狂犬病病毒SRV9克隆株核蛋白基因的克隆、表达与特性分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

袁慧君  扈荣良  张守峰  张茂林  涂长春 《中国预防兽医学报》2003,25(1):5-8

根据已发表的狂犬病病毒核蛋白基因序列，设计并合成了一对引物，从SAD株驯化的SRV9。蚀斑株中提取病毒RNA，通过RT-PCR扩增出核蛋白的全长cDNA序列，测序结果显示，其序列与国外报道的SAD母源株序列一致。将核蛋白的cDNA克隆至原核表达载体pET-28b( )中，转化大肠杆菌BL21（DE3）plyss，于30℃1mmol/LIPTG条件下诱导表达，大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE分析，在分子量约为56kDa处出现一新的蛋白带。和预期的目的蛋白分子量相符，Western-blotting检测表明，表达产物能与狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应，出现单一反应带，扫描分析显示，表达产物占菌体总蛋白的23%，包涵体分离，纯化后，纯度达89%，上述结果为核蛋白在狂犬病基因免疫和免疫检测中的进一步应用奠定了基础。  相似文献   

分离群体中常染色体上标记基因的数量遗传方差——Ⅰ.含有一个数量性状位点(QTL)时的计算方法     

张智英 《中国牛业科学》1994,(1)

应用常染色体上的标记基因研究能够加快数量性状的遗传进展。亲代由标记基因遗传给后代的加性遗传方差值可以用来测定标记基因这种效益。分别在个体水平上以及在复合连续平衡的分离群体水平上建立了标记基因加性遗传方差值的理论方程。这些方程包括与标记基因连锁的数量性状位点数、这些数量性状位点的效应值以及与标记基因有关的重组率。并就分离群体中标记基因加性遗传方差的期望值进行了推导。在分离群体的系谱选择方案中,常染色体上遗传方差中绝大部分与位于该染色体上的标记基因相关。对于牛的一个平均长度染色体来讲,这部分值大约是该染色体孟德尔分离方差值的40% 。标记基因的位置效应和干扰因素对这一期望值的影响是很小的,而染色体的长度对期望方差值影响很大。如果标记基因缺乏多态型以及染色体替代效应估计偏差会大大降低MAS的选择效果。常染色体上标记基因遗传方差期望值的大小表明:即使当标记基因处在一个非活动位点,在分离群体中,仍有较大的染色体替代效应存在。  相似文献   

大骨鸡中MSTN基因表达规律性的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

胡兰  郭东新  胡锐  刘梅  王娜  栾新红 《猪业科学》2003,20(11):42-44

本实验以大骨鸡为试材,采用RT-PCR法检测了MSTN基因在大骨鸡不同器官、不同时间的表达情况,结果表明MSTN基因在骨骼肌中表达水平较高,在心肌、肾脏、脑、肠、舌中也有微量表达,但在肺、肝脏中未检测出MSTNmRNA,而且在14日龄时表达水平明显低于35日龄和56日龄,而且在孵化后一周时胸肌中MSTN基因的表达水平达到最低。  相似文献   

Molecular genetics of behaviour: research strategies and perspectives for animal production     

Pierre Mormède 《Livestock Production Science》2005,93(1):15-21

Genetic factors are undoubtedly involved in inter-individual variability of the behaviours that may be important for livestock production, as shown by pedigree studies, comparison of genetic stocks raised in the same environment, and selection experiments. The knowledge of gene polymorphisms responsible for genetic variability would increase the efficiency of selection, as shown for instance by the identification of the ryanodine receptor gene that harbours the mutations responsible for the porcine stress syndrome, that allows the eradication of the susceptibility allele. One strategy is to screen systematically the genes that are known to be involved in regulation of behaviour (functional candidate genes). This strategy is however very difficult for most behavioural traits, since behaviour is an emerging function from the whole brain/body and the molecular pathways involved in genetic variability are very poorly understood. Another strategy is to investigate linkage between trait variation and genetic markers in a segregating population (usually an intercross or backcross between two strains or breeds contrasting for the trait under study). It allows the detection of genomic regions influencing that trait (quantitative trait loci or QTL), and further investigation aims at the identification of the gene(s) located in each of these regions and the molecular polymorphisms involved in phenotypic variation. Although many QTL have been published for behavioural traits in experimental animals, very few examples are available where strong candidate genes have been identified. Further progress will be very much dependent upon the careful definition of behavioural traits to be studied (including their importance for animal production), on the reliability of their measurement in a large number of animals and on the efficient mastering of environmental factors of variability. The fast increase in the knowledge of genome sequence in several species will undoubtedly facilitate the application to farm animal species of the knowledge obtained in model organisms, as well as the use of model organisms to explore candidate genes detected by QTL studies in farm animals.  相似文献   

柑橘裂皮病类病毒的一步RT-PCR法检测及其在甜橙体内的分布   总被引：3，自引：0，他引：3  

彭军  周常勇  唐科志  谭万忠 《果树学报》2005,22(6):744-747

柑橘裂皮病是由柑橘裂皮病类病毒(Citrusexocortisviroid,CEVd)引起的一种重要的柑橘病害。分别采用快速微量核酸提取法和SDS-KAc抽提法在表现症状的Etrog香橼中提取核酸,采用一步RT-PCR法对CEVd进行检测,结果显示SDS-KAc法可以消除带毒样品中非特异性条带。从嫁接接毒的铜水72-1锦橙植株的接穗部取嫩叶、老叶、皮,从砧木部茎杆上取老皮以及根皮分别提取总核酸进行RT-PCR检测,分析CEVd在甜橙体内的分布情况。初步检测结果表明在接穗的嫩叶、老叶、皮,砧木部茎杆的老皮和根皮上都可以检测到CEVd,以接穗部叶和皮检出稳定性高。  相似文献   

摄入不同能量的围产期乳牛肝低密度脂蛋白受体mRNA丰度的比较   总被引：1，自引：0，他引：1  

王雪莹孙玉成  李红梅王哲 杨连玉 《中国兽医科技》2005,35(10):811-815

将30头健康、经产、处于围产期的黑白花乳牛随机分为3组，每组10头。从产前28d开始，低能量组乳牛饲喂《中国奶牛饲养标准（2000）》减少20％日粮（能量摄入80％），对照组乳牛饲喂《标准》日粮（能量摄入100％），高能量组乳牛饲喂《标准》增加20％日粮（能量摄入120％），产后各组乳牛均饲喂标准日粮。至产后第56d结束试验；采用内对照RT-PCR方法检测摄入不同能量的围产期乳牛肝活体组织低密度脂蛋白受体（LDLR）mRNA丰度。结果，不同能量组乳牛肝LDLR mRNA丰度产前至产后均呈现先升高后降低的趋势。100％和120％能量组肝LDLR mRNA丰度在产后14d达最大值，且产后均高于产前（产后56d除外，P〈0．01或P〈0．05）；而80％能量组产后1d即达到最大值，产前14d至产后14d，LDLR mRNA相对表达量显著高于100％和120％能量组；产后28～56d，120％能量组显著高于80％和100％能量组（P〈0．01）。表明围产期乳牛能量摄入水平对肝LDLR mRNA丰度有显著影响。  相似文献   

Citrus variegation virus: Molecular Variability of a Portion of the RNA 3 Containing the Coat Protein Gene and Design of Primers for RT-PCR Detection     

Bahia Bennani  Celso Mendes  Mustapha Zemzami  Houssine Azeddoug  Gustavo Nolasco 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》2002,108(2):155-162

  相似文献   

Distribution of citrus viroids and <Emphasis Type="Italic">Apple stem grooving virus</Emphasis> on citrus trees in Japan using multiplex reverse transcription polymerase chain reaction     

Takao Ito  Nobuyuki Namba  Tsutae Ito 《Journal of General Plant Pathology》2003,69(3):205-207

  相似文献   

RT—PCR检测南方菜豆花叶病毒     

李尉民 Hull.  R 《中国进出境动植检》1997,(1):28-30

根据南方菜豆花叶病毒（ＳＢＭＶ）两株系Ｂ和Ｃ的核酸序列设计两对引物，利用ＲＴ－ＰＣＲ可以特异地区分纯化的和０．２ｇ病叶中的两株系，ＲＴ－ＰＣＲ检测ＳＢＭＶ－Ｂ的灵敏度为１０ｐｇ。  相似文献   

检测猪流行性腹泻病毒的R-PCR方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

倪艳秀  何孔旺  俞正玉  郭蓉利  吕立新  陈兆霞 《畜牧与兽医》2004,36(1):10-12

根据猪流行性腹泻病毒 (PEDV)的N基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 641bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测的猪流行性腹泻病毒的RT PCR方法。对猪轮状病毒 (PRV)、猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)的RT PCR检测结果均呈阴性。对PEDV JS株的RT PCR产物的序列分析表明 ,与CV777株的同源性为 97 3 %。  相似文献