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1.
为建立一种快速诊断由猪链球菌(SS)、猪胸膜肺炎放线杆菌(App)、猪多杀性巴氏杆菌(Pm)、副猪嗜血杆菌(Hps)、猪支气管败血波氏杆菌(Bb)和猪肺炎支原体(Mhp)单独或混合感染引起的猪呼吸道疾病的检测方法,基于上述6种病原菌对应的gdh(SS)、apxⅣA(App)、KMT1(Pm)、16S rRNA(Hps)、fla(Bb)和p36 ldh(Mhp)基因设计特异性引物,通过优化各反应条件建立了能同时检测SS、App、Pm、Hps、Bb和Mhp的多重PCR方法。结果显示,该方法特异性强,仅对SS、App、Pm、Hps、Bb和Mhp有特异性扩增,对大肠埃希氏菌、奇异变形杆菌、停乳链球菌和金黄色葡萄球菌等其他病原菌的扩增结果均为阴性;敏感性较高,对6种病原菌DNA的最低检出限分别为SS 8.66×102拷贝/μL、App 1.05×104拷贝/μL、Pm 8.61×102拷贝/μL、Hps 9.01×102拷贝/μL、Bb 7.54×102拷贝/μL、Mhp 3.86×10... 相似文献
2.
为了解副猪嗜血杆菌(HPS)在石河子规模猪场的流行情况,试验采用ELISA方法进行了副猪嗜血杆菌抗体的检测,并对抗体阳性血清进行了其他呼吸道病混合感染血清学调查。结果表明:330份血清样品HPS抗体阳性率为60.30%(199/330),12个猪场感染阳性率为91.67%(11/12);199份阳性血清中,24.62%(49/199)感染了H1N1亚型猪流感病毒(SIV),49.25%(98/199)感染了猪肺炎支原体(Mhp),84.42%(168/199)感染了猪圆环病毒2型(PCV-2),35.18%(70/199)感染了猪胸膜肺炎放线杆菌(APP),49.75%(99/199)感染了猪链球菌2型(SS2)。说明垦区大部分规模猪场存在HPS感染情况,且混合感染情况比较严重。 相似文献
3.
为了解石河子垦区规模猪场猪流感病毒H1N1亚型(SIV)感染情况,采集石河子垦区6个规模猪场血清,采用血清学方法进行HIN1亚型猪流感病毒抗体检测,同时调查混合感染情况。结果:186份血清样品H1N1亚型SIV抗体阳性率为27.42%(51/186),6个猪场感染阳性率为50%(3/6);51份阳性血清中,82.35%(42/51)感染了猪肺炎支原体(Mhp),80.39%(41/51)感染了猪圆环病毒2型(PCV2),29.41%(15/51)感染了猪胸膜肺炎放线杆菌(APP),50.98%(26/51)感染了副猪嗜血杆菌(HPS),62.74%(32/51)感染了猪链球菌2型(SS2)。说明垦区部分规模猪场存在H1N1亚型SIV感染情况,且混合感染情况比较严重。 相似文献
4.
多重PCR方法快速检测猪的5种呼吸道病原菌 总被引：3，自引：0，他引：3
猪胸膜肺炎放线杆菌(App)、副猪嗜血杆菌(Hps)、支气管败血波氏杆菌(Bb)、产毒性多杀巴氏杆菌(T+Pm)和猪肺炎支原体(Mhp)是最常见的几种猪呼吸道病原菌.笔者参照文献报道的基因序列设计针对App、Hps、Bb、T+Pm和Mhp的特异性引物,对单一PCR条件进行系统优化后建立5重PCR方法.该多重PCR方法能对同一样品中5种病原菌的DNA模板进行扩增,且在5种病原菌之间没有交叉反应;对大肠杆菌等其它6种常见猪细菌性病原的榆测结果均为阴性;对5种病原菌DNA模板检出的最小最均低于160 Pg,且能从攻毒小鼠(App、Hps、Bb和T+Pm)肺脏组织8 h增菌的培养物中快速检测出相应的病原菌.对中国华中地区269份临床样本的检测结果表明,5种呼吸道病原菌在华中地区猪群中普遍存在,且混合感染情况十分严重.这些试验结果表明该多重PCR方法可用于猪呼吸道病原菌App、Hps、Bb、T+Pm和Mhp的单一或混合感染的鉴别诊断及病原流行病学调查. 相似文献
5.
对3个猪场的4头呼吸道疾病综合征病猪肺脏(猪场分别编号A、B、C,其中猪场A 1头、猪场B 2头、猪场C 1头)进行猪肺炎支原体(Mhp)、副猪嗜血杆菌(Hps)和猪胸膜肺炎放线杆菌(App)PCR检测,进而进行细菌的分离鉴定和药敏试验。结果显示:4份病料中App和Mhp均为阴性,Hps在猪场A和C的病料中为阴性,猪场B病料中为阳性;在猪场A分离出奇异变形杆菌和猪链球菌各1株;猪场B分离出1株化脓隐秘杆菌、1株嗜麦芽窄食单胞菌和1株奇异变形杆菌;猪场C分离出1株化脓隐秘杆菌和1株奇异变形杆菌。药敏试验结果显示:化脓隐秘杆菌对诺氟沙星、洛美沙星敏感,嗜麦芽窄食单胞菌对恩诺沙星敏感,奇异变形杆菌对诺氟沙星、恩诺沙星敏感,猪链球菌对诺氟沙星、洛美沙星、环丙沙星、氧氟沙星敏感。小鼠致病性试验结果表明:变形奇异杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和化脓隐秘杆菌均能使小鼠出现一过性精神萎靡;猪链球菌引起试验小鼠全部死亡,具有较强致病力。 相似文献
6.
以胸膜肺炎放线杆菌(App)apx ⅣA基因和猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因为靶基因,分别设计特异性引物和探针,建立App和PCV-2的二重荧光PCR方法。App引物扩增的目的片段大小为132bp,PCV-2为169bp。建立的方法可在同一反应体系中同时对App和PCV-2进行定量检测鉴别,其敏感性分别为1×101拷贝和1×100拷贝,对其他猪病病原核酸的检测为阴性。利用该方法对10份人工感染临床样品进行检测试验,其结果符合率达100%,说明该方法可用于对临床样品中App和PCV-2的检测。 相似文献
7.
【目的】掌握中国规模化猪场猪呼吸道疾病综合征主要细菌性病原的感染情况。【方法】2021年采集来自全国26个省、市、自治区的647个规模化猪场中有明显呼吸道症状猪的肺脏、气管及分泌物、脾脏和淋巴结等病料2 204份。将病料接种平板后进行纯化培养,可疑菌落通过形态学观察、革兰染色和PCR进行鉴定,对分离的猪链球菌(Streptococcus suis,SS)、副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)、多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)、支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)和胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)进行血清型分析、混合感染分析和药敏试验。【结果】从病料中分离鉴定出647株病原菌,病原菌分离率为29.35%(647/2 204),其中包括306株SS(13.88%)、137株Hps(6.22%)、86株Pm(3.90%)、74株Bb(3.35%)和44株APP(2.00%)。对分离到的SS、Hps和APP进行血清型鉴定,其中SS以血... 相似文献
8.
为确定河南开封某猪场发生猪呼吸系统疾病综合征（PRDC）的病原,本研究无菌采集病死保育猪肺脏、心脏和脾脏等组织样品,进行细菌学检验和药敏试验,通过PCR/RT-PCR检测样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪流感病毒（SIV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪肺炎支原体（Mhp）等病原,并对核酸阳性病毒性病原的抗原结构基因进行测序和遗传演化分析。结果表明,通过细菌分离培养、形态观察、卫星现象观察和16S rRNA基因鉴定,从病死保育猪体内分离鉴定出1株副猪嗜血杆菌（Hps）,药敏实验表明该菌株对对氨苄西林、阿莫西林克拉维酸、头孢噻呋和四环素几种药物敏感。核酸检测PRRSV和PCV2核酸阳性,分别命名为PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019;进一步对PRRSV/HN-2019和PCV2/HN11-2019的结构基因分析发现,PRRSV/HN-2019与与NADC30分支的毒株亲缘关系较近,属于NADC30-like毒株;PCV2/HN11-2019与PCV-2d分支的毒株亲缘关系较近,属于PCV-2d分支。综上所述,本研究确定该猪场存在PRRSV、PCV2和Hps的混合感染,为该猪场下一步的PRDC有效防控提供了参考依据。 相似文献
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10.
《黑龙江畜牧兽医》2018,(23)
为了掌握近年来纯种陆川猪群中免疫抑制性疾病的感染状况,试验采用PCR方法对2016年3—12月份期间采自广西陆川县及周边地区的389份样品分别进行了猪肺炎支原体(Mhp)、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)、副猪嗜血杆菌(HPS)、猪链球菌2型(SS2)、猪伤寒沙门氏杆菌(ST)、大肠杆菌(E.coli)、猪附红细胞体(E.suis)和猪弓形体(TP)等病原的检测。结果表明:以上病原阳性率分别为26.74%(104/389)、15.42%(60/389)、10.80%(42/389)、11.83%(46/389)、7.71%(30/389)、30.33%(118/389)、21.59%(84/389)、11.31%(44/389),其中E.coli、Mhp和E.suis感染最为严重。从感染的模式看,陆川猪的这些免疫抑制病病原多表现为混合感染,两种以上病原混合感染的样品占74.65%(162/217),其中以Mhp或E.coli与其他病原混合感染类型为主,分别占61.11%(99/162)和56.79%(92/162)。说明纯种陆川猪群中普遍存在免疫抑制病病原感染且以混合感染为主,其中Mhp和E.coli是混合感染的主要病原。 相似文献