转基因甘蔗BtG-2的T-DNA侧翼序列分析及其转化事件特异性检测     

冯翠莲  万玥  冯小艳  王俊刚  赵婷婷  王文治  沈林波  张树珍 《热带作物学报》2021,42(9):2468-2477

转基因甘蔗BtG-2是利用农杆菌介导法把Cry1Ac-2A-gna融合抗虫基因导入‘新台糖22号’的转基因甘蔗株系,具有良好的抗虫特性和农艺性状。为了明确转基因甘蔗BtG-2的分子特征及其检测方法,推进其生物安全性评价工作,以BtG-2的T2代为研究材料,利用Southern杂交检测外源基因在转基因甘蔗基因组内的拷贝数;利用染色体步移技术分离外源基因在甘蔗基因组中插入位点的侧翼序列,并建立了该转化体高效灵敏的特异性PCR检测方法。结果表明：Southern杂交检测证明外源T-DNA以单拷贝方式插入BtG-2株系;经过3次的热不对称巢式PCR扩增,获得外源基因T-DNA左边侧翼序列984 bp和右边侧翼序列705 bp;以这2个序列和相应的T-DNA的左右端序列分别设计3对检测引物对,建立了BtG-2株系的转化事件特异性PCR检测方法,扩增效率最高的引物对LS011/LA451和RS160/RA588分别扩增到440 bp和428 bp的特异片段。其中T-DNA左侧设计的LS011/LA451检测引物对扩增的灵敏度高、特异性强,能够在甘蔗BtG-2基因组DNA相对含量为0.1%的模板中检测出转基因目的成分,相当于9个单倍体基因组拷贝数。本研究完成了转基因株系BtG-2的分子特征及其转化事件特异性检测,为该转基因甘蔗及其衍生产品的检测和身份识别提供技术依据。  相似文献   

饲料中无机元素分析方法研究进展     

徐祎然  左鹏翔  王志飞 《畜牧与饲料科学》2019,40(7):50-54

饲料中所含的无机元素对动物生长具有重要意义。在饲料中过量添加无机元素会导致环境污染问题,也会通过食物链最终危害消费者的身体健康,因此,对饲料产品中的无机元素进行检测和动态监控尤为重要。综述了近年来饲料中无机元素含量检测主要应用的前处理方法及其含量检测技术,分析了不同前处理方法和含量检测技术的优点和不足,以期为饲料中无机元素分析方法的科学、合理应用提供参考。  相似文献   

猪繁殖性状的遗传改良策略     

李玉华  曾勇庆 《猪业科学》2003,20(1):11-14

猪繁殖性能的提高将为养猪业带来巨大的经济效益 ,目前多数育种者将提高猪的繁殖力作为主要育种目标 ,并用数学遗传学方法和分子育种技术对繁殖性状进行改良。  相似文献   

城镇化水平计算方法比较分析   总被引：5，自引：0，他引：5  

王德成  张领先  王志琴 《农机化研究》2004,(3):61-63,66

城镇化是社会经济发展的必然趋势，与小城镇人口、经济实力、社会发展和环境保护等方面密切相关。城镇化判别指标归纳起来分两大类：一类是单一指标法或称主要指标法；另一类是多项指标法、复合指标法或称综合指标法。在常用的、单一指标法的城镇化水平计算方法中，城镇人口比重指标法和带眷系数法两种方法能够比较准确地反映小城镇的城镇化水平，尤其以城镇人口比重指标法计算结果最符合实际。  相似文献   

花粉管通道法转基因抗虫棉外源基因的整合方式   总被引：4，自引：0，他引：4  

张保龙  倪万潮  张天真  郭旺珍  徐英俊  姚姝 《江苏农业学报》2004,20(3):144-148

对花粉管通道法培育的转Bt基因抗虫棉GK19、GK22、1016、1018、1022、1025、GK5、GKsu12和SGK1进行Southern杂交分析。结果表明,目的基因能够完整整合到基因组里,HindⅢ酶切位点有可能发生甲基化或丢失。除1018以外的上述8个抗虫棉的分析结果还表明,载体骨架没有整合到棉花基因组中。  相似文献   

转基因动物研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

胡建宏李青旺  王立强江中良于永生  解广勤 《家畜生态》2004,25(2):50-53

转基因动物是现代生物技术中一个极其重要的研究领域，目前已经有转基因小鼠、兔、绵羊、山羊、猪、牛、鸡和鱼等多种转基因动物问世。本文综述了转基因动物的制作方法、转基因动物的应用研究以及所取得的重要成就，并指出了转基因动物存在的主要问题，展望了其发展前景。  相似文献   

人血栓调节蛋白基因的表达及转基因小鼠的建立     

陈红英  苟克勉  王晓琳  陈学进  黄秀英  孙方臻 《中国兽医学报》2003,23(2):115-118

用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白（hTM)基因，将其克隆到带有人EF－1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上，得到表达质粒pEF-TM。在转染pEF-TM的COS－1细胞中，hTM得到了瞬时表达，并且正确地定位到细胞膜上。用pEF-TM转染猪内皮细胞（PEC），经G418筛先得到稳定转染的克隆。凝血活性测定结果显示，表达hTM的PEC凝血时间明显延长，表明其抗凝血能力增强。通过显微注射方法，得到了1只F0代hTM转基因小鼠。Southern杂交结果表明，该转基因小鼠整合了9个拷贝的pEF-TM DNA,并能将外源DNA遗传给后代。  相似文献   

转基因植物对蜜蜂的安全性（下）     

黄少康 《蜜蜂杂志》2001,(10):5-6

转基因植物已在全球范围内大面积推广应用 ,全球 5大转基因植物中的油菜、棉花、玉米均是主要的蜜粉源植物 ,对养蜂生产有重要意义 ,其对蜜蜂的安全性问题值得关注。 2种主要的抗虫 (Bt毒蛋白、蛋白酶抑制剂 )基因或抗真菌基因的产物只有在高浓度时才可能对工蜂的寿命、消化酶活性、行为等有不良影响。从目前的研究来看 ,转基因植物对蜜蜂是安全的  相似文献   

果树技术经济效益评价的程序与方法研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

姚允聪  王有年  李金光  郭平 《北京农学院学报》1992,(2)

本文结合果树生产实际,阐述了果树生产技术经济效益评价研究的基本方法、基本程序步骤和各步骤实施的要求,对评价结果的分析方法进行了较为详细的说明。其中包括对比分析法、试算分析法、边际分析法在果树生产技术经济效益评价研究上的应用。同时本文对该课题中所涉及的几个果树技术的经济效益评价方法程序进行了各论。  相似文献   

Influence of the Indoleacetic Acid-Lysine Synthetase Gene (iaaL) of Pseudomonas syringae subsp. savastanoi on Yield Attributes of Potatoes     

M. Fladung 《Plant Breeding》1993,111(3):242-245

The iaaL gene of Pseudomonas syringae subsp. savastanoi encodes an indoleacetic acid-lysine synthetase which conjugates free indoleacetic acid (IAA) with lysine. lAA-lys is biologically less active than free IAA. The iaaL coding region was expressed under the control of the cauliflower mosaic virus 35S promoter and transgenic potato plants were produced (Spena et al. 1991). 35S iaaL potato plants are characterized by increased internodal length and epinastic bending of older leaves. In three greenhouse experiments with plants grown in pots of different size and in two growth chamber experiments tuber number increased in iaaL transgenic plants compared to untransformed and vector-transformed controls of the same genotype. The increase in tuber numbers observed under controlled conditions was reflected in tuber yield which increased in the pot grown transgenics.  相似文献