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四倍体草鱼的诱导和存活 总被引：1，自引：0，他引：1
采用热和静水压刺激草鱼受精卵诱导四倍体。在21C受精后36、39和42分钟,对受精卵进行9000和10000psi(磅/平方寸)静水压处理,鱼苗孵出后一天测定四倍体的诱导率为25%～100%(平均52.5%)。最适处理时间一般在卵裂前15～20分钟,这时能抑制核分裂。在受精后65、66和70分钟,对多细胞受精卵进行压力刺激(9000和10000psi),也可以诱导四倍体,受精后33～60分钟,对受精卵进行1.25和1.5分钟42C热刺激,四倍体的诱导率为0～100%;而同样温度的1分钟热刺激则不能产生四倍体。总之,大多数处理组的孵化率完全不同,且直接和四倍体转化有关。四倍体鱼苗存活天数没有超过50日龄。可以认为死亡鱼苗中有部分为非整倍体(次四倍体)和2n～4n嵌合体所引起。 相似文献
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采用静水压法处理半滑舌鳎(Cynoglossus semiliaevis)受精卵以抑制其卵裂并进行染色体加倍,筛选出有效的静水压处理起始时间、处理强度及其持续时间。结果表明,孵化水温(23±0.2)℃时,授精后21.5 min,采用40 MPa的静水压压力,休克处理4.5 min,四倍体诱导效果最好,鱼苗四倍体率达到68.3%。采用流式细胞仪分析了四倍体鱼苗细胞DNA含量,表明四倍体鱼苗细胞DNA含量为二倍体对照鱼苗的2倍。通过染色体制作分析表明四倍体鱼苗的染色体数为84条,而二倍体对照鱼苗的染色体数为42条。本研究采用静水压方法,在国内外首次建立了半滑舌鳎四倍体诱导方法。本项技术的建立旨在为大量生产半滑舌鳎三倍体不育群体奠定基础。 相似文献
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虹鳟受精卵第一次卵裂组织学观察及四倍体制备最佳时机的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
采用组织切片技术对虹鳟受精卵第一次卵裂进行观察,且利用热休克和静水压处理受精卵,诱导四倍体。其结果显示,静水压诱导效果较好,在受精后8h进行诱导四倍体的出现率最高,达到25～28%。热休克诱导未出现四倍体。受精卵在受精后400min(积温43.5℃.h)处于第一次卵裂前期,受精后490min(积温52.5℃.h)处于第一次卵裂中期,受精后640min(积温66.8℃.h),处于第一次卵裂后期,670min(积温69.3℃.h)处于第一次卵裂末期,700min(积温71.8℃.h)以后形成卵裂沟,并穿过整个受精卵,产生两个均等大小的两个卵裂球(blastomeres)。 相似文献
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同时采用冷休克法和静水压法进行大黄鱼（Pseudosciaena crocea Richardson）倍体诱导条件研究，同时比较适合条件下两种方法诱导效果差异以及大批量诱导组不同生长阶段三倍体榆出率的差别。结果表明：（1）冷休克法和静水压法都可成功诱导出大黄鱼二倍体。冷休克法适宜诱导条件为20℃培育水温下授精后3min，在3～4℃海水中处理8～10min；静水压法适宜诱导条件为同样培育水温下授精后3min，在静水压450kg／cm^2下处理3min。三倍体诱导率受处理时刻、处理时间和处理温度（或压力）3因素的影响。（2）综合三倍体诱导率、处理后受精卵原肠期存活率和仔鱼孵化率，静水压法诱导效果要明显优于冷休克法。（3）采用冷休克法进行大黄鱼三倍体大批量诱导，早期胚胎、初孵仔鱼和4月龄幼鱼三倍体检出率分别为34．03％、29．54％和14.81％。表明随生长发育诱导组三倍体检出率有下降趋势。 相似文献
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静水压法诱导虾夷扇贝多倍体的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了探究采用静水压法诱导虾夷扇贝多倍体的适宜条件,研究了在不同的处理时机和压力强度条件下,静水压处理对虾夷扇贝受精卵多倍体诱导效果的影响。试验结果表明:(1)在授精后80 min内处理,所得的多倍体以三倍体为主。在授精后75 min,以60 MPa持续处理5 min,所得的三倍体率最大,达100%。(2)在授精后150~190 min处理,既能获得三倍体也能获得四倍体,但获得的四倍体率要高于三倍体率。其中,在授精后170 min,以65 MPa持续处理3 min时得到的四倍体率最大(54.39%)。 相似文献
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以热休克抑制受精卵第一次卵裂，进行日本沼虾四倍体诱导实验，热休克温度在３８、３９、４０和４１℃，于产卵２１０￣２３０分钟后，处理１￣２分钟均可获得四倍体胚胎，４０℃处理１．５分钟，四倍体胚胎诱导率达３６．８％，３８和３９℃处理２分钟后所获得的嵌合体胚胎比率大于四倍胚胎比率，而热休克温度４０℃时，四倍体率显著高于合体比率，４１℃处理时由于有丝分裂异常导致胚胎死亡率高，更适宜的处理时间有待进一步研究， 相似文献
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冷、热休克法诱导黄颡鱼三倍体的比较研究 总被引：5，自引：0，他引：5
分别采用冷、热休克抑制第二极体释放的方法诱导黄颡鱼三倍体。结果表明,在卵受精后2min,5℃处理20min,胚胎时期的三倍体率达70%左右,孵化率50%左右,幼鱼时期三倍体(含嵌合体)的检出率为25%,此条件为冷休克处理的优化参数;在卵受精后2min,40℃处理2min,胚胎时期的三倍体诱导率达58%,孵化率为39%,幼鱼时期三倍体(含嵌合体)的检出率为40%,此条件为热休克处理的优化参数。正交分析得出,冷休克条件下起始休克时间是原肠期三倍化率和孵化率的重要影响因子,温度对畸形个体的产生有重要影响;热休克条件下,参考三倍体率、畸形率、孵化期相对存活率三者而言,休克温度均是重要因素。比较观察到冷休克处理组的胚胎受损情况严重,后期的成活率较热休克处理组要低,总体诱导效果逊于热休克处理组。 相似文献
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近几年来，海洋贝类三倍体的研究进展迅速，用四倍体与二倍体杂交的方法理论上能产生１００％的三倍体，从而方便、高效、稳定地生产三倍体，克服直接诱导的不足，开辟了三倍体诱导研究中的一个崭新的方向。四倍体也因此逐步成为海洋贝类染色体操作技术中的热点。一、贝类四倍体的研究现状贝类四倍体研究历史较短，自从Stephens和Downing（１９８８）报道了对长牡蛎四倍体的研究，至今仅有十几年，与人工诱导贝类三倍体相比，人工诱导四倍体的技术难度更大。因为诱导贝类三倍体是通过阻止第一或第二极体的释放来增加一个染色体组，而诱导贝… 相似文献
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扇贝异源四倍体诱导的初步研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本文采用种间杂交的方法诱导栉孔扇贝（(Chlamys farreri♀）×虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis♂）异源四倍体,且对扇贝异源四倍体的诱导条件进行了优化。采用流式细胞术对扇贝异源四倍体诱导后代的倍性构成进行分析。综合受精率、D形幼虫率、幼虫的发育状况及倍性比率等参数,得出50mg/L 6-DMAP持续处理15min抑制异源受精卵第一极体的释放为适宜诱导组合。流式细胞仪检测结果表明处理15min诱导组获得17.30%的四倍体。作者还对实验中出现的问题进行了讨论。 相似文献
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静水压休克法诱导三倍体鲶鱼（silurus asotus L）的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
采用静水压休克法诱导三倍体鲶鱼。通过对受精时间、静水压力及持续施压处理时间三方面进行筛选试验的结果表明，鲶鱼卵受精4－5min，用600－649kg/cm^2的静水压力处理3min，可以获得100％的三倍体鲶鱼，而且胚胎存活率也较高，孵化率达对照组的90％以上，是静水压休克法诱导三倍体鲶鱼的最佳条件。三倍体鲶鱼的倍性用细胞遗传学方法验证。 相似文献
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合浦珠母贝三倍体的卵诱导四倍体 总被引：6，自引：0，他引：6
将合浦珠母贝三倍体的卵与二倍体的精子授精,用０．５μｇ／ｍＬ细胞松弛素Ｂ抑制精卵第一极体的释放诱导四倍体。研究了处理起始时间及持续时间对胚胎孵化率和四倍体诱导率的影响及幼虫的生长及存活。实验结果表明：持续时间与胚胎孵化率呈负相关,而与四倍体诱导率呈正相关,持续时间一般为１５￣１８ｍｉｎ,处理起始时间一般在第一极体出现前３￣５ｍｉｎ。在胚胎期,四倍体诱导率平均为２０％。在幼虫培养阶段,幼虫死亡严重, 相似文献
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人工诱导泥鳅雌核发育试验 总被引：1，自引：0，他引：1
《江西水产科技》2017,(1)
用经UV灭活的野鲤精子激活泥鳅卵,以冷休克与热休克二种方式诱导激活卵的染色体加倍。冷休克组进行休克起始时间、持续时间二参数组合试验,休克起始时间分别为3min、4min、5min,持续时间为20min、25min,休克处理温度0℃-3℃。热休克组休克起始时间为3min35s,持续时间为2min,休克处理温度为39℃-41℃。结果:冷休克组各组合均得到雌核发育二倍体泥鳅苗,以休克起始时间为3min、持续时间为25min组合雌核发育二倍体的诱导率最高,达28.8%-34.1%。热休克组雌核发育二倍体诱导率52.1%-56.3%,与冷休克各组合间均存在极显著差异(P0.01),诱导效果显著好于冷休克组。泥鳅苗经12d培育,冷休克组成活率28.6%,全长0.7-1.6cm;热休克组成活率43%,全长0.5-1.4cm;对照组成活率70.5%,规格与冷休克组相当。 相似文献
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采用照射强度为1500μw/cm2的紫外线对长牡蛎(Crassostrea gigas)精子照射60s,将处理后的精子分别与长牡蛎和栉孔扇贝(Chlamys farreri)的卵子进行受精试验,受精后11.5h用浓度为60mg/L的6-DMAP对栉孔扇贝受精卵分别持续处理15、20、25、30min,运用热滴片法对各实验组进行倍性检测。结果表明,长牡蛎同源单倍体组中单倍体率为75.6%;栉孔扇贝异源单倍体组中单倍体率为14.7%,最佳药物持续处理时间为20min,其二倍体率为24.1%;异源诱导栉孔扇贝单倍体组和二倍体组中胚胎均可以发育到D形幼虫期,其单倍体组中的D形幼虫率为5.0%,20min药物加倍二倍体组D形幼虫率最高为6.1%。本实验结果为异源精子诱导栉孔扇贝雌核发育提供了诱导参数依据。 相似文献
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冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育单倍体 总被引：4，自引：0，他引：4
为探索诱导鱼类雄核发育单倍体的新方法及形成机制,以大鳞副泥鳅为研究对象,无须卵子失活,仅用冷休克诱导雄核发育单倍体,并对其后代的早期胚胎发育、染色体数目、分裂胚细胞学观察等进行了系统分析。早期胚胎发育结果显示,0℃与3℃处理组的孵化率分别为0.83%和57.42%,二者之间孵化率差异显著(P0.05),0℃和3℃处理组均表现出单倍体综合征。染色体倍性鉴定结果显示,0℃处理组染色体分布为18~27,单倍体率为81.40%,3℃处理组染色体分布为20~30,单倍体率为68.97%。分裂胚细胞学观察结果显示,3℃处理组受精后60 min,卵核和第二极体位于胚表面,有一同释放迹象。结果表明,对大鳞副泥鳅受精卵进行3℃冷休克处理60 min,可以成功诱导雄核发育单倍体,研究推测冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育的细胞学机制是雌核和第二极体一同释放。 相似文献
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以性成熟的普通草鱼卵子和经紫外线照射处理后遗传失活的湘江野鲤精子为材料，采用三种不同染色体加倍法诱导草鱼雌核发育，3次重复实验结果表明：在人工诱导草鱼雌核胚胎发育过程中，二倍体诱导率以冷休克法处理组最好，其次分别为秋水仙素处理组织和热克法处理组。 相似文献
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施氏鲟精子诱导匙吻鲟雌核发育 总被引：4，自引：1，他引：3
采用照射强度为10 188 μW/(cm2·s),照射距离为15 cm的紫外线对施氏鲟(Acipenser schrenckii)精子进行4～7 min的照射,用照射后的精子对匙吻鲟(Polyodon spathula)卵进行人工授精,以探索精子的最佳紫外线照射时间.设计热休克起始时间、持续时间和休克温度3因子、3水平的正交试验,以探索人工诱导匙吻鲟雌核发育的理想热休克条件.结果表明:用紫外线照射5 min处理的施氏鲟精子,与匙吻鲟卵受精所得胚胎经染色体观察均为单倍体(n=60),表明照射精子遗传失活的有效性和可靠性;若热休克处理前受精卵保持在(18±013)℃,在一定的休克温度(35～39℃)条件下,于不同时间(受精后16～20 min)起始热休克,持续处理2 min均能诱导受精卵染色体加倍.对热休克处理条件的优化结果表明,将受精卵于受精后18 min,在37℃的水中热休克处理2 min,二倍体诱导率最高,达18.8%.染色体鉴定显示,该条件下处理的胚胎均为二倍体(2n=120),未发现单倍体和非整倍体.本研究为进一步分析异源精子诱导匙吻鲟雌核发育机制以及匙吻鲟性别决定的分子机制奠定了基础. 相似文献
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半滑舌鳎三倍体鱼苗的人工诱导与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
针对半滑舌鳎雌雄个体生长差异过大、雌性性腺发育成熟后腹部凸起影响舌鳎生长和商品鱼质量等问题,开展了人工诱导半滑舌鳎三倍体的研究。采用静水压处理抑制半滑舌鳎受精卵第二极体排出进行染色体加倍,筛选出有效的静水压处理强度及其持续时间。结果表明,孵化水温23 ℃左右时,授精后5 min,采用36 MPa的静水压压力,休克处理4 min,三倍体诱导率最高,达到100%。采用该诱导条件,大批量获得了半滑舌鳎三倍体鱼苗。采用流式细胞仪分析了三倍体鱼苗细胞DNA含量,表明三倍体鱼苗细胞DNA含量为二倍体对照鱼苗的1.5倍。通过染色体分析表明,三倍体鱼苗的染色体数为63条,而二倍体鱼苗的染色体数为42条。 相似文献
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以江苏文蛤为实验材料,采用50mg／L秋水仙索和400μM6-二甲基氨基嘌呤（6-DMAP）处理、抑制受精卵第一极体排放和抑制第一次卵裂的方法,进行四倍体诱导研究。根据不同处理时间,D形幼虫的孵化率分别为38．6％和34．58％。经胚胎和幼虫发育观察发现,在诱导组中异常原肠胚的比例高于对照组;受精后48h,诱导组的滞育担轮幼虫的比例显著高于对照组。在受精后48h取担轮幼虫制作染色体片,诱导组中四倍体幼虫的比例为7．56％-36．2％和9．2％-28-3％,最高诱导率达至Ⅱ了36．2％。同时每个处理组都发现了不同的非整倍体存在。本研究表明,该项技术能有效地诱发文蛤四倍体幼虫,但面临四倍体幼虫存活率低的问题,今后应设法提高四倍体胚胎和幼虫的发育水平。 相似文献