛色形成。  相似文献   

益生菌互作对肉鸡生长性能、肠道消化吸收及糖转运蛋白GLUT2影响的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

张利环  张若男  贾浩  马悦悦  朱芷葳  李慧锋  陈员玉 《畜牧兽医学报》2020,51(9):2165-2176

旨在研究益生菌互作对肉鸡生长性能、肠道养分消化吸收及相关糖转运蛋白的影响。本研究中,200只1日龄雄性爱拔益加肉雏鸡被随机分为4组,每组5个重复,每个重复10只。将干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌分别按比例混合后于牛乳中发酵。对照组正常饮水（control组）,益生菌Ⅰ组（混合比例为2：1：1）、Ⅱ组（混合比例为1：2：1）、Ⅲ组（混合比例为1：1：2）补充1%复合菌乳制品于饮用水中,各组皆饲喂基础日粮。整个试验饲养周期为42 d,每21 d为一个阶段。结果表明：1）与对照组相比,益生菌互作组均可显著提高肉鸡平均日增重（P<0.05）,改善饲料利用率（P>0.05）,在所有益生菌互作组中,益生菌Ⅰ组的肉鸡生长性能最好;2）益生菌互作显著刺激了空肠淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶的特异性活性（P<0.05）;3）益生菌互作组均显著提高了小肠绒毛高度（P<0.05）,降低了隐窝深度（P<0.05）,上调了GLUT2 mRNA的表达（P<0.05）,其中,以益生菌Ⅰ、Ⅲ组作用最佳。综上所述,益生菌互作能够增强消化酶活性、改善消化道结构、上调营养转运蛋白表达,提高养分的消化率及能量吸收有效性,从而提高肉鸡的生产性能;且当干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌的混合配比为2：1：1时,复合益生菌制剂对肉鸡的作用效果较佳。  相似文献