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本试验从河南省多个养猪场采集有明显呼吸道症状的猪肺脏和鼻拭子,进行支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)的分离鉴定,通过病原的分离、培养对分离菌株进行形态观察、培养特性和生化试验鉴定,以及用支气管败血波氏杆菌flaB基因的特异性引物进行PCR鉴定,结果表明,有8株分离菌株扩增出了237 bp的特异性目的条带,结合形态观察及生化试验鉴定,确认成功分离到了8株猪源性支气管败血波氏杆菌;药敏试验结果显示,分离菌株对强力霉素、氯霉素、氟苯哒唑、氧氟沙星、四环素、卡那霉素、庆大霉素、奈丁酸和阿米卡星高度敏感。 相似文献
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通过PCR扩增分离保存的8株禽波氏杆菌、3株兔支气管败血波氏杆菌及1株猪支气管败血波氏杆菌菌株的23S rRNA基因的片段(710bp),分别克隆到载体pMD18-T后测序。利用BLAST工具进行同源性搜索;用DNAStar分析软件进行同源核苷酸序列的多重比较分析并构建禽波氏杆菌菌株的系统生物进化树。结果显示,8株禽波氏杆菌核苷酸序列之间同源性为99.2%～99.7%,与GenBank中收录的NC_010645株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为92.4%～92.5%,与兔支气管败血波氏杆菌和猪支气管败血波氏杆菌的核苷酸序列同源性均为98.5%～99.2%。国内分离的禽波氏杆菌菌株和支气管败血波氏杆菌菌株均与国外分离菌株在遗传基因上有一定的差异。结果表明,23S rRNA序列分析可以作为鉴定禽波氏杆菌的一种快速简便的方法。 相似文献
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禽波氏杆菌分离株的16S rRNA基因序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
采用PCR方法对本实验室分离保存的10株禽波氏杆菌、3株兔支气管败血波氏杆菌及1株猪支气管败血波氏杆菌菌株,扩增其16SrRNA基因的5′端片段（783bp）,并测定所得片段的DNA序列。用DNAStar分析软件将所获得的序列与GenBank中的禽波氏杆菌序列进行比较,由此构建禽波氏杆菌菌株的系统发育树。结果显示,10株禽波氏杆菌核苷酸序列与GenBank中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列的同源性为82.0%～82.5%,与兔支气管败血波氏杆菌和猪支气管败血波氏杆菌核苷酸序列的同源性均为99.2%～99.9%,其中P9（山鸡波氏杆菌）、P11（兔支气管败血波氏杆菌）与P14（猪支气管败血波氏杆菌）分别发生1个核苷酸的缺失。本试验结果表明,16SrRNA序列分析是鉴定禽波氏杆菌的一种快速而准确的方法。 相似文献
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动物园野生动物支气管败血波氏杆菌的分离鉴定与系统发育树的构建 总被引：1，自引：0，他引：1
采用Biolog和16SrRNA基因序列分析法对分离自北京动物园的8株支气管败血波氏杆菌进行了鉴定。菌株经纯化培养,用Biolog微生物鉴定系统进行了鉴定,结果表明,8株菌株为支气管败血波氏杆菌。菌株经纯化培养,采用菌落PCR方法进行16SrRNA基因序列扩增,扩增产物纯化后直接进行测序。序列经人工校对后用ClustalX1.83软件进行比对分析,最后用Mega3.1软件构建系统发育树,系统发育分析结果表明,8株菌株与支气管败血波氏杆菌DSM10303的同源性达到了99.9%,并在同一个分支内。 相似文献
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猪源支气管败血波氏杆菌河南株的分离鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
从河南省多个养猪场采集126份有呼吸道症状猪的肺脏组织样品或鼻拭子,进行支气管败血波氏杆菌的分离鉴定。根据细菌培养特性、革兰氏染色镜检、生化试验和PCR鉴定,确认分离出11株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchisepti-ca,Bb)。对Bb最重要的3种毒力因子fha、prn、dnt基因进行PCR检测,除2株为prn基因阴性外,其它PCR结果均为阳性。红细胞凝集试验显示各菌株均能不同程度的凝集猪和羊的红细胞。乳鼠皮肤坏死试验表明,各菌株均能不同程度的造成乳鼠皮肤坏死。通过小鼠毒力试验,筛选到4株强毒菌株(HN0710、HN0806、HN0922、HN0827)。 相似文献
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兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其免疫原性检测 总被引：1，自引：0，他引：1
2004年,山东省某一大型养兔场的20~30日龄幼兔突然大批发病死亡。病兔早期精神不振,多数病兔鼻腔流出脓性鼻液,随着病程的延长逐渐表现为呼吸困难,并出现鼻鼾声,以体况瘦弱,腹泻为主要症状。从中主要分离到4株细菌,根据其形态学特性、培养特性、生化特性、血清学反应特性等将分离菌鉴定为兔支气管败血波氏杆菌。然后对所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株进行(G+C)mol%含量的测定以及16SrRNA的扩增,结果(G+C)mol%含量为61.7%~62.4%,与Kersters K结果相符(61.6%~62.6%);而该菌16SrRNA核苷酸序列与GenBank中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为82.7%,与本实验室保存的禽波氏杆菌及兔败血波氏杆菌参考菌株S80103株同源性高,分别为99.7%和99.9%。利用所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株制备免疫原,通过免疫孕前母兔,使仔兔获得母源抗体,而使幼仔兔获得早期保护,效果较好。 相似文献
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本试验旨在了解近年来浙江省兔支气管败血波氏杆菌的感染情况及耐药状况,指导合理用药,检测细菌的耐药基因,探究其耐药机理.根据细菌形态、培养特性、生化试验,结合PCR法对分离菌株进行鉴定;K-B纸片扩散法检测细菌对18种常用抗生素的耐药率;设计耐药基因特异性引物,PCR法扩增耐药基因,并进行测序分析.结果显示,分离鉴定出2012-2014年22株兔支气管败血波氏杆菌;药敏结果显示,分离菌对青霉素G、头孢拉定、链霉素、林可霉素、克林霉素、甲氧嘧啶耐药严重,对多黏菌素B、左氟沙星、强力霉素、四环素等药物敏感,耐β-内酰胺类药物的细菌中检测到耐药基因blaTEM.结果表明,兔支气管败血波氏杆菌是引起兔呼吸道疾病的主要病原菌,分离菌多重耐药,耐药率较高,检测到的耐药基因与耐药表型相符. 相似文献
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家兔传染性鼻炎是一种以家兔慢性鼻炎、支气管性肺炎及肺部出现脓疱为主要特征的呼吸道传染病，其病原菌主要是支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica）和多杀性巴氏杆菌（Pasteulla multocida）。目前，消除或控制兔支气管败血波氏杆菌所致疾病的措施很多，如应用抗生素防治，以及建立无此病的兔群和培育遗传抗病品种等。但由于滥用抗生素而导致的耐药菌株的出现，使无病兔群的建立及抗病品种的培育困难较大，且费时费工，成本高。内蒙古农业大学动物科学与医学学院利用从内蒙古某兔场送检的病兔体内分离到的，经鉴定为兔支气管败血波氏杆菌菌株，研制出兔支气管败血波氏杆菌蜂胶佐剂灭活菌苗，并进行了安全性及免疫效果试验。现将试验情况报道如下。 相似文献
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免疫失败兔群一株支气管败血波氏杆菌免疫原性及致病性初探 总被引：1，自引：1，他引：0
采用微量凝集试验（ＭＡＴ）〔１～３〕法,对免疫失败兔群分离的兔支气管败血波氏杆菌分离菌株（Ｂｒ－Ｓ９５）与本室保存的参考菌株（Ｓ８０１０３）制备的疫苗的免疫效果作了检测,比较结果表明,兔支气管败血波氏杆菌Ｂｒ－Ｓ９５菌株与本室保存的Ｓ８０１０３菌株制苗免疫后的抗体水平在各自高峰期差异不显著（Ｐ＞０．０５）。交叉免疫试验表明,分离菌株免疫的抗体水平在１∶２８．８７时,对Ｓ８０１０３菌株的攻毒具有保护力,而Ｓ８０１０３菌株免疫后的抗体水平达到１∶２９．６７时仍不能抵抗分离菌株的攻毒,因此分离菌株是一株毒力较强的支气管败血波氏杆菌。 相似文献
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对从内蒙古海拉尔区某规模化兔场病死仔兔肺脏中分离到的1株病原菌进行了培养特性观察、革兰染色、生化试验与PCR鉴定,鉴定结果显示该分离菌株为支气管败血波氏杆菌。为进一步了解该菌株的耐药情况,对其进行了药敏试验及部分耐药基因的检测,结果表明分离菌株对青霉素G、阿莫西林、头孢拉啶等β-内酰胺类抗生素耐药严重,其次为四环素类抗生素,对卡那霉素、诺氟沙星等氨基糖苷类与喹诺酮类抗生素高度敏感。耐药基因检测筛选到bla TEM与tet B两种耐药基因,与分离菌的耐药表型相符。实验结果对兔波氏杆菌病的临床合理用药具有重要的指导意义。 相似文献
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为深入了解兔支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica, Bb）,试验将病兔体内分离得到的菌株进行菌株鉴定、生长曲线测定、致病性研究、药敏试验及耐药基因检测,期望了解该菌的生长规律,为临床用药及防控奠定基础。通过Gram染色镜检、分离培养、16S rDNA序列分析对分离菌株进行鉴定,测定了该分离株的生长曲线、半数致死量、耐药性并对分离菌株进行β-内酰胺酶耐药基因的检测。结果表明：分离得到1株革兰氏阴性杆菌,命名为P201215,该分离株的16S rDNA基因序列与GenBank中支气管败血波氏杆菌（登录号为NR113628.1）的同源性为99%。分离株的对数生长期为2～9 h,9 h后进入平台期;对KM小鼠的半数致死量为1.19×107 CFU。药敏试验结果显示,分离株对部分头孢菌素类药物耐药,对大部分β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类及氨基糖苷类药物敏感,PCR检测未检出超广谱β-内酰胺酶耐药基因。 相似文献
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兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其生物学特性测定 总被引：2，自引：0，他引：2
本实验对赤峰市种兔场送检的病兔进行实验室诊断。经病理剖检、病原分离培养分离到两株细菌，通过对其形态学、培养特性、生化试验鉴定为兔支气管败血波氏杆菌。而对其致病性和药物敏感性等生物学特性进行的测定结果表明，分离菌株具有较高的致病性，对青霉素类药物呈高度敏感，而对磺胺类药物敏感性较低。 相似文献
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家兔传染性鼻炎是一种以家兔慢性鼻炎、支气管性肺炎及肺部出现脓疱为主要特征的呼吸道传染病,其病原菌主要是支气管败血波氏杆菌(Bordetellabronchiseptica)和多杀性巴氏杆菌(Pasteulla multoci-da)。目前,消除或控制兔支气管败血波氏杆菌所致疾病的措施很多,如应用抗生素防治,以及建立无此病的兔群和培育遗传抗病品种等。但由于滥用抗生素而导致的耐药菌株的出现,使无病兔群的建立及抗病品种的培育困难较大,且费时费工,成本高。内蒙古农业大学动物科学与医学学院利用从内蒙古某兔场送检的病兔体内分离到的,经鉴定为兔支气管败血波氏杆菌… 相似文献