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1.
【目的】 研究牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E0和E2串联基因重组腺病毒作为基因工程疫苗的应用潜力。【方法】 采用PCR扩增、E0-E2基因融合并构建重组穿梭质粒pDC316-E0-E2,将其与AdMax腺病毒系统的骨架质粒共转染HEK293T细胞包装成重组腺病毒,通过Western blotting进行验证,并通过Reed-Muench法测定病毒滴度,通过肌内、皮下免疫接种小鼠后用ELISA方法及流式细胞检测进行免疫效果试验。【结果】 成功扩增到E0、E2基因目的片段,大小分别为681和1 122 bp,得到了完整的腺病毒Ad5-E0-E2;测定其滴度为1.1×1010 PFU/mL;Western blotting检测结果显示,Ad5-E0-E2外源基因在HEK293T细胞中表达,得到了与预期相符的目的条带(65 ku);ELISA检测结果表明,通过肌内和皮下注射Ad5-E0-E2均能产生较高的抗体水平;流式细胞检测显示首免、二免后肌内和皮下注射Ad5-E0-E2组CD4、CD4/CD8比值均极显著高于PBS对照组(P<0.01)。【结论】 本试验成功构建重组腺病毒Ad5-E0-E2,且具有较好的反应原性和免疫原性,能诱导机体产生针对BVDV的特异性抗体。  相似文献   
2.
为研究发酵酒糟对西威牛免疫指标、炎症指标以及十二指肠细菌群落的影响,试验将18头西威公牛随机分为3组,对照组饲喂基础饲粮,试验1、2组分别添加15%、30%发酵酒糟,预试期15 d,正试期90 d。结果表明:与对照组相比,试验1组免疫球蛋白G (IgG)、分泌型免疫球蛋白A (SIgA)、Muribaculaceae分别显著提高了18.83%、27.99%、25.77%(P <0.05),试验1组疣微菌科UCG-010极显著降低了10.43%(P <0.01),试验2组白介素2、白介素4、白介素6、CD8、免疫球蛋白A、变形菌门、放线菌门、纤维杆菌门、疣微菌门和Muribaculaceae分别显著提高了22.22%、17.43%、19.31%、11.91%、18.91%、31.64%、41.5%、50%、42.86%和25.41%(P <0.05),试验2组瘤胃菌科显著降低了27.17%(P <0.05),试验2组CD4分子、IgG、SIgA和毛螺菌科分别极显著提高了14.53%、24.89%、38.52%和50%(P <0.01),试验2组疣微菌科UCG...  相似文献   
3.
为探究日粮添加15%和30%发酵酒糟对西威牛血液和瘤胃菌群的影响,将体况良好、体质量相近的18头西威公牛(西门塔尔牛♂×威宁黄牛♀)随机均分成3组,对照组饲喂基础饲粮,试验I组、II组分别添加15%、30%发酵酒糟,预试期为15 d,正式试验期为90 d。采用全自动动物生化分析仪、酶标仪检测西威牛血清生化和抗氧化指标,使用Illumina NovaSeq 6 000测序平台对瘤胃菌群进行扩增和测序。结果显示:与对照组相比,试验I组总抗氧化能力(T-AOC)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)显著升高(P <0.05);试验II组超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)极显著升高(P <0.01),丙二醛(MDA)极显著降低(P <0.01),T-AOC、AST、碱性磷酸酶(ALP)、甘油三酯(TG)显著升高(P <0.05);试验I组、II组广古菌门(Euryarchaeota)相对丰度显著低于对照组(P <0.05),而试验II组绿弯菌门(Chloroflexi)相对丰度极显著高于对照组(P <0.01),试验I组显著高于对照组(P...  相似文献   
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