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为确定洛阳某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎的病原种类及其血清型,为其临床科学防疫和合理用药提供参考方案,本试验无菌采集了病猪肺脏等病料,采用病菌培养后形态观察、革兰氏染色、生理生化特性试验、PCR诊断等技术对病原菌进行实验室分离鉴定,通过基因测序和同源性分析方法对其进行确诊,通过动物攻毒试验和药敏试验分析分离菌株的致病性和耐药性,采用5对分型引物对分离菌进行基因分型以确定病原菌血清型。结果显示,分离菌2007菌落形态为光滑、透明、边缘整齐、圆形、隆起的小菌落,革兰氏染色特征为阴性杆菌且呈多型性,具有猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）的典型培养特征,且生化结果符合猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的生化特性。同源性分析结果显示,分离菌株2007与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌菌株FJ848573.1同源性为99.4%,说明分离株2007是猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。动物攻毒试验结果显示,分离菌株2007对小鼠有强致病性。药敏试验结果显示,分离株2007对泰妙菌素、氨苄西林和头孢噻呋钠等高敏,对替米考星、红霉素、氟苯尼考等20种抗菌药完全耐药,对34种抗生素的耐药率高达76.5%,具有较强的多重耐药性。分离菌2007基因分型扩增到目的基因片段与血清型5型结果相符。本试验结果为发病猪场提出了解决该病的具体防治措施,并最终获得了良好的效果,为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌临床耐药折点的制定提供了一些参考。 相似文献
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猪胸膜肺炎放线杆菌PCR诊断方法的建立与应用 总被引：5，自引：3，他引：5
根据胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ基因设计1对引物，扩增特异的650bp棱酸片段，建立了应用PCR检测猪胸膜肺炎放线杆菌的方法。特异性试验结果表明，12个血清型的放线杆菌参考菌株均能扩增出650bp特异性的核酸片段，而大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪肺炎支原体、伤寒沙门氏菌和支气管败血性波氏杆菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明，PCR的最低检出限量为500个放线杆菌。利用建立的PCR检测方法对22株从山东省不同地区分离的疑似胸膜肺炎放线杆菌菌株进行检测．结果14株为阳性。对感染猪病变组织的检测结果表明，病变部位不同，胸膜肺炎放线杆菌的检出率不同，其中以扁桃体的检出率最高。 相似文献
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《中国畜牧兽医》2020,(4)
为确定洛阳某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎的病原种类及其血清型,为其临床科学防疫和合理用药提供参考方案,本试验无菌采集了病猪肺脏等病料,采用病菌培养后形态观察、革兰氏染色、生理生化特性试验、PCR诊断等技术对病原菌进行实验室分离鉴定,通过基因测序和同源性分析方法对其进行确诊,通过动物攻毒试验和药敏试验分析分离菌株的致病性和耐药性,采用5对分型引物对分离菌进行基因分型以确定病原菌血清型。结果显示,分离菌2007菌落形态为光滑、透明、边缘整齐、圆形、隆起的小菌落,革兰氏染色特征为阴性杆菌且呈多型性,具有猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的典型培养特征,且生化结果符合猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的生化特性。同源性分析结果显示,分离菌株2007与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌菌株FJ848573.1同源性为99.4%,说明分离株2007是猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。动物攻毒试验结果显示,分离菌株2007对小鼠有强致病性。药敏试验结果显示,分离株2007对泰妙菌素、氨苄西林和头孢噻呋钠等高敏,对替米考星、红霉素、氟苯尼考等20种抗菌药完全耐药,对34种抗生素的耐药率高达76.5%,具有较强的多重耐药性。分离菌2007基因分型扩增到目的基因片段与血清型5型结果相符。本试验结果为发病猪场提出了解决该病的具体防治措施,并最终获得了良好的效果,为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌临床耐药折点的制定提供了一些参考。 相似文献
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通过PCR扩增分离保存的8株禽波氏杆菌、3株兔支气管败血波氏杆菌及1株猪支气管败血波氏杆菌菌株的23S rRNA基因的片段(710bp),分别克隆到载体pMD18-T后测序。利用BLAST工具进行同源性搜索;用DNAStar分析软件进行同源核苷酸序列的多重比较分析并构建禽波氏杆菌菌株的系统生物进化树。结果显示,8株禽波氏杆菌核苷酸序列之间同源性为99.2%～99.7%,与GenBank中收录的NC_010645株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为92.4%～92.5%,与兔支气管败血波氏杆菌和猪支气管败血波氏杆菌的核苷酸序列同源性均为98.5%～99.2%。国内分离的禽波氏杆菌菌株和支气管败血波氏杆菌菌株均与国外分离菌株在遗传基因上有一定的差异。结果表明,23S rRNA序列分析可以作为鉴定禽波氏杆菌的一种快速简便的方法。 相似文献
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地高辛标记探针检测猪胸膜肺炎放线杆菌的研究与应用 总被引：5，自引：1，他引：4
利用PCR反应扩增出胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ基因650 bp的DNA,回收并纯化PCR产物,用地高辛标记,制备出地高辛标记的核酸探针。该探针与不同血清型的胸膜肺炎放线杆菌均能发生特异性杂交,而与大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、猪肺炎支原体、支气管败血波氏杆菌等细菌的核酸杂交均为阴性。对胸膜肺炎放线杆菌的最低检出限量为10×102 个放线杆菌。对疑似胸膜肺炎放线杆菌感染病变组织检测结果表明,在扁桃体、鼻腔、气管、肺脏均可检测出胸膜肺炎放线杆菌,以扁桃体的检出率最高。为猪胸膜肺炎放线杆菌的诊断和流行病学调查提供了良好的方法。 相似文献
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为了了解辽宁地区规模化养殖场(户)中猪呼吸道病原菌的流行分布情况及耐药性情况。对2022—2023年采集规模化养殖场(户)中不同阶段的猪患呼吸道症状的咽拭子、鼻拭子、肺脏、肝脏及肾脏等病料组织349份，采用常规细菌分离鉴定方法对采集的349份猪患呼吸道症状的咽拭子、鼻拭子、肺脏、肝脏及肾脏等病料组织进行鉴定，采用K-B药敏纸片法分别测定分离呼吸道细菌性病原菌对临床中常用的药物耐药情况。结果显示：从349份病料样品中多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌支气管败血波氏杆菌菌株的检出率分别为7.8%(26株)、 12.2%(40株)、11.5%(39株)、21株(6.0%);分离的4种呼吸道病原菌均对头孢噻呋、头孢噻肟、氟苯尼考等7种药物敏感，对阿莫西林、氨苄西林、新霉素等7种药物耐药。本研究为该地区规模化养殖场及散养户中不同阶段的猪呼吸道病防控及合理指导临床用药提供参考。 相似文献
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猪小肠抗菌肽Cecropin P1对猪呼吸道菌抑菌活性的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
《中国动物传染病学报》2016,(1)
以猪链球菌、金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、猪致病性大肠杆菌、化脓性链球菌7株猪呼吸道常见菌为实验菌,检测猪小肠抗菌肽对常见的猪呼吸道菌的抑菌效果。结果显示,猪小肠抗菌肽对这7株呼吸道菌均有不同程度的抑菌作用,对化脓性链球菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作用最为明显,最小抑菌浓度均为49.5μg/m L,对猪链球菌和大肠杆菌也有较为明显的抑菌活性,而对猪支气管败血波氏杆菌的最小抑菌浓度为398μg/m L。当前在抗生素大量使用导致细菌产生广泛的耐药性的情况下,抗菌肽以其具有抗菌谱广、无毒、稳定性高、不易产生耐药性且在体内无残留等优点,使抗菌肽抑菌活性的研究显得尤为重要。 相似文献
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1发病原因1．1病原因素病毒类主要有猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、蓝耳病病毒、网环病毒Ⅱ型、流感病毒等；细菌类主要有链球菌、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、化脓棒状杆菌、支气管败血波氏杆菌、肺炎支原体、霍乱沙门氏菌等； 相似文献
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《中国兽医杂志》2019,(5)
为了在对四川部分猪场3种呼吸道病原菌即支气管败血波氏杆菌(Brodetella bronchiseptica,B.bronchiseptica)、副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,H.parasuis)及胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,A.pleuropneumoniae)分离鉴定的基础上,分析这3种病原菌单一和混合感染的情况,并通过药敏试验筛选敏感药物,为临床药物治疗提供参考。从16头病死猪肺脏样品中分离鉴定出B.bronchieseptica、H.parasuis各6株,分离率为37.5%(6/16),A.Pleuropneumoniae 5株,分离率为31.25%(5/16);B.bronchiseptica与H.parasuis、B.bronchiseptica与A.pleuropneumoniae、H.parasuis与A.pleuropneumoniae二重感染率分别为6.25%(1/16),B.bronchieseptica、H.parasuis与A.pleuropneumoniae三重感染率为6.25%(1/16)。药敏试验结果显示,分离的3种菌共17株菌皆对头孢噻肟敏感;对阿莫西林、青霉素、红霉素、罗红霉素、环丙沙星、氟哌酸、头孢拉定、链霉素、卡那霉素、氟苯尼考、庆大霉素、氨苄西林、四环素等13种抗生素均存在一定的耐药性。本试验丰富了四川地区猪呼吸道多种病原菌感染的数据,并为部分猪场合理用药提供了依据。 相似文献
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从山东省泰安市采集的38份具有严重呼吸道症状的病死猪的肺脏、气管和扁桃体进行胸膜肺炎放线杆菌(APP)的分离鉴定,其中14株菌株表现出形态多样性、革兰氏染色阴性等特点,小鼠试验显示有较强的毒力,PCR电泳结果得到了650bp的预期目的片段。系统的生物学鉴定表明,这14株分离菌为胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus Pleuropneaumoniae,APP)。对确诊的14株APP采用凝集试验进行血清型检测。结果从山东省泰安市分离到14株2个血清型的胸膜肺炎放线杆菌,其中,血清7型8株、血清5型6株,血清7型、5型为绝对优势血清型。 相似文献
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1猪呼吸道疾病综合征的病因 猪呼吸道疾病综合征(PRDC)主要由两类病原引起：一是潜在原发病原(原发性感染疾病)，通常包括由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)等所致的病毒性疾病和猪肺炎支原体、胸膜肺炎放线杆菌及支气管败血性波氏杆菌等引起的细菌性疾病。二是继发病原(继发性感染疾病)， 相似文献