无特定病原体京白鸡的核型研究     

韩凌霞  高鹏飞  关云涛  曲连东 《中国家禽》2005,9(Z1):98-101

采用腹腔注射秋水仙素,取骨髓细胞制备染色体标本,对无特定病原体京白鸡的核型进行了分析.并根据前10对染色体相对长度、臂比值及着丝点指数的测量结果,与已公布的其它地方鸡品种进行了比较.  相似文献   

禽劳斯肉瘤病毒群特异性抗原基因gp27片段的克隆及序列测定     

宋建臣关云涛  刘怀然陈洪岩刘胜旺  蔡雪辉夏长友 《中国兽医科技》2003,33(11):21-24

以RT-PCR方法从人工感染禽劳斯肉瘤病毒(Rous sarcoma virus，RSV)SR-RSV的SPF雏鸡体内及SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物中分别扩增出720bp的gp27片段，将RT-PCR产物重组到质粒栽体pUCl9中，并对重组质粒进行酶切分析及序列测定。结果表明，克隆片段为完整的目的基因，该片段的核苷酸序列与国外分离株RSV J02342的同源性达97．3％。  相似文献   

不同H5N1亚型禽流感病毒在豚鼠体内的复制和传播能力评估     

张莹  高玉伟  邓国华  姜永萍  樊树芳  钟功勋  关云涛  陈化兰 《中国预防兽医学报》2010,32(3)

本研究以豚鼠作为哺乳动物模型,评价了6株H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的复制和水平传播能力。经滴鼻接种后,检测到6株病毒中有5株病毒在豚鼠上呼吸道和下呼吸道复制,病毒滴度为0.8LogEID50/mL～3.5LogEID50/mL(或g),豚鼠在感染后第2d至第10d可排出病毒。另外一株病毒A/duck/GX/22/02则仅能在豚鼠的下呼吸道低水平复制。在传播实验中,6株病毒中只有A/duck/GX/35/01能够在豚鼠间水平传播。上述研究结果表明,豚鼠适用于作为高致病性AIV哺乳动物水平传播的模型,而且H5N1亚型AIV在哺乳动物间的水平传播能力不同。本研究为进一步研究AIV在哺乳动物间水平传播的分子机制奠定了良好的基础。  相似文献   

鲤鱼基因组同源框Hoxa3a序列同源性分析与分子进化研究     

耿波  关云涛  孙效文  匡友谊 《水产学杂志》2011,24(4):50-53

本文利用生物信息学软件分析了鲤（Cyprinus carpio）基因组中同源框基因Hoxa3a与多种鱼类及其它生物的同源性,构建了分子进化树。结果表明：鲤与斑马鱼（Danio rerio）的序列同源性最高为95%,与大西洋鲑（Salmo salar）等四种鱼类的同源性次之为84%,与米氏叶吻银鲛（Callorhinch...  相似文献   

犬瘟热病毒A株N蛋白基因编码区的克隆与序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

李昌文  张洪英  刘怀然  关云涛  刘立奎  张坦  陈洪岩 《动物医学进展》2003,24(6):93-95

本试验对犬瘟热病毒 ( CDV) A株 N蛋白基因编码区进行了克隆与序列分析。结果表明 :CDV A株 N蛋白基因编码区核苷酸序列与Onderstepoor株。 A75/ 1 7株及 2 544/ han95株的同源性分别为 97.5%、94%及 93 % ,编码氨基酸的同源性分别为 98%、97%和 96%。  相似文献   

臭氧对禽流感病毒灭活作用的研究     

尹波  张小刚  关云涛 《黑龙江畜牧兽医》2009,(1)

禽流感是由正黏病毒科A型流感病毒引起的禽类从呼吸系统到全身严重败血症等多种症状的传染病.高致病性禽流感病毒的传播是多维的,如通过空气、粪便、饲料和饮水等途径传播.如何克服目前防控体系的缺陷,降低病毒的变异速度,有效阻断病毒的传播途径,创建新型的防控体系是解决禽流感问题的关键所在[1].  相似文献   

禽脑脊髓炎病毒VP1基因的克隆及表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

葛俊伟  关云涛  王云峰  刘怀然  李昌文  杨增岐  曲连东  陈洪岩 《中国预防兽医学报》2005,27(6):450-453

应用RT-PCR方法,扩增出AEV Van-roekel株结构蛋白基因VP1,测序结果表明VP1基因全长810bp,编码270个氨基酸;和AEV 1143株相比,核苷酸同源性为94.2%,氨基酸同源性为99.26%.将VP1基因定向克隆到pGEX-6p-1载体谷胱苷肽转移酶基因的下游,并把重组质粒转入宿主菌BL21中,经IPTG诱导后,VP1基因得以表达.表达产物经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,确定表达的融合蛋白大小约为58Ku,且具有良好的反应原性.将表达产物纯化后免疫试验兔,琼脂扩散试验显示免疫血清能与禽脑脊髓炎琼脂扩散标准阳性抗原呈特异反应,表明重组VP1蛋白保留了天然蛋白的部分活性.  相似文献   

兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因克隆与序列分析   总被引：15，自引：2，他引：13  

刘怀然  陈洪岩  关云涛  王云峰  李昌文  夏长友  张立成 《中国预防兽医学报》2002,24(5):321-324

自感染RHDV致死的兔肝脏组织中提纯病毒，提取病毒总RNA，以RT－PCR方法扩增得到RHDV VP60基因全长片段，克隆到T载体中，经酶切分析及PCR鉴定后进行序列测定。同一毒株不同克隆产物进行3次测序，测序结果已输送到GeenBank中（注册号为AF453761）。将测得序列与GeneBank中记录的RHDV不同分离株进行比较。比较结果表明：各毒株间核苷酸的同源性为91％－98％，氨基酸同源性为94％－99％，氨基酸变异多发生在高变区，进一步证明了毒株的高度保守性，为明确我国RHDV地方株VP60蛋白的分子特征、分子诊断试剂及新型疫苗的研制奠定了基础。  相似文献   

禽脑脊髓炎病毒VP3基因的克隆与序列测定   总被引：1，自引：0，他引：1  

张立成关云涛  杨增岐陈洪岩 王云峰 《中国兽医科技》2004,34(11):63-66

根据已发表的禽脑脊髓炎病毒(AEV)序列设计了1对引物，利用RT-PCR技术，从AEVVR株感染的SPF鸡胚脑以及内脏器官组织中成功扩增出了VP3基因，回收、纯化后克隆到T载体中，用常规方法转化JM109感受态细胞。阳性重组质粒经酶切及PCR鉴定后测定核酸序列。结果表明，VR株VP3基因全长735bp，共编码245个氨基酸，与AEV-1143标准毒株相应片段的核苷酸和氨基酸同源性分别为93．0％和97．0％；并将其与其他小RNA病毒进行了比较。  相似文献   

禽白血病劳斯肉瘤病毒衣壳蛋白P27基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备   总被引：6，自引：0，他引：6  

乔彩霞  关云涛  陈洪岩  刘怀然  蔡雪辉  李昌文  葛俊伟  刘家森 《中国预防兽医学报》2004,26(3):169-173

从人工感染禽白血病劳斯肉瘤病毒的SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物中提取RNA,通过RT-PCR方法扩增出720bp的gag P27基因片段,克隆至pMD18-T载体,酶切鉴定后进行序列测定和分析,表明该片段编码序列与国外RSV分离株(JO2342)的同源性达97.3%.将该片段亚克隆至pGEX-6 P-1原核表达载体,转化受体菌BL-21,经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE凝胶电泳,考马斯亮蓝染色,证明目的基因得到高效表达,所表达蛋白是大小为56kD的融合蛋白,占菌体总蛋白的23%.表达产物经Glutathion Spharose4 B树脂亲和层析法纯化后,每100 mL菌液最终可获得5 mg重组t27蛋白,蛋白纯度在90%以上.用兔抗自然P27蛋白阳性血清进行Western blot检测,表明重组P27蛋白有抗原反应活性.用纯化的重组P27蛋白免疫兔子制备多克隆抗体,产生的抗体与禽白血病全病毒抗原可以发生特异性反应.所制备的重组P27蛋白和多克隆抗体将为禽白血病的诊断及ELISA试剂盒的研制奠定基础.  相似文献