枯草芽孢杆菌JNB001蛋白酶特性的研究     

余全法  吴劲松  竺礼斌  王海霞  曲道峰  韩剑众 《中国畜牧兽医》2015,42(12):3261-3267

为了解枯草芽孢杆菌JNB001发酵所产蛋白酶的特性,试验以蛋白酶活力为指标,研究了pH、温度等因素对酶促反应的影响,并通过水解度考察了粗酶液对各种动物蛋白的酶解效果。结果表明,酶反应最适pH为8.0,温度为45 ℃;粗酶液在pH 5.5~9.0的范围内较稳定,过碱则不利于酶液的保存。在45 ℃下热稳定性良好,超过50 ℃保温10 min后残余酶活已不足60%;金属离子Ca²⁺和Mg²⁺、还原剂DTT、表面活性剂Tween-80等能大幅度提高酶活力。而Fe²⁺、Cu²⁺、金属螯合剂EDTA、变性剂SDS等物质则会抑制蛋白酶活性;酶促反应的K_m为6.43 mg/mL,V_max为47.39 μg/min;针对不同蛋白底物,酶促反应较适pH为 7.0~9.0,温度为40~50 ℃。该粗酶液具有水解猪毛、猪蹄甲、脱毛牛皮、明胶等硬蛋白类物质的能力。上述试验结果可为枯草芽孢杆菌JNB001在病死畜禽无害化生物处理体系等方面的工业应用提供参考。  相似文献   

产纤维素酶地衣芽孢杆菌的诱变选育及其产酶条件优化     

余祖华  丁轲  侯奎  李元晓  李旺  刘一尘  曹平华  贾艳艳  程相朝 《中国畜牧兽医》2016,43(4):1006-1011

为提高产纤维素酶地衣芽孢杆菌(Bacillus lincheniformis)的产酶能力,本试验以前期分离的产纤维素酶地衣芽孢杆菌LY02作为出发菌株,通过紫外线对该菌株进行了诱变选育,筛选高产纤维素酶的突变株,并分别对其接种量、培养温度、培养时间、培养基初始pH和金属离子等产酶条件进行了优化。结果显示,经诱变选育后突变菌株的纤维素酶活力较出发菌株提高了34.31%。其最佳产酶培养条件为:接种量1.5%,培养温度37℃,培养时间24 h,培养基初始pH 5.0,K⁺和Ba²⁺对纤维素酶的产生有激活作用。本研究为进一步将高产纤维素酶的突变株开发为生产菌株提供了基础条件。  相似文献   

Mutation Breeding and Optimization of Enzyme-producing Condition of Bacillus lichenniformis Producing Cellulase     

YU Zu-hua  DING Ke  HOU Kui  LI Yuan-xiao  LI Wang  LIU Yi-chen  CAO Ping-hua  JIA Yan-yan  CHENG Xiang-chao 《中国畜牧兽医》2016,43(4):1006-1011

In order to improve the ability of producing cellulase of Bacillus lichenniformis, the mutational strain was screened after Bacillus lichenniformis LY02 was induced by UV.Then the best optimal enzyme-producing condition, inoculum size, temperature, incubation time, initial pH and metal ions were studied.The results showed that the cellulase activity of mutated strain was increased by 34.31%.And the best optimal ferment conditions were as follows:Inoculation concentration was 1.5%, cultivated temperature was 37℃, ferment time was 24 h, initial pH of medium was 5.0, and K⁺ and Ba²⁺ could promote the cellulase producing.These results were contributed to develop the strain to be applied in practice.  相似文献   

一株高产内切纤维素酶贝莱斯芽孢杆菌的产酶条件优化及酶学性质分析     

陈龙  吴兴利  李立佳  魏炳栋  于维  闫晓刚  谷巍  徐海燕  刘臣  刘洪亮  张芳毓 《中国畜牧兽医》2019,46(5):1353-1361

试验旨在对一株杜仲树皮内生菌贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)的内切纤维素酶(CMCase)进行产酶条件优化及酶学性质分析,为探究贝莱斯芽孢杆菌CMCase的相关特性提供参考依据。采用单因子试验设计,分别优化pH、接种量、温度、时间、碳源和氮源等发酵条件,并探讨温度、pH、底物专一性、金属离子及表面活性剂对CMCase的影响。结果表明,以玉米秸秆为碳源(30 g/L)、豆粕为氮源(30 g/L)、3%接菌量、pH 7.0的条件下37℃培养48 h,贝莱斯芽孢杆菌157的CMCase最高可达(5.14±0.18) U/mL。经CMCase酶学性质分析发现,贝莱斯芽孢杆菌157的最适酶反应温度为60℃,最适pH为5.0;温度稳定性试验发现,在40和50℃时,相对剩余酶活力均高于80%,随着温度的升高,酶活力逐渐降低,当温度高于55℃,相对剩余酶活力约为50%;pH稳定性试验发现,在pH 5.0～10.0之间耐受性良好,相对剩余酶活力均高于90%,随作用时间的延长,相对剩余酶活力变化不大。贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase属于典型内切型纤维素酶。Na^+、Mg²⁺、Ca²⁺可促进贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase酶活力,而Co²⁺、Hg²⁺、Fe²⁺、Cu²⁺和SDS抑制CMCase酶活力;表面活性剂Tween-80、Tween-20、Triton X-100对贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase无影响。本试验通过对贝莱斯芽孢杆菌157进行产酶条件优化及CMCase酶学性质分析发现,贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase具有产酶量高,耐受pH范围广的特点,在饲料添加剂、洗涤剂和造纸领域中具有一定的应用价值。  相似文献   

产β-甘露聚糖酶内生菌的筛选、鉴定及酶学性质研究     

陈智慧  严琳  莫海飞  陈炼红  任靖琦  伍红 《中国畜牧兽医》2017,44(8):2496-2502

试验从萌发的花魔芋实生种子中筛选出一株产β-甘露聚糖酶的内生菌,对该菌株进行鉴定并研究所产β-甘露聚糖酶的酶学性质。采用透明圈法初筛,DNS法测酶活力,摇瓶发酵复筛获得产酶最高的菌株,利用16S rDNA序列分析对该菌株进行鉴定并对所产酶的基本酶学性质进行研究。结果显示,该高产β-甘露聚糖酶的内生菌株与路德维希肠杆菌（Enterobacter ludwigii）同源性达99%。所产β-甘露聚糖酶的最适温度为60℃,在30~50℃条件下较稳定;最适pH为6.0,在pH 4.0~9.0的条件下较稳定;Zn²⁺（117.84%）、EDTA（115.80%）、Cu²⁺（113.76%）对β-甘露聚糖酶有较强的激活作用,Mn²⁺（22.02%）对其有强烈的抑制作用;以魔芋粉为底物时,Km值为26.65 mg/mL。该菌摇瓶发酵72 h后,β-甘露聚糖酶酶活力达9.48 U/mL,具有良好的酶学性质,在动物饲料工业中具有广阔的应用前景。  相似文献   

燕麦根腐病拮抗菌的筛选及抑菌特性研究     

金艳丽  姚拓  兰晓君  李昌宁  马亚春 《草地学报》2022,30(5):1095-1101

本研究采用平板对峙法从健康燕麦根际筛选能够拮抗燕麦根腐病致病菌(禾谷镰刀菌)的菌株,同时,将早期研究获得的生防菌株纳入筛选范围。采用透明圈法测定菌株产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶以及产铁载体的能力,对菌株进行复筛,并将产酶能力优良的菌株进行定量测定;利用酸沉淀法进行脂肽类物质粗提并验证其抑菌能力,对生防特性优良的菌株进行16S rRNA分析鉴定。结果表明,共得到4株综合特性优良的菌株,抑菌率均达到65%以上;铁载体活性34.33%～59.57%、蛋白酶活性36.88～70.12 U·mL^-1、纤维素酶活性7.68～22.28 U·mL^-1、淀粉酶活性80.56～167.26 U·mL^-1;菌株分泌的脂肽类物质对病原菌抑菌率最高为68%。通过16S rRNA鉴定,4株菌分别为枯草芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌、萎缩芽孢杆菌和皮尔瑞俄类芽孢杆菌。本研究筛选的4株生防细菌均可分泌多种抑制菌物质,具有进一步开发为生物杀菌剂的潜力。  相似文献   

枯草芽孢杆菌YT168-6产抗菌肽sublancin的发酵工艺优化及培养基筛选的研究     

刘扬科  赵天效  卢晓颖  李磊  成鹏  李松建  解顺昌 《中国畜牧兽医》2021,48(9):3232-3241

研究旨在探索枯草芽孢杆菌YT168-6产抗菌肽sublancin的最适发酵条件和最适培养基组成,以期提高发酵液中sublancin含量。试验先通过单因素试验筛选出最适发酵条件,确定发酵培养基需要的无机盐、碳源、氮源,再通过正交试验、最陡爬坡试验、Box-Behnken设计的响应面分析方法确定最适发酵培养基组成。结果表明：枯草芽孢杆菌YT168-6产抗菌肽sublancin的最适发酵条件为菌种接种量1.0%、发酵温度37℃、发酵液初始pH 7.0;最适发酵培养基为K₂HPO₄ 5 g/L、KH₂PO₄ 5 g/L、MgSO₄ 10 g/L、可溶性淀粉30.2 g/L、蛋白胨23.6 g/L、玉米浆18.2 g/L;优化后sublancin产量由756 μg/mL提到1 581 μg/mL,是优化前的2.09倍。综上所述,本研究所筛选的最适发酵条件和最适培养基可为枯草芽孢杆菌YT168-6菌株工业化生产sublancin提供技术参考。  相似文献   

地衣芽孢杆菌发酵条件优化和抑菌活性测定     

张钰  马曦  赵金标  鲁琳 《中国畜牧兽医》2022,49(7):2812-2819

【目的】探究不同培养及发酵条件对地衣芽孢杆菌19148抑菌作用的影响及地衣芽孢杆菌19148的耐药性。【方法】设计单因素试验,分别在不同温度、酸碱度、金属离子、摇床转速、发酵时间和接种量的条件下培养地衣芽孢杆菌19148菌液,将培养后的菌液离心、过滤制成无菌滤液,并通过牛津杯抑菌试验探究无菌滤液对大肠杆菌K88、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌1882的抑制能力。通过药敏纸片法探究地衣芽孢杆菌19148对27种抗菌药的耐药性。【结果】地衣芽孢杆菌19148在4和75 ℃下生长受到抑制,25、37和45 ℃能正常生长,其中在37 ℃抑菌活性最好。在pH 5.0~9.0的条件下能正常生长,在pH为6.0条件下抑菌活性最好,对铜离子不耐受,但对镁离子表现出了良好的耐受性,且不同浓度镁离子处理组间抑菌活性无显著差异（P＞0.05）。体外发酵试验中,地衣芽孢杆菌19148在3%种子液接种量、150 r/min发酵28 h时,体外发酵的抑菌活性最好。耐药性评价试验结果显示,地衣芽孢杆菌19148对青霉素、四环素、头孢他啶、呋喃唑酮和多黏菌素B 5种抗菌药中介,对头孢哌酮和红霉素等其他22种抗菌药敏感。【结论】地衣芽孢杆菌19148具有较好的稳定性,能应用于工业发酵饲料生产,对抗菌药不具有耐药性。  相似文献   

猪霍乱沙门菌胞外产物的核酸酶活性及其对巨噬细胞胞外诱捕网形成的影响     

李琦  牛俊辉  王晓利  毛静  全映颖  刘桂坤  雷显前  朱鹏瑶  廖成水 《畜牧兽医学报》2021,52(3):733-741

旨在探究猪霍乱沙门菌胞外产物的核酸酶活性及其对巨噬细胞胞外诱捕网形成的影响。采用平板培养法、琼脂糖凝胶电泳法和琼脂扩散法观察猪霍乱沙门菌胞外产物降解λDNA的活性，同时，分析不同温度、pH和金属离子对胞外产物核酸酶活性的影响以及胞外产物对巨噬细胞胞外诱捕网形成的影响。猪霍乱沙门菌胞外产物具有降解λDNA的DNA酶活性，高温和酸性条件抑制DNA酶的活性，活性最适温度和pH分别为42℃和9.0，且胞外产物的核酸酶可被60℃以上的温度灭活。添加Na⁺、K⁺、Ca²⁺和Ni²⁺对胞外产物切割λDNA的活性没有影响；5.00和10.00 mmol·L^-1的Ba²⁺、Mg²⁺和Mn²⁺可提高胞外产物的DNA酶活性；0.01~1.00 mmol·L^-1的Zn²⁺、Cu²⁺和Fe³⁺对胞外产物的DNA酶活性具有促进作用，但Co²⁺则表现出抑制作用。荧光显微镜和定量分析均显示，猪霍乱沙门菌不能刺激巨噬细胞释放胞外诱捕网，而猪霍乱沙门菌胞外产物可显著降解白色念珠菌刺激巨噬细胞形成的胞外诱捕网。本研究证实了猪霍乱沙门菌胞外产物的DNA酶活性，为进一步探究胞外产物在猪霍乱沙门菌感染与宿主免疫互作中的作用提供参考。  相似文献   

莆田黑猪精液中NAGase酶学特性研究     

赖育河  林心宇  黄小红 《中国畜牧兽医》2014,41(11):160-165

试验对以莆田黑猪精液为材料分离纯化得到的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)进行了理化特性研究。经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G100分子筛层析获得PAGE电泳纯化的NAGase酶制剂。以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-GlcNAc)为底物,研究酶催化水解的相关性质。分离纯化获得的酶制剂比活力为1561.42 U/mg,分子质量为58 ku,只有1个亚基,等电点pI为9.13。酶的最适pH为5.6,最适温度为45 ℃,酶在pH 3.6～7.8之间稳定,当pH>8时迅速失活,在50 ℃以下处理30 min酶活力保存稳定,高于50 ℃时,酶活力迅速降低。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,米氏常数K_m为0.82 mmol/L,最大反应速度V_m为39.23 μmol/(L·min)。催化pNP-GlcNAc反应的活化能为27.30 kJ/mol。金属离子中Na⁺、K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺对酶活力无明显影响,Zn²⁺、Cu²⁺、Pb²⁺对酶有抑制作用。  相似文献   

蛋清溶菌酶的改造及其抑菌活性     

李颖  冯自立  白瑜  张宇航  任雪怡 《畜牧兽医学报》2021,52(4):1094-1102

本研究旨在探讨高温酸性改造的蛋清溶菌酶对两种革兰阳性菌G⁺（金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis）和两种革兰阴性菌G^-（大肠杆菌Escherichia coli、鳗弧菌Vibrio anguillarum）的抑制作用。采用高温（57.0±0.1）℃、pH 2.0条件对蛋清溶菌酶进行改造，透射电镜观察改造蛋清溶菌酶的超微结构，8-苯胺基-1-萘磺酸（ANS）测定蛋清溶菌酶改造前后疏水性的变化，圆二色谱法与BeStSel软件分析改造后溶菌酶二级结构的改变，并采用牛津杯法测量改造后蛋清溶菌酶对供试菌的抑菌直径，生长曲线测定法测定改造后蛋清溶菌酶的最小抑菌浓度，Western blot检测4种供试菌菌液与菌体中溶菌酶含量变化。透射电镜结果显示，改造后蛋清溶菌酶为短杆状纤维结构；ANS和圆二色谱法结果显示，改造后蛋清溶菌酶疏水性增强，β折叠含量提高31.7%；牛津杯法显示，改造后蛋清溶菌酶对试验菌的抑菌强弱为鳗弧菌>枯草芽胞杆菌>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌；生长曲线测定结果发现，鳗弧菌最小抑菌浓度为8 μmol·L^-1，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆菌的最小抑菌浓度为6 μmol·L^-1；Western blot发现菌液中改造蛋清溶菌酶分子质量未发生改变，而菌体中溶菌酶含量和分子质量发生改变，革兰阳性菌和阴性菌均在10 ku处出现条带，且革兰阳性菌在22 ku处溶菌酶含量增加，但菌液上清均仅在14.3 ku处有条带。结果提示，改造蛋清溶菌酶对革兰阳性菌和阴性菌均具有较强的抑菌效果，为改造蛋清溶菌酶在畜牧业中的应用提供了基础数据。  相似文献   

枯草芽孢杆菌、低聚壳聚糖和丁酸钠对黄羽肉鸡生长性能、免疫功能和肉品质的影响     

范秋丽  蒋守群  苟钟勇  李龙  林厦菁  王一冰  陈芳 《中国畜牧兽医》2020,47(4):1080-1091

试验旨在研究单独添加枯草芽孢杆菌、低聚壳聚糖、丁酸钠或其两两组合添加代替抗生素对笼养黄羽肉鸡生长性能、免疫功能、胴体性能和肉品质的影响。选用720只1日龄快速型岭南黄羽肉公鸡，根据体重一致原则分为8个处理，每个处理6个重复，每个重复15只鸡。8个处理组分别为对照组（无抗生素添加）、抗生素组（200 mg/kg 4%恩拉霉素）、益生菌组（500 mg/kg枯草芽孢杆菌）、低聚壳聚糖组（50 mg/kg低聚壳聚糖）、丁酸钠组（500 mg/kg丁酸钠）、无抗组合1组（500 mg/kg枯草芽孢杆菌＋30 mg/kg低聚壳聚糖）、无抗组合2组（30 mg/kg低聚壳聚糖＋300 mg/kg丁酸钠）和无抗组合3组（500 mg/kg枯草芽孢杆菌＋300 mg/kg丁酸钠）。试验分3个阶段，试验期63 d。结果表明：1~21日龄，各处理组间生长性能和血浆免疫指标无显著差异（P > 0.05）；低聚壳聚糖组法氏囊指数高于对照组和抗生素组（P > 0.05）；益生菌组和丁酸钠组回肠pH显著低于抗生素组（P < 0.05）。22~42日龄，各处理组间生长性能无显著差异（P > 0.05）；无抗组合3组脾脏指数显著高于对照组（P < 0.05）；益生菌组空肠pH低于抗生素组（P > 0.05）；丁酸钠和无抗组合1、2、3组血浆IgG含量显著低于对照组和抗生素组（P < 0.05），且无抗组合2组IgA含量显著低于对照组和抗生素组（P < 0.05）、IgM含量显著低于抗生素组（P < 0.05）；无抗组合1组IgM含量显著高于对照组和抗生素组（P < 0.05）；益生菌组IgA和IgG含量高于对照组和抗生素组（P > 0.05），IgM含量显著高于对照组（P < 0.05）。43~63日龄，无抗组合3组平均日增重显著高于抗生素组（P < 0.05）；益生菌组十二指肠pH显著低于抗生素组（P < 0.05）；无抗组合1组腹脂率显著低于对照组和抗生素组（P < 0.05）；各处理组间肉品质和血浆免疫指标无显著差异（P > 0.05）。综合3个阶段黄羽肉鸡生长性能、肠道pH、免疫功能和胴体性状等结果，1~63日龄快速型岭南黄羽肉公鸡基础日粮中同时添加500 mg/kg枯草芽孢杆菌和300 mg/kg丁酸钠代替抗生素提高生长性能效果较好；同时添加500 mg/kg枯草芽孢杆菌和30 mg/kg低聚壳聚糖代替抗生素提高胴体性状效果较好；单独添加500 mg/kg枯草芽孢杆菌代替抗生素改善肠道健康效果较好。  相似文献   

枯草芽胞杆菌DarA蛋白的鉴定及其原核表达     

于秀菊  孙铮  韩小涛  李钰钰  于淼  董常生 《畜牧兽医学报》2021,52(5):1378-1385

目前,我国全面禁止饲料中添加抗生素,寻找新型的抗生素替代物是当前研究的热点之一。本研究旨在分离枯草芽胞杆菌SXAU18所产具有抗菌活性的蛋白物质,并通过原核表达系统获得其具有抗菌活性的重组蛋白。试验选用硫酸铵沉淀、氯仿抽提、分子截留等蛋白提取技术,对枯草芽胞杆菌SXAU18产生的抗菌蛋白进行分离纯化;通过SDS-PAGE技术和牛津杯扩散法检测分离到的蛋白物质的抑菌活性;通过质谱、生物信息学技术分析预测目的蛋白的基因序列;利用大肠杆菌表达系统和AKTA蛋白纯化系统对目的蛋白进行表达和纯化;借助牛津杯扩散法鉴定重组蛋白的抑菌活性。结果表明,枯草芽胞杆菌SXAU18所产的抗菌物质为相对分子质量15 ku左右的蛋白质,含有共同的特定氨基酸序列—GSSIFGLAPGK,对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌和单增李斯特菌有较好的抑菌活性;通过质谱分析和生物信息学推测SXAU18所产的（主要）抑菌蛋白为DarA;经诱导表达的重组蛋白DarA主要以可溶性上清蛋白形式存在,纯化后的DarA蛋白为单一条带,并具有良好的抑菌活性。结果提示,分离自枯草芽胞杆菌SXAU18的抗菌蛋白DarA具有抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌和单增李斯特菌生长的活性,且可以通过体外表达获取该蛋白。  相似文献   

降解AFB1的枯草芽孢杆菌S1分离与鉴定     

孙向丽  刘宇翾  时子瑶  温长印  田亚东  康相涛  王彦彬 《中国畜牧兽医》2022,49(12):4654-4664

【目的】筛选出能够高效降解黄曲霉毒素（aflatoxin,AF）的菌株,并对其降解活性及残留毒性进行检测,以期为黄曲霉毒素B₁（alflatoxin B₁,AFB₁）污染防治提供参考。【方法】采集耗牛、绵羊等草食性动物粪便和养殖场霉变饲料,以AFB₁的结构类似物香豆素为唯一碳源筛选降解AFB₁效率最高的菌株,并对其进行形态学、生理生化和16S rDNA鉴定。取AFB₁与适量筛选菌株的发酵液混合,使AFB₁的浓度为1 μg/mL,37℃、150 r/min培养,测定培养不同时间AFB₁降解率;应用差速离心法分别制取上清液、菌悬液和菌体,将菌体超声裂解后制得胞内液,测定不同组分对AFB₁的降解率;对上清液分别进行蛋白酶K、蛋白酶K+SDS和热处理,检测处理后上清液AFB₁降解率;分别用不同浓度的饱和硫酸铵沉淀处理上清液,检测AFB₁降解率;应用7 ku透析袋对上清液进行浓缩,检测AFB₁降解率,从而判断菌株活性成分的性质和分布。将鸡肝细胞分为AFB₁组、AFB₁-菌株组、菌株组和空白对照组,用实时荧光定量PCR检测各组鸡肝细胞中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosisi factor alpha,TNF-α）和Bcl-2-associated X蛋白（Bax）基因的相对表达量。【结果】经初筛和复筛,从编号为S₁的绵羊粪便样品中分离出1株菌株,其降解AFB₁的活性最高,降解率可达60.36%。菌株S₁在LB固体培养基上培养12 h,可观察到淡黄色不透明菌落,表面光滑,有隆起,镜检革兰氏染色呈阳性,杆状。16S rDNA基因进行PCR扩增并进一步测序分析,其序列与LC55966.1的同源性为100%。综合16 S rDNA序列分析和生理生化结果鉴定该菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。该菌发酵液与AFB₁（1 μg/mL）反应4、12、24、48和72 h,降解率分别达到10.98%、25.36%、46.24%和52.65%和80.84%。上清液AFB₁降解率显著高于菌悬液和胞内液（P<0.05）。热处理后,上清液的AFB₁降解活性降低,而经蛋白酶K和SDS处理后降解活性基本丧失。用不同浓度饱和硫酸铵处理的上清液AFB₁降解率差异不显著（P>0.05）,而经透析浓缩后的上清液AFB₁降解率显著高于硫酸铵处理的上清液沉淀蛋白（P<0.05）。在鸡胚胎肝脏原代细胞上,与AFB₁组相比,AFB₁经枯草芽孢杆菌S₁降解后诱导IL-6、TNF-α以及Bax的表达量均显著降低（P<0.05）。【结论】筛选到1株枯草芽孢杆菌S₁,其具有较高的降解AFB₁的活性,其降解活性主要来自于培养液上清中的蛋白质;AFB₁经降解后其毒素显著降低。  相似文献   

产蛋白酶芽孢杆菌的筛选鉴定及酶学特性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵龙妹  张玲 《畜牧与兽医》2021,(3):59-64

为了分离筛选产蛋白酶芽孢杆菌,以开发新型饲料添加剂,本研究选取小鼠肠道内容物为样品,通过对样品进行预处理以及酪蛋白平板检测法分离筛选获得产蛋白酶芽孢杆菌,对该菌进行形态学和分子生物学鉴定并分析其生长规律、产酶规律以及所产蛋白酶的酶学特性。结果表明,经形态学和分子生物学鉴定该菌为特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis),其所产蛋白酶的最适反应条件为50℃,pH=8.0,具有一定的高温耐受性,在弱酸、中性和弱碱性条件下表现出一定的稳定性,Ca²⁺和Mn²⁺能够显著提高酶活(P<0.05),Zn²⁺、Mg²⁺、Cu²⁺和EDTA、尿素溶液对蛋白酶活力具有显著抑制作用(P<0.05),培养至16 h菌体量达到最大值,发酵22 h上清液中的蛋白酶活力达到最高值(57.77 U/mL)。该芽孢杆菌的成功筛选分离以及其所产蛋白酶的分析研究,为新型饲料添加剂的开发利用提供了物质基础。  相似文献   

抗菌肽BSN-37的抑菌活性及其稳定性分析     

张炜  杭柏林  司素锦  宁春妹  李杰  胡建和 《中国畜牧兽医》2019,46(1):287-295

试验旨在研究抗菌肽BSN-37的抑菌活性和稳定性。采用微量倍比稀释法测定抗菌肽BSN-37的最小抑菌浓度(MIC),菌落计数法分析抗菌肽BSN-37对大肠杆菌CVCC1568的杀菌动力学特征,扩散法测定抗菌肽BSN-37的盐离子稳定性、酸碱稳定性、血清稳定性、胰酶稳定性、热稳定性、反复冻融稳定性、室温保持稳定性、药效保持时间稳定性。结果显示,抗菌肽BSN-37对革兰氏阴性菌(大肠杆菌和沙门氏菌)的MIC为1.5625～25μg/mL,对革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌)的MIC为1.5625～12.5μg/mL,对真菌(白色念珠菌)没有活性;抗菌肽BSN-37可在90min内完全杀灭大肠杆菌CVCC1568;除了Fe2+和胰酶会影响抗菌肽BSN-37的抑菌活性外,在75～100℃的高温、150～250mmol/L高浓度盐离子(Na+、K+、Ca2+和Mg2+)、20%～25%饱和浓度的Cu2+、pH 4～10、20%～25%的血清、10～12次的反复冻融、10～12d室温保存等条件下仍能保持较好的抑菌活性,药效保持时间可达7.5d。本试验结果表明,抗菌肽BSN-37具有替代抗生素成为新抗菌药物的潜力,为抗菌肽BSN-37的临床应用提供了理论依据。  相似文献   

枯草芽孢杆菌和3种放线菌对盐胁迫下鬼针草和鳢肠种子萌发及幼苗生长的影响     

王桔红  史生晶  陈文  甘桂媚  陈赛娜  李张伟 《草业学报》2020,29(12):112-120

为探查枯草芽孢杆菌和放线菌对植物抗盐性的影响,采用培养皿法研究枯草芽孢杆菌和3种放线菌（粉孢类群2-5、淡紫灰类群6-3和烬灰类群1-6）对盐胁迫下鬼针草和鳢肠种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明：1）枯草芽孢杆菌和3种放线菌在25~75 mmol·L^-1盐浓度下提高鬼针草种子发芽率,而4种菌液对盐胁迫下鳢肠种子发芽率影响较小。2）枯草芽孢杆菌和3种放线菌对盐胁迫下鬼针草根长作用较小,对鳢肠根长具有不同程度的促生作用。3）4种菌液对盐胁迫下鬼针草茎长作用较小,对鳢肠茎长具有显著的促生作用,100 mmol·L^-1盐浓度下鳢肠茎长分别增加了30.56%、28.57%、26.47%和24.24%。4）枯草芽孢杆菌和3种放线菌对盐胁迫下鬼针草干重影响较小,但能不同程度地提高鳢肠干重。枯草芽孢杆菌和3种放线菌对盐胁迫下鬼针草种子发芽率和鳢肠根长、茎长及干重具有较显著的促生作用,有利于鬼针草和鳢肠幼苗适应盐逆境。  相似文献   

枯草芽孢杆菌对7~28日龄羔羊生长和器官发育及肌肉脂肪酸的影响     

孙康  刘绘汇  范慧玉  刘婷  郑琛 《畜牧兽医学报》2021,52(9):2510-2521

旨在研究代乳粉中添加枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）对7~28日龄羔羊生长性能、组织器官、腹泻率及肌肉组织脂肪酸含量的影响。本研究选取体况发育良好的7日龄湖羊公羔（双羔）30只,按同质性原则将羔羊随机分为2组,每组15只,每只为1个重复,给2组羔羊分别饲喂枯草芽孢杆菌含量为0和0.2%的代乳粉,试验期为21 d。在7、14、21和28日龄晨饲前进行称重,计算各生长阶段的平均日增重（average daily gain,ADG）。并且每天饲喂羔羊的同时观察羔羊腹泻情况,计算羔羊腹泻率。在28日龄时每组随机选择8只羔羊进行屠宰,屠宰后称量各组织器官重量,计算其相对指数,并采集羔羊背最长肌和肱二头肌,测量肌内脂肪含量。结果表明：1）枯草芽孢杆菌显著降低了7~14日龄羔羊的末重（P<0.05）,显著提高了15~21日龄和22~28日龄羔羊的平均日增重（P<0.05）,有提高7~28日龄羔羊平均日增重的趋势（P=0.100）;对7~28日龄羔羊腹泻率的无显著影响（P>0.05）。2）枯草芽孢杆菌显著降低了7~28日龄羔羊胰腺重量（P<0.05）,显著增加了蹄占宰前活重比例（P<0.05）,对其他组织器官没有显著影响（P>0.05）。3）枯草芽孢杆菌对7~28日龄羔羊皮张发育无显著影响（P>0.05）。4）枯草芽孢杆菌显著降低了羔羊背最长肌不饱和脂肪酸（unsaturated fatty acid,UFA）、单不饱和脂肪酸（monounsaturated fatty acid,MUFA）、棕榈酸、硬脂酸、二十烷酸、棕榈烯酸、油酸含量和MUFA∶多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid,PUFA）（P<0.05）,显著提高了十五烷酸、肉豆蔻烯酸、神经酸含量和饱和脂肪酸（saturated fatty acid,SFA）∶UFA （P<0.05）;显著降低了羔羊肱二头肌UFA、SFA、MUFA、棕榈酸、硬脂酸、二十烷酸、棕榈烯酸、油酸含量和MUFA∶PUFA （P<0.05）,显著提高了PUFA、n-6PUFA、肉豆蔻烯酸、神经酸含量和SFA∶UFA、PUFA∶SFA （P<0.05）。结果表明,在代乳粉中添加枯草芽孢杆菌对7~28日龄湖羊羔羊腹泻率、器官和皮张的发育无显著影响,但羔羊平均日增重和胴体重有升高趋势。枯草芽孢杆菌显著降低了湖羊羔羊背最长肌中UFA、MUFA、MUFA∶PUFA的含量和肱二头肌UFA、SFA、MUFA、MUFA∶PUFA的含量,显著提高了湖羊羔羊背最长肌中SFA：UFA的含量和肱二头肌中PUFA、n-6PUFA、SFA∶UFA、PUFA∶SFA的含量,表明枯草芽孢杆菌可通过对肌内脂肪酸组成比例和含量的影响,起到改善湖羊羔羊肉品质的作用。  相似文献   

枯草芽孢杆菌、酿酒酵母及其复合菌发酵棉粕营养成分变化的研究     

罗远琴  胡倩  芦岩  张凡凡  马贵军  刘建成  张文举 《中国畜牧兽医》2020,47(2):452-459

试验旨在研究枯草芽孢杆菌、酿酒酵母及其复合菌发酵棉粕的常规营养成分、棉籽肽含量及棉籽肽分子质量分布的变化。试验设4个组：对照组（未发酵组）、试验Ⅰ组（枯草芽孢杆菌-1）、试验Ⅱ组（酿酒酵母）及试验Ⅲ组（枯草芽孢杆菌-1和酿酒酵母复合发酵）。检测各组棉粕样品粗蛋白质（CP）、干物质（DM）、粗灰分（Ash）、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）、粗脂肪（EE）、钙（Ca）、磷（P）、棉籽肽含量和棉籽肽分子质量分布等指标。结果表明：①试验Ⅰ组DM、CP和Ash含量极显著高于其他处理组 （P < 0.01）;对照组EE含量显著高于其他处理组 （P < 0.01）;试验Ⅲ组ADF含量极显著低于其他处理组（P < 0.01）;3个试验组Ca和P含量较对照组均有所提高,其中试验Ⅲ组Ca和P含量显著高于对照组（P < 0.05）。②各试验组之间游离氨基酸和总游离氨基酸含量差异均不显著（P > 0.05）,但与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组总游离氨基酸含量分别提高了134.02%、75.59%和75.44%;③各试验组酸溶蛋白质和棉籽肽含量均极显著高于对照组（P < 0.01）,其中试验Ⅰ组的酸溶蛋白质和棉籽肽含量最高;3个发酵试验组1 000 u以下的棉籽肽峰面积百分比分别为89.41%、77.61%和84.58%。综合以上试验结果,在枯草芽孢杆菌、酿酒酵母及其复合菌的作用下,通过固态发酵能显著改善棉粕的营养价值,为棉粕资源的开发利用提供了理论依据。  相似文献   

瘤胃厌氧真菌木聚糖酶基因的表达与酶学特性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

马玉萍  薛天涵  成艳芬  朱伟云 《畜牧与兽医》2021,(1):24-30

旨在表达来源于瘤胃厌氧真菌基因组的4个木聚糖酶基因A、C、D和F,并比较分析其酶学特性。首先根据大肠杆菌基因编码偏好,合成可在大肠杆菌中表达的木聚糖酶基因序列,然后采用同源重组的方法将各序列分别插入载体pET-28a中,在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中异源表达,并研究其酶学特性,结果成功表达出来源于厌氧真菌的4个木聚糖酶基因。测定其酶学性质发现,4种木聚糖酶的反应最适pH值均为8.0;木聚糖酶D的反应最适温度为37℃,其余3种木聚糖酶的反应最适温度均为45℃;4种木聚糖酶具有广泛的温度稳定性和pH稳定性;金属离子Ca²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺显著促进木聚糖酶活性(P<0.05),而Zn²⁺则有明显的抑制作用(P<0.05);4种木聚糖酶降解山毛榉木聚糖的能力显著高于其他底物(P<0.05)。本研究成功表达了4种来源于厌氧真菌的木聚糖酶,其良好的温度和pH稳定性具有潜在的工业应用价值。  相似文献